III. — UNICITÉ OU PLURALITÉ DES AMIBES DYSENTÉRIQUES

Il est définitivement admis que l’intestin de l’homme héberge deux Entamibes : l’une inoffensive, Entamoeba coli , l'autre pathogène, E. dt/senteriae, dont la spécificité ne soulève plus aucun doute à l’heure actuelle.

Mais à côté de ces deux espèces, rencontre-t-on chez l’Homme d’autres entamibes intestinales et faut-il admettre l’existence de plusieurs amibes dyseutérigènes ! A ces deux questions, la réponse est jusqu’ici négative.

Nous devons cependant indiquer que, dans ces dernières années, il a été décrit un certain nombre d’entamibes intestinales, qui ont

UNICITÉ OU PLURALITE DES AMIBES DYSENTÉRIQUES

été considérées d’abord comme des espèces nouvelles. Au dire des auteurs qui les ont signalées, quelques-unes seraient même douées d’un pouvoir dyse'ntérigène. Mais si nous examinons de près les travaux consacrés à ces divers organismes, nous arrivons à la conclusion que parmi ces soi-disant nouvelles entamibes intestinales, les unes ont été insuffisamment caractérisées ou ont été rangées à tort dans le genre Entarnoeba, et que les auties doivent être rapportées soit à E. dysenteriae , soit à E. colt .

C’est ce que nous allons voir en passant en revue ces divers organismes dans l’ordre où ils ont été découverts.

1) Entarnoeba undulans, Castellani, 1905.

2) Entarnoeba hominis, Walker, 1908.

3) Entarnoeba tropicalis, Lesage, 1908.

4) Entarnoeba phacjocrj toïdes, Gauducheau, 1908.

5) Entarnoeba sp. ? Noc, 1909.

6) Entarnoeba minuta, Elmassian, 1909.

7) Entarnoeba nipponica, Koidzumi, 1909.

8) Entarnoeba brasiliensis, de Beaurepaire-Aragào, 1912.

9) Entarnoeba williamsi, Prowazek, 19 1 1.

10) Entarnoeba polecki, Prowazek, 1912.

11) Entarnoeba hartmanni, Prowazek, 1912.

12) Entarnoeba bütschlii, Prowazek, 1912.

13) Entarnoeba maria, Wenyon et O’ Connor, 1917.

1. — Entarnoeba undulans, Castellani, njo5. — Ce parasite a été décou vert par Castellani, à Ceylan, en association avec d’autres protozoaires, dans les fèces de personnes souffrant de diarrhée.

Les trophozoïtes mesurent en moyenne de 12 à 3o p., mais il y a des individus beaucoup plus petits. Il ne se forme à la fois qu’un seul pseudopode long et étroit. L’émission de ce pseudopode a lieu à des intervalles de i5 à 20 secondes, la rétraction s’opère brusquement. La présence d’une membrane ondulante donne à ce parasite un aspect spécial. Il est animé sur l’une de ses parties d’un mouvement continuel d’ondulation.

L’ectoplasme et l’endoplasme ne montrent pas de différenciation marquée. Le noyau n’est pas constamment visible. Dans le cytoplasme granuleux contenant souvent des bactéries, on voit habituellement une vacuole non contractile.

La phase d’enkyslement n’a pas été observée. Il est certain que les caractères morphologiques assignés à cet organisme par Castellani sont insuffisants pour l’identifier. Sa spécificité reste douteuse. D’après Hartmann, il doit être considéré comme un Trichomonas qui a perdu ses flagelles.

2. — Entarnoeba hominis, Walker 1908. — Walker a obtenu cette amibe eu culture en ensemençant le contenu intestinal, prélevé à la nécropsie, d’une malade de Boston City Hospital.

Ce protozoaire se cultive assez difficilement. Walker lui attribue les caractères suivants : les trophozoïtes, au repos, sont sphériques et ont un diamètre de 6 ;x 5 à i5 jx 4- Le parasite en mouvement prend un aspect ovale ou allongé. Il ne se forme qu’un seul pseudopode lobé. L ectoplasme hyalin n’est visible qu’au moment de l’émission du pseudopode, î’endoplasme est finement granuleux.

Le noyau sphérique mesure de 2 [x 8 à 4 (x 3 de diamètre ; il est entouré par un étroit halo incolore.

Les kystes, de forme arrondie, ont un diamètre de 4 |x 6 à 7 [x 7. Ils n’ont qu’une seule paroi à contour régulier. Le contenu des kystes est finement granuleux, le noyau n’est pas visible. La sporulation est très fréquente, les spores sont nombreuses, sphériques et mesurent de o [x 3 à o |x8. Cette Amibe rentre sans aucun doute dans le groupe des Amibes Umax.

Elle ne constitue qu’une espèce commensale de l’intestin de l’Homme et ne peut trouver place parmi les Entamibes.

3. — E. tropicalis, Lesage, 1908. — A la suite de ses recherches sur la dysenterie des pays chauds, Lesage arrive à conclure que l’amibe qu’il a cultivée et qu’il désigne sous le nom d ' E . tropicalis, est un parasite non pathogène de l’intestin de l’Homme dans les pays chauds comme l’est E. coli dans les pays tempérés.

Il existerait plusieurs variétés à’E. tropicalis, mais toutes ont pour caractères essentiels de s’enkyster en totalité et de posséder un noyau riche en chromatine.

Ces diverses amibes se cultivent facilement à partir de la deuxième culture. Les formes jeunes se présentent comme des masses protoplasmiques amorphes et vitreuses. Plus tard se produit une différenciation entre l’ectoplasme et l’endoplasine. Celuici contient le noyau, des granulations et des vacuoles. Le noyau est plus ou moins apparent. Sa forme et son volume varient suivant l’état d’hydratation de la culture. Dans lesamibes immobiles et sphériques, le noyau tend à devenir central, globuleux, entouré d’une auréole achromatique qui l’isole. 11 a donc les caractères du noyau du type Umax.

La production des kystes se fait d’une façon particulière. L’amibe ne s’enkyste pas à l’état adulte. Elle se divise en amibesfilles de petit volume (5, 6, 8, ro [7.). Ces dernières s’entourent d’une coque, à l’intérieur de laquelle se produisent des amibesfilles d’origine kystique.

D’après Lésa ge,E . Iropicalis se différencie d’E. coli par les caractères suivants : iu elle se cultive; 3° ses kystes sont de petites dimensions; 3° elle possède un ectoplasme; 4" le noyau du kyste ne se multiplie ni en 8 ni en 4-

Elle s’en rapproche : i° parce qu’elle subit l’enkystement total,

UNICITE OU PLURALITE DES AMIBES DYSENTERIQUES 271

endo°'ène ; 20 parce que son noyau est chargé en chromatine.

E. ûfopicalis ne reproduit pas la dysenterie. Lesage considère que Musgrave et Clegg ont étudié ctcuUivé une variété d’E. trooicalîs.

4. — Entamoeba phagocytoïdes, Gauducheau, 1908. — Cette amibe a été isolée à Hanoï, par Gauducheau, d’un cas de dysenterie. Elle phagocyte activement les bactéries et les hématies, d’où son nom de phagocytoïdes .

Gauducheaua surtout étudié les formes culturales de cet organisme. Pour plus de détails nous renvoyons donc le lecteur au chapitre relatif aux cultures d’amibes. Disons cependant ici que Chatton a fait rentrer ce protozoaire dans le groupe des amibes Umax et lui a assigné le nom de Vahlkampfia phagocytoïdes.

5. — Entamoeba spl ? Noc, 1909. — Noc a observé cette amibe en Cochinchine,il ne l’a pas dénommée. Elle diffère notablement par son cycle évolutif de E . dysenteriae et de E.coli.

Les recherches de Noc seront exposées au chapitre consacré aux cultures amibiennes.

6. — Entamoeba minuta, Elmassian, 1909. — Cette amibe intestinale a été trouvée par Elmassian, dans un cas de dysenterie chronique qui aurait été contractée au Paraguay.

Elle existait dans les selles sous les formes libres et enkystées et. en association avec E.coli.

Par ses caractères, elle se rapproche beaucoup de l’Amibe dysentérique, sous le type tetraqena, mais comme elle mesure en moyenne de 12 à il\ g. et qu’elle dépasse rarement 16 à 18 y., Elmassian en a fait une espèce nouvelle qu’il a appelée E . minuta.

A l’état vivant, il n’y a pas d’ectoplasme bien distinct et le noyau est invisible ; dans l’endoplasme on ne voit que quelques amas de bactéries.

Sur préparations fixées et colorées, E. minuta se présente comme une masse arrondie ou ovalaire avec un petit noyau sphérique, très régulier, très riche en chromatine. Le protoplasma a une structure alvéolaire dont les mailles mesurent 1 à 2 p,. Le noyau, de 2 p, 5 à 3 p, de diamètre, est remarquable par la richesse de sa chromatine (plus riche que celui d ’E. coli ), par la régularité de sa forme sphérique et par l’épaississement de la membrane nucléaire. Au centre il existe un petit caryosome de o p, 5, très fortement colorable, entouré parfois de fines granulations. L’auteur a étudié la schizogonie multiple aboutissant à 4 petites amibes et. la formation des kystes.

Elmassian n’a jamais vu de figures de division simple sur plusieurs centaines de préparations qu’il a examinées.

Par contre, il a fréquemment observé des formes végétatives à 4 noyaux se formant par une mitose du noyau primitif, puis par une mitose de chacun des noyaux secondaires.

Elmassian a étudié la formation des kystes qui s’accompagneraient de phénomènes autogamiquesdifférant à peine par quelques détails de ceux décrits par Schaudinn chez E. coli. Notamment il n’a pas vu le réseau chromidial d’où naissent les noyaux secoudaires.

Nous n’insisterons pas davantage sur l’étude du cycle évolutif de cet organisme qui est rapporté par Hartmann à E . coli alors que la majorité des auteurs le considère comme identique à E. dysentericie sous son type tetragena. En réalité, si le texte de l’auteur répond à la description de l’Amibe pathogène, certaines des figures qu’il a données se rapportent à E . coli.

7. — Entamoeba nipponica, Koidzumi, 1909. — Cette entamibe a été rencontrée au Japon par Koidzumi, chez des malades atteints de dysenterie ou de diarrhée et également chez des personnes saines. Dans les selles de dysentériques elle coexistait avec E. histolytica. Les dimensions de cette amibe varient de 10 à 10 p.. L’ectoplasme est nettement distinct de l’endoplasme vacuofaire. Le noyau est bien visible à l’état vivant, il ressemblerait aux noyaux d ’E. coli et d E. tetnagena.

Cette amibe phagocyte les hématies. Elle se multiplie suivant deux modes : par division binaire et par schizogonie laquelle donne naissance à 6 ou 8 mérozoïtes. L’enkystement est total et s’accompagne d’émissions de cbromidies. Les divers stades de la sporogonie n’ont pas été complètement suivis.

Cette entamil)e ne paraît pas avoir d’existence autonome. Hartmann et Whitmore (1912), Walker ( 1 9 1 3 j sont d’avis que sous ce nom d ’E. nipponica , Koidzumi a réuni des formes de dégénérescence appartenant les unes à E. coli , les autres à E. te t rage 11a.

8. — Entamoeba brasiliensis, de Beaurepaire-Aragâo, 191a. — Elle a été découverte au Brésil, par de Beaurepaire-Aragâo dans les matières fécales d’un enfant où elle existait à l’état libre et à la phase d’enkystement.

Les formes végétatives ou trophozoïtes ressemblent à celles de E. coli. Le protoplasma est alvéolaire, le noyau vésiculeux pourvu d’un caryosome central estlimité par une membrane très nette sur laquelle s’appliquent des amas assez épais de chromatine. Les dimensions de l’amibe sont relativement faibles; elles varient de 10 à i5 p-, le diamètre du noyau est de 3 à 4 p-> Les kystes sont entourés d’une membrane à double contour. Ils ont un diamètre allant dey à iG p. suivant leur degré de développement.. Les kystes mûrs possèdent 8 noyaux. Ils se caractériseraientpar la présence

UNICITÉ OU PLURALITÉ DES AMIBES DYSENTERIQUES

d’un faisceau de substance sidérophile parfois double qui divise le kyste en deux parties à peu près égales.

9. — E. williamsi, Prowazek, 191 1 . — Cette amibe intestinale a été trouvée par Prowazek durant son séjour aux. îles Samoa.

^ Elle se rapproche d 'E.coli, mais s’en distinguerait par des caractères d’ordre physiologique. Elle se meut par brusque projection d’un pseudopode. Son cytoplasme contient des cristaux d’excrétion et il se formerait dans son intérieur des chromidies.

Ses dimensions varient de 5 à 25 [a. Comme E. coli, elle se reproduirait par schizogonie et par gamogonie avec réduction chromatique et autogamie. Ayant observé de petites amibes montrant deux noyaux dissemblables, Prowazek incline à penser qu’il y a peut-être aussi hétérogamie. Cette amibe est dénuée de pouvoir pathogène. Prowazek en a fait une espèce nouvelle qu’il a désignée sous le nom d ’E. williamsi. Hartmann et Whitmore en ont fait une variété d’E. coli. En réalité cette entamibe s’identifie complètement avec l’Amibe banale du côlon.

10. — Entamoeba polecki, Prowazek, 1912. — Trouvée d’abord dans l’intestin d’un porc, à Saïpan (lies Mariannes), Prowazek l’a revue dans les selles d’un enfant. C’estune petite espèce de 10 à 12 [a, que Prowazek considère comme nouvelle. Il la caractérise par la position excentrique de son caryosome. On est d’accord maintenant pour rapporter ce parasite kE. coli.

11. — Entamoeba hartmanni, Prowazek, 1912. — Découverte par Prowazek chez une femme métisse de Sawaii, où elle existait en association avec E. coli. Elle mesure de 4 à i3 [a de diamètre et possède un noyau vésiculeux de 2 à 3 ja 3. Les kystes petits, à

parois minces, ont quatre noyaux. Ils contiennent une substance sidérophile en forme de bâtonnets et d’aspect caractéristique. Dans les kystes on peut encore observer un matériel de réserve brun. Cet organisme doit être identifié à E. dysenteriae.

12. — Entamoeba bütschlii, Prowazek, 1912. — Elle a été tiouvée chez un enfant des îles Carolines, dont l’intestin hébergeait E. coli , des trichomonas, des ankylostomes et des ascaris. Elle mesure de ioà 24 ix.Son cytoplasme est grossièrement alvéoaiie. Le noyau vésiculeux possède un caryosome sphérique avec un cerùrioIe. Durant la division, on observe un fuseau promitotique. Les kystes sont sphériques et diffèrent de ceux de E.coli.

Cliatton est d avis que cette amibe doit rentrer dans le groupe des amibes Umax.

l?' Entamoeba nana, Wenyon et O’Connor, 1917. — Le parasite, vu par Wenyon en 1916 et rapporté d’abord par cet auteur a Amocha. Umax , a été décrit ensuite par Swellengrebel et Winoto (féviier 1917), Wenyon et O’Connor (mars 1*117), Dobell et Jepps (r9I7)J etc.

tft aitl nu pathologie exotique.

274 MATHIS. - D’AGENT PATHOGENE DE U'AMIBIASE HUMAINE

Wenyon et O’Connor Tout appelé F. mina. Il diffère cependant notablement par sa structure nucléaire des entamibes et pour UQt^e part il est douteux qu’on puisse le ranger dans le genre Entamœba.

Il se rencontre très fréquemment dans l’intestin humain. Il a une répartition géographique très étendue. On l’a signalé à Gallipoli, à Salpnique, en France, en Egypte, dans le Sud africain, à Sumatra, à Panama, etc. Dobell et Jepps (1917) l’ont décelé dans i5 p. ioq des selles examinées. Il n’a aucune action pathogène.

Il se présente sous les formes d’amibes mobiles et de kystes.

a) Formes mobiles. — Les formes mobiles mesurent de 6 à 12 a de diamètre, en moyenne 8 [j.. Elles se rapprochent par leur structure générale des amibes du type Umax mais elles ne possèdent pas de vacuole contractile. Leur protoplasme, généralement très vacuolajre, devient homogène avant l’enkystement.

Le noyau est difficilement visible à l’état vivant. Sur préparations fixées et colorées, on distingue une membrane nucléaire nette et un caryosome relativement volumineux et souvent déformé irrégulière. Ce caryosome est cependant plus petit que celui d’pne amibe Umax typique. Chez certains individus, il semble occuper une position centrale mais ce n’est là qu’une apparence; en réalité, il est placé excentriquement; parfois on constate que la grosse masse chromatique latérale est unie par un filament à un granule situé sur la membrane nucléaire au pale opposé.

Cette amibe a des mouvements paresseux ; elle émet de rares pseudopodes mousses et hyalins. Elle se nourrit de bactéries. A basse température elle ne tarde pas à s’arrondir et à mourir.

Les. essais, faits pour la cultiver ont jusqu’ici échoué.

b) Kystes. — Les kystes sont ovalaires (8 à io ^ dans leur grand axe) ou sphériques (7 à 8 jx de diamètre). Sur le frais et même aprçs action de l’iode, on 11e peut distinguer aucune structure. Après fixation et coloration, à î’hématoxyline ferrique on aperçoit 1, 2 on 4 noyaux généralement groupés. Les noyaux ont le même aspect que ceux des amibes libres mais dans les kystes au stade qnaçlyinucléé, ils sont de taille plus petite. De très rares kystes peuvent, contenir jusqu’à 8 noyaux.

A l’intérieur des kystes, à côté des noyaux, il existe un nombre variable de granules fortement réfringents possédant certaines réactions de la voluline. Enfin quelquefois et particulièrement au stade binucléé on constate la présence d’une substance qui d’après ses réactions (solubilité dans l’eau, insolubilité dans l’alcool, coloration en brun foncé par l’iode, en rouge brique par le carmin de Best) serait du glycogène (Dobell et Jepps 1917).

Les kystes peuvent se conserver sans altération dams les selles

humides pendant plus de 3 semaines. On peut les colorer aussi bien que dans les matières fécales récemment émises.

Maintenant que l’on a appris à identifier ce protozoaire, on le rencontre sans difficulté. 11 n’est pas douteux qu’autrefois il a été confondu avec des petites formes d ’E. coli. ou d ’E. dysenteriae ou avec des amibes du type Umax.

Bien qu ’E. nana ne joue aucun rôle en pathologie humaine, il était nécessaire de la décrire afin de savoir la distinguer des autres parasites de l’intestin humain.

En résumé, Entamoeba hominis , E . tropicalis, E. bütschlii E. phayocytoïdes sont des amibes du type Umax et paraissent devoir être placées dans le genre Vahlkampfia.

Entamoeba undulans est un Trichomonas qui a perdu ses flagelles.

Entamoeba nana a été rangée à tort, selon nous, dans le genre Entamoeba ; elle est du reste dénuée de tout pouvoir pathogène.

Entamoeba sp. ? de Noc se sépare nettement des Entamibes typiques et son étude aurait besoin d’être reprise.

Entamoeba hartmanni s’identifie à E . dysenteriae.

Entamoeba minuta comprend des formes se rapportant les unes à E. dysenteriae , les autres à E. coli.

Il en est de même à’E . nipponica.

Enfin E. brasiliensis de même qu’/?. Williams i et E. polecki ne diffèrent pas à’E. coli.

De tout ce qui précède, nous voyons que jusqu’ici il n’est pas démontré qu’il existe chez l'Homme d’autre amibe pathogène qu ' E . dysenteriae.

Tous les essais faits jusqu’ici pour cultiver l’Amibe de la dysenterie sur des milieux artificiels ont échoué. On ne semble pas avoir été plus heureux avec l’Amibe banale du côlon et les autres Entamibes de Vertébrés. Il convient cependant de signaler que A. Williams (1911) aurait obtenu des cultures d’amibes possédant les caractères cytologiques des Entamibes et que Fantham aurait réussi à cultiver E . coli. Mais les résultats annoncés par Williams et par Fantham attendent encore confirmation ; aussi, .jusqu’à plus ample informé, nous devons continuer à admettre que les tentatives faites pour obtenir la culture des Entamibes de intestin de l’Homme comme, du reste, des autres Vertébrés sont restées infructueuses.

Il ne sera pas cependant sans intérêt de passer en revue les multiples essais qui ont été tentés pour obtenir la culture des

276 MATHIS. - L’AGENT PATHOGÈNE DE L’AMIBiASE HUMAINE

amibes intestinales en général et de l’Amibe dysentérique en particulier.

Cunningham et Lewis (1881) sont probablement les premiers qui cherchèrent à cultiver les amibes du tube digestif. Ils se servirent de sang et de selles qu’ils stérilisèrent après leur avoir fait subir une fermentation alcaline. Ils annoncèrent avoir obtenu la culture d’organismes amiboïdes en partant de selles d’IIomme et d’animaux.

Kartulis (1885-1891) ensemença du mucus dysentérique dans une macération de paille, alcalinisée et stérilisée. Dans quelques cas il obtint des cultures d’une amibe qui, injectées dans le rectum de chats, provoquèrent des lésions dysentériques. Il conclut, mais à tort, qu’il avait réussi à cultiver E. dysenteriae.

Vivaldi (1894) aurait obtenu des résultats analogues en se servant d’une décoction de foin. Les cultures débarrassées de bactéries auraient provoqué, chez le chat, en injections intrarectales, de la diarrhée suivie d’amaigrissement et même de cachexie.

Par contre, Kruse et Pasquale (1894), Ebstein (1899) n’ont pu confirmer les résultats de Kartulis. De même, Dopter dit avoir obtenu deux fois des cultures d’amibes mais ne présentant pas les caractères de l’Amibe dysentérique.

En 1904 parait un mémoire important de Musgrave et Clegg consacré principalement à l’étude des amibes de cultures. Les auteurs américains disent avoir obtenu, en ensemençant des selles dysentériques, des cultures d’amibes avec lesquelles ils auraient reproduit expérimentalement la dysenterie. Des eaux d’alimentation de la ville de Manille, de végétaux, de fruits, ils ont également isolé des amibes douées d’un pouvoir nettement dysentérigène. D’après eux, pour réussir à obtenir des cultures avec du matériel dysentérique, il est nécessaire, au préalable, d’ensemencer le milieu nutritif avec des bactéries favorisantes.il est également indispensable de faire rapidement le premier repiquage.

Pour déterminer le pouvoir pathogène de leurs amibes de culture, Musgrave et Clegg se sont servis de singes ( Macacus cynomolgus et M. philippinensis) chez lesquels l’amibiase spontanée serait exceptionnelle. Les expériences ont porté sur 21 singes. Les amibes étaient généralementintroduitessous la forme enkystée parla voie buccale ou gastrique. Au bouf d’un mois, les animaux eurent de la diarrhée et dans les jours suivants se déclarèrent des symptômes dysentériques. Les selles muco-sauguinolentes contenaient de nombreuses amibes. Les animaux sacrifiés présentèrent au niveau du côlon des lésions catarrhales et de petites ulcérations rappelant celles d’uue dysenterie humaine de

légère intensité. . .

En portant directement dans le foie, des amibes isolées de l’eau

ou de laitue, Musgrave et Clegg obtinrent \des abcès typiques avec amibes dans le pus. Les injections sous la peau de kystes amibiens provoquèrent des abcès riches en amibes mobiles.

Ils firent ingérer des kystes amibiens à cinq chats, 1 un d eux contracta une amibiase intestinale. La même expérience faite sur deux chiens ne donna aucun résultat.

Enfin un homme avala trois capsules de gélatine contenant une culture, vieille de 3 semaines, d’une amibe d’origine intestinale associée àunbacille inoffensif. Au douzième jour se déclarait une diarrhée légère avec amibes, au vingtième jour le sujet avait du ténesme et des selles muco-sanguinolentes : en résumé les symptômes d’une dysenterie typique.

Deux ans après (1906) les mêmes auteurs apportent les résultats de nouvelles expériences qu’ils ont faites sur les singes avec des amibes de culture de diverses provenances et ils disent avoir obtenu une certaine proportion d’infections expérimentales. Ils concluent que toutes les amibes sont ou peuvent devenir pathogènes. Les caractères morphologiques assignés par les auteurs américains à leurs amibes n’autorisent pas à les ranger dans le groupe des Entamibes. Tout porte à admettre qu’ils ont expérimenté avec des amibes libres du type Umax.

Presqu’en même temps que Musgrave et Clegg, Lesage (igo5) annonce avoir réussi sept fois sur trente « à cultiver une seule et « même amibe, en partant du mucus intestinal de malades atteints « de dysenterie tropicale, soit au début de l’affection, soit au mort ment d’une rechute ». Les cultures injectées dans le rectum de 56 chats provoquèrent chez 56 d’entre euxune entérite, avec selles muco-sanguinolentes, terminée par la mort du 8e au 10e jour. La muqueuse du gros intestin était boursouflée et épaissie, mais ne montrait aucune ulcération. Par ses caractères morphologiques et par le mode de production des kystes, cette amibe, d’après Lesage, se rapprochait d ’ Entamoeba histolyticci. Mais un doute restait dans l’esprit de l’auteur au sujet de son identité, aussi continue- t-il ses recherches et, en 1907, il affirme qu’il aréussi à cultiver l’amibe spécifique de la dysenterie. « Jusqu’à ce jour, « dit-il, on n’avait pu obtenir une forme amibienne identique en « tout point au parasite décrit par Schaudinn, dans les fèces. » Lesage aurait résolu ce problème en se servant comme milieu de culture de l’exsudât leucocytaire du cobaye. L’amibe, dans la culture, aurait tous les caractères du parasite étudié dans les produits humains et déterminerait chez les animaux l’amibiase. Mais revenant l’année suivante (1908) sur la question des Entamibes dans la dysenterie amibienne des pays chauds. Lesage distingue son amibe de culture de E . hislolytica et il la désigne sous le nom d ' E. tropicalis. Il pense (pie ce protozoaire est un parasite

278 MATHI8. - L’AGENT PATHOGÈNE DE L’AMIBIASE HUMAINE

de l'intestin dans les pays chauds comme l’est E. coli dans les pays tempérés.

Walker (1908) a consacré un long- mémoire à l’étude d’amibes de cultures isolées de l’intestin de l’Homme et d’un certain nombre d’animaux (cheval, porc, chien, chat, cobaye). Il a obtenu 44 cultures dans lesquelles il distingue dix espèces bien définies dont huit nouvelles : A. cobayae, A. cnterica, A. fecalis, A. gallopavoniS) A. hominis, A. intestinalis , A. musmili, A. ranae. Les deux autres espèces seraient Amoeba coli Losch et Amoeba mûris Grassi.

En réalité, toutes ces amibes de culture sont du type Umax et les caractères morphologiques des stades amiboïdes et des kystes donnés par Walker sont tout à fait insuffisants pour les caractériser spécifiquement. Walker étudie les facteurs essentiels pour la cultures des amibes sur milieux artificiels. Il considère particulièrement l’influence de l’humidité, de l’oxygène, de la température. Il montre que certaines bactéries conviennent mieux que d’autres à la nourriture des amibes et que celles-ci s’accommodent mieux de milieux consistants et à réaction neutre ou alcaline. En somme, le mémoire de Walker contient beaucoup de renseignements sur la culture des amibes mais n'apporte pas la solution du problème de la culture des Entamibes.

Du reste, Walker revient ultérieurement ( 1 9 1 1 ) sur la même question et il reconnaît que les amibes qu’il a obtenues en culture soit en partant de l’eau de Manille, soit en ensemençant des selles humaines sont toutes du type Umax et sont bien différentes de celles qu’il a observées dans l’intestin humain. Celles-ci sont du type Entamoeba.

Avec 2*3 sur 25 échantillons d’eau de Manille, Walker obtint des cultures d’amibes. Les trophozoïtes ou amibes à l’état végétatif se caractérisent par un noyau dont la chromatine est condenséeen un compactéaryosomeenlouréparun haloacliromalique. Ces amibes, à vacuole contractile presque constante, se multiplient par division binaire et par spores. Les kystes ont un seul nojau de même structure que celui du trophozoïte; Walker ensemença également dès selles humaines riches en amibes et du pus amibien du foie. Il fit 279 cultures avec des selles de r r 3 cas d'amibiase sans symptômes de dysenterie, 1 58 cultures avec des selles de 21 cas de dysenterie amibienne et 27 cultures avec le pus de deux cas d’abcès de foie, soit en tout 454 ensemencements. Les ensemencements de pus hépatique ne donnèrent aucun résultat. Avec les selles il obtint 8 cultures d’amibes.

L’étude de ces protozoaires amena Walker à conclure qu’ils appartenaient au genre Amoeba Ehrenberg, qu’ils n’étaient pas des parasites du tube digestif de l’Homme et qu’ils provenaient

ESSAIS DE CULTURE DE L’AlVlIBE DYSENTÉRIQUE

de kystes d’amibes saprozoïtes ingérés avec l’eau et les aliments étayant traversé sans changement le tube digestif de l’Homme. Walker dit n’avoir jamais observé d’amibes Umax i\ l’état végétatif dans les matières fécales.

Gaudücheau a consacré une série de mémoires (1907-1912) ^ l’étude d’une amibe de culture qu’ila isolée, à Hanoï, de l’intestin d’un dysentérique et qu’il a désigné sous le nom d ’Entamoeba phagocytoïdes. A ce protozaire il assigne les caractères suivants : .

L’ectoplasme est clair, nettement distinct de l’eiidoplasme. Celui-ci est granuleux, parfois vacuolaire. 11 occupe pendant la marche la partie postérieure du corps, il ne pénètre dans les pseudopodes qu’après la complète formation de ceux-ci. 11 renferme le noyau, les résidus de digestion bactérienne, des granulations à réaction métachromatique et des corps spirillaires, lorsque ces derniers existent dans la culture. Le bord libre de l’ectoplasme est ondulé. Au moment de son étalement maximum, on peut le comparer à une membrane légèrement ondulante. La vacuole pulsatile est inconstante. Quand elle existe, elle battoutes les 20 à 3o secondes. Le noyau est difficilement visible sur l’animal vivant.

Gauduchëau dit avoir assisté à l’expulsion de petites boules claires parles amibes. En deux circonstances, il a vu de petits flagelles très mobiles attachés à ces corpuscules.

Pour fixer et colorer les amibes, Gauduchëau recommande tout particulièrement la technique suivante :

Une parcelle de la culture est prélevée à l’aide d’une grosse anse de platine et mélangée sur lame avec un peu de la gélose formant le substratum. On mélange avec soin pour enrober les amibes dans la gélose et on étend Je tout sur une lame porteobjet. Ce procédé dans lequel on inclut les protozoaires dans un peud’agar a l’avantage d’éviter la dessication, tout en favorisant l’adhérence au verre.

On fixe pendant 3o minutes dans le mélange suivant :

Acide chromique 1 gramme

Acide acétique 1 ce

Sol. aq. d’acide osmique à 1 °/0 50 ce

Sol. aq. saturée de sublimé... d 50 cc

On lave à l’eau pendant 8 minutes, on mordance dans une solution aqueuse d’alun de fer à 2,5 °/0 pendant 45 minutes au moins. On lave rapidement et on colore dans la solution suivante :

Ilématoxyline J gramme

Alcool à 95a 20 oc

l'iau 1 SO cc

pendant i5 minutes. On différencie par le mordant pendant 8 à 10 minutes, puis on colore par l’éosine à i p. /joo pendant 20 secondes. Série des alcools, xylol, baume.

Pai cette méthode, on constate que durant les premiers jours, 1 amibe est sphérique ou ovoïde. Son diamètre moyen est de8|j.. Au début, la chromatine est dilïuse, ensuite elle se concentre en un caryosome unique, ayant environ 1 v, 5, entouré d’une auréole claire etd une membrane nucléaire très fine, souvent impossible à déceler. En somme le noyau prend les caractères de celui d’une amibe du type Umax.

Il peut y avoir deux et même trois noyaux dont certains en division directe. Quand l’amibe continue son évolution, la membrane nucléaire s accentue et la zone qui s’étend entre celle-ci et le caryosome se colore en rose par l’éosine.

C est à ce moment que se fait l’émission de petits bourgeons internes et que l’Entamibe de culture se rapprochele plus de l’Entamibe du foie. Dans les cultures âgées de huit jours environ, on constate dans le cytoplasme l’apparition de petits anneaux ou de petits grains se colorant en noir par l’hématoxyline ferrique et en rouge ou en noir par la technique de Gauducheau.

Dans certaines conditions, ce parasite peut seprésenter, sous la forme de thalle volumineux et ramifié. Il se forme dans l’intérieur de l’amibe de petites cellules qui seraient probablement de petites entamibes. Enfin dans les cultures épuisées, la plasmogamie intervient. Les cellules se rapprochent et se fusionnent. Il se produit un rajeunissement plasmodial.

Ayant injecté à de jeunes chiens à la mamelle des cultures amibiennes dans le rectum, Gauducheau vit, au i3e jour, apparaître dans les selles, du sang et des mucosités contenant des amibes et des Trichomonas. Il existait entre l’état flagellé et l’Entamibe de culture toutes les formes intermédiaires. De même chez deux malades, Gauducheau aurait observé tous les stades intermédiaires entre les formes sphériques ou ovoïdes à simple noyau et les flagellés. Il conclut à l’unicité des Entamibes et des Trichomonas.

Gomme Musgrave et Glegg, Gauducheau est donc d’avis que les formes de culture résultent d’une adaptation de l’Entamihe à la vie sur les milieux artificiels, il pense que suivant des conditions ambiantes symbiotiques qui restent à déterminer, l’Entamibe présenterait trois stades dans son cycle évolutif : « i° la grosse « forme parasite des cellules de l’organisme (amibiase) ; 20 la « forme cultivée et décrite par lui, qui est parasite des bactéries « dans l’intestin ou dans le milieu extérieur ; 3° le flagellate « ou état libre du protozoaire complètement développé. »

L’organisme étudié si munitieusement par Gauducheau est fort

intéressant, mais n’a rien de commun avec l’Amibe de la dysenterie. Chatton l’a fait rentrer dans le groupe des amibes Umax et l’a désignée sous le nom de Vahlkctmpfia phagocytoïdes. Les cultures de cette amibe présentent une particularité très curieuse. Lorsque le protozoaire est associé àdes bactéries ciliées(B.d’Ebertb ou de Dany sz), on voit apparaître dans la culture à un moment donné, de nombreux filaments spiralés de toutes tailles que Mesnil interprète comme des « cils composés ». Gauducheau reconnaît que l’appareil ciliaire des bactéries est indispensable pour la production de ces éléments, mais pour lui, il y aurait chez eux quelque chose de plus que des produits inertes, soit d’autolyse, soit de digestion du bacille par l’amibe.

Werner (1908) reconnaît qu’il a échoué à obtenir la multiplication des amibes parasites en portant sur les milieux gélosés des selles fraîches contenant des formes végétatives cYE. histolytica et d ’E. tetragena. Il a bien vu se développer une amibe, mais il l’identifie à Amoeba Umax Vahlkampf. Il est persuadé que Musgrave et Clegg, Walker ont eu le même protbzoaire en culture. Werner a montré que les kystes d ’A. limax ingérés par les mouches domestiques, traversent leur tube digestif sans modification, de sorte qu’ils éclosent si on les transporte ensuite sur un milieu approprié. Il incline donc à penser que les amibes qui se développent dans les cultures après ensemencement de selles humaines proviennent des kystes ingérés avec les aliments et ayant traversé le tube digestif sans subir de modifications.

Williams et Gurley (1909) déterminèrent des crises typiques de dysenterie chez un chat, en lui faisant ingérer Amoeba limax isolée d’épluchures de pomme de terre. Un chat auquel on fit absorber uniquement les bactéries associées avec les amibes dans les cultures resta indemne.

Noc publie en 1909 le résultat des recherches qu’il a poursuivies en Gochinchine, de rqo5 à 1908, sur la dysenterie amibienne. Afin de se mettre à l’abri des objections faites à Musgrave et Clegg, à Lesage, en particulier, que les cultures amibiennes obtenues en partant des selles dysentériques résultaient du développement des kystes d’amibes saprozoïtes coexistant dans les matières fécales et non du développement de l’Amibe pathogène, Noc se servit comme matériel d’ensemencement de pus d’abcès hépatique contenant des amibes. Il obtint trois fois des cultures et il indiqua qu’il lui fut possible de passer de l’amibe mobile du pus à l’amibe de culture sans la perdre de vue.

Dans l’abcès du foie, les amibes ont un diamètre qui va de 7 a 25 p. et même jusqu’à 60 p.. A cet état de développement, la chromatine du noyau est très réduite ou fait défaut. Le protoplasma est chargé de granulations réfringentes ou chromidies réparties sur

282 MATHIS. - L’AGENT PATHOGÈNE DE L’AMiBIASE HUMAINE

les travées protoplasmiques renfermant des corpuscules vacuolairesi

Ces corpuscules que Craig- et, Walker ont désigné sous le nom de « spores » seraient pour Noc des bourgeons internes ou mérozoïteSi De 3 à 7 p. de diamètre, ils sont formes par des grains protoplasmiques extrêmement ténus, entourant un granule chromidiaL Ils peuvent être très nombreuxet certaines amibes arrivent à constituer de véritables plasmodes, formés par la réunion de tous les mérozoïtes, futures amibes-fillës accolées encore les unes aux autres. Grâce aux mouvements de l’endoplasme, ces corpuscules s’acheminent à lapériphérie du corps de l’amibe et selibèrent peu à peu.

L’amibe peut également se multiplier par division binaire et égale. On a donc des amibes-filles de toutes dimensions. Celles qui sont produites par bourgeonnement mesurant de 3 à 4 et de 5 à 7 [j., celles qui sont le résultat d’une division binaire ont de 36 à 4o |x.

En portant du pus hépatique riche en amibes sur gélose alcaline et à la condition d’ajouter une bactérie banale, par exemple du B. pyocyanique, on constate la disparition par plasmolyse du plus grand nombre des amibes. Cependant quelques-unes s’enkystent par contraction globale de tout le protozoaire. Les kystes de 10 à 12 p. de diamètre, en moyenne, donnent naissance à une amibe unique. Celle-ci est bourrée de chromidies et de sa périphérie se détachent bientôt de fins bourgeons protoplasmiques munis d’un grain de chromatine. Le bourgeon se libère, se mobilise et la jeune amibe de 3 à 4 [a de diamètre est constituée. Le bourgeonnement se fait très rapidement.

Les amibes de culture n’atteignent pas les grandes dimensions que l’on note chez les amibes du pus. Cependant dans les cultures que l’on renouvelle fréquemment on peut avoir des formes mesurant de 3o à 4o p.. Elles possèdent parfois une vacuole contractile.

En parlant de mucosités dysentériques ou en ensemençant de l’eau d’alimentation deSaïgon, Noc a obtenu en culture uneamibe identique à celledontnous venons de parler. Il a d’ailleurs retrouvé la même espèce amibienne dans les selles et les ulcérations dysentériques. Ni avec les cultures d’origine hydrique, ni avec celles d’origine intestinale, Noc, n’a réussi à provoquer la dysenterie chez les chats et chez les macaques. Chez ces derniers animaux, on observe assez fréquemment une dysenterie qui ne serait pas de nature amibienne mais probablement vermineuse et due à un oesophagostome.

D’ailleurs Noc n’a pas réussi davantage^ provoquer une dysenterie expérimentale avec des mucosités renfermant des amibes

vivantes et il se demande si la réaction du milieu intestinal de ces animaux n’est pas la véritable cause de leur résistance à l’infection amibienne.

L’amibe étudiée par Noc est une espèce bien particulière; mais elle est notablement différente d ’E. dysenteriae et d ’E. coli.

Le même protozoaire aurait été obtenu en culture, à Bombay, par Greig et Wells (191 1) par ensemencement, sur milieu de Musgrave et Clegg, de selles dysentériques et de pus d’abcès du foie. De l’eau de fontaine, ils ont isolé également une amibe semblable. Ils obtinrent aussi des cultures en ensemençant des selles d’un grand nombre d’animaux sains et en expdsant à l’air libre des plaques de gélose Musgrave et Clegg.

Mais il convient de remarquer que leurs expériences sur les animaux pour déterminer le pouvoir pathogène de leurs amibes de culture ne leur ont donné que des résultats incertains.

Ultérieurement Wells (1911), aux Indes, entreprit des expériences pour démontrer la présence fréquente des kystes amibiens dans les poussières atmosphériques. Il coula du milieu de Musgrave et Clegg dans des boîtes de Pétri. Parmi celles-ci, les unes furent immédiatementrecouvertes, les autres furent exposées à l’air pendant un temps plus ou moins long en divers endroits d’une prison.

Sur 36 boîtes, i4 montrèrent des amibes en association avec des bactéries. Les amibes correspondaient à deux espèces mais étaient toutes du type Umax. Wells conclut que les kystes amibiens en suspension dans l’air peuvent contaminer les fèces et le pus au moment de leur prélèvement et de leur ensemencement sur des milieux de culture, quelque soin quel’on prenne dansces diverses opérations. Il y aurait donc là une cause d’erreur dans la détermination de l’origine des amibes de culture.

Whitmore (19-11) examinant deux cultures d’amibes provenant de Manille et isolées l’une de fèces, l’autre de pus d’abcès hépatique, les trouve quelque peu différentes mais appartenant toutes deux au groupe Umax. Il s’accorde avec Hartmann pour conclure qu’elles 11’ont rien de commun avec les amibes parasites de l’intestin humain.

Contrairement à l’auteur précédent, Fantham, dans une note préliminaire (19 11), dit avoir réussi la culture d ’ Ehtatnoebu coli. Le matériel d’ensemencement fut fourni par des dysentériques de Manille et les cultures par repiquages successifs se maintiennent depuis trois ans à la température de 2o°-25°, sur gélose de Musgrave et Clegg. En ajoutant à ce milieu des substances excitatrices de la division cellulaire (substances auxétiques de H. C. Boss), telles que tyrosine à 0,2 °/0 ou leucine qui se trouvent normalement dans 1 intestin, la période du cycle évolutif est

raccourcie et. les amibes se reproduisent pendant plusieurs générations. Sur les milieux à la tyrosine le c^cle évolutif complet iYE. coh se passe en trois jours environ (temp. ao° à 2.5° C.) et on observe un grand nombre de kystes produisant huit éléments. Ces phénomènes ont lieu pendant cinq générations, tandis que sur milieu Musgrave et Clegg, il ne se produit qu’une seule génération et que quelques kystes seulement donnent naissance à 8 éléments. Le scatol ajouté à une préparation contenant E. coli , à l’état végétatif, provoque rapidement l’enkysternent. Fantham considère ce fait comme intéressant car le scatol se trouve naturellement dans la partie inférieure du tube digestif et dans les fèces.

Il faut attendre la publication du mémoire définitif, accompagné de figures, pour porter une appréciation sur les résultats annoncés par Fantham.

Alors que la grande majorité des expérimentateurs ont reconnu avoir échoué à cultiver les amibes en l’absence de bactéries,, A. Williams annonce avoir obtenu des cultures amibiennes pures en se servant de gélose acidulée sur laquelle elle écrasait de la pulpe de divers organes prélevés aseptiquement (cerveau, foie, rate, rein).

Sur de tels milieux, A. Williams aurait cultivé :

i° A. co/f? isolée par Musgrave de matières dysentériques;

2° une A. Umax de macérations organiques ;

3° de petites amibes isolées des fèces de deux chats ;

4° A. intestinalis, origine Walker ;

5° A. cobayae, origine Walker.

Toutes ces amibes ne subiraient aucune modification morphologique du fait de leur culture sur tissus et elles auraient les caractères cytologiques des Entamibes. Nous n’insisterons pas davantage sur ces recherches mais avec Chatton on regrettera l’absence de figures dans un mémoire annonçant des faits aussi importants.

Liston et Martin (1911) ont étudié des cultures d amibes rapportées de Bombay et isolées du pus d’abcès du foie, de selles dysentériques, de l’eau d’alimentation et de fèces d’un siuge sain.

Leurs recherches ont surtout porté sur les amibes obtenues par l’ensemencement de pus hépatique. Dans les cultures il existait deux sortes de kystes, les uns de 6 à 8 \j,, les autres de 12 à i5 y correspondant à deux espèces d’amibes. Les grosses amibes se multiplient par division binaire et par bourgeonnement. Liston a pu suivre dans l’espace de quelques heures la formation de 3 à 4 bourgeons et leur libération de l’amibe-mère. Le bourgeonnement s’observe dans les vieilles comme dans les jeunes cultures. Le noyau des bourgeons se formerait par condensation de chro-

inidies qu’il est d’ailleurs difficile de distinguer des bactéries insérées par les amibes. Autour de ces amas de chromidies, le cytoplasme du bourgeon se différencie peu à peu. Finalement les amoebules s’échappent du corps de l’amibe-mère et continuent leur développement.

La division binaire fut observée par Liston chez les amibes vivantes. D’après Martin qui a étudié les formes de division sur préparations colorées, il s’agirait d’une mitose.

Les petites amibes ne donnent pas de bourgeon et leur division

se ferait. par amitose.

A la suite de l’addition d’une goutte de solution de sel marin à 5 p. 100 à une goutte de culture, ou constate que la grande amibe prend toujours une forme plus ou moins arrondie avec de nombreux pseudopodes lobés et en aiguilles ; tandis que la petite amibe s’allonge et devient vermiforme ou grégariniforme.

Les grosses amibes vivent parfaitement en symbiose avec un coccus producteur de pigment jaune ; les petites amibes sont au contraire gênées dans leur développement par la présence de cette même bactérie.

Des expériences furent faites sur de jeunes chats avec les deux espèces d’amibes. Ni l’ingestion d’émulsions de kystes, ni les injections intrarectales ne provoquèrent le moindre trouble chez les animaux. Liston n’a pu démontrer le pouvoir pathogène de ces amibes, mais il dit que les expériences ont été trop peu nombreuses.

Sur milieux gélosés en l’absence de bactéries, les amibes peuvent vivre un certain temps, mais sans se multiplier ; au 3ejourelle^ s’enkystent.

Sur milieu gélosé, frotté préalablement avec du foie de souris ou de cobaye prélevé aseptiquement, les amibes se nourrissent de globules rouges et de cellules hépatiques mais la multiplication est peu active et les protozoaires ne tardent pas à s'enkyster.

G.-H. Martin étudie la structure et la division des amibes de Liston. Les deux espèces rentrent dans le groupe des amibes Umax.

La grande amibe de l’abcès du foie présente cependant une mitose plus complexe. Il y a deux centrioles, un fuseau et une plaque équatoriale. La séparation des deux plaques-filles se produirait non par un raccourcissement des fibres polaires mais plutôt par un allongement progressif du fuseau de séparation. Quant aux noyaux des bourgeons, ils se formeraient par condensation des chromidies disséminées dans le cytoplasme.

Dans une seconde note, Martin donne quelques renseignements complémentaires sur les premiers stades de la division nucléaire de la grande amibe.

28t) MATH,Sl L’AGENT PATHOGÈNE DE L’AMIBIASE HUMAINE

Jusqu ici les différents auteurs qui avaient obtenu des amibes c u type limax en culture n’avaient pas constaté par l’examen ( irecl la piésence des kystes dans les selles ensemencées. On en était réduit à faire la supposition que les amibes sous la forme en kystée devaient se trouver dans les fèces et qu’elles se développaient lorsqu’elles rencontraient un milieu favorable.

Cfiatlon et Lalung-Bonnaire (1912), les premiers, observent uns les selles d un malade provenant de Cochinchine et souf-

Echelle en u

Fig. 17. — Ainibes du type limax obtenues par ensemencement de selles humaines sur milieu Musgrave et Clegg (original) .

frant de diarrhée chronique, une amibe du type limax. ils caractérisèrent ce protozoaire par son noyau à gros caryosome, pat sa division promitotique et par ses kystes uninucléés. Sur milieu de Musgrave et Clegg, ils obtinrent facilement une culture de cette amibe. En raison des ponctuations présentées par les kystes, ils l’identifièrent à A. punctata de Dangeard.

Par conséquent, les amibes banales du type limax peuvent traverser le tube digestif sous forme de kystes, mais encore dans certaines conditions, elles peuvent se multiplier et se développer dans l’intestin humain. Rien 11e s’oppose à coque ces amibes sous

leur forme végétative, grâce à leurs mouvements pseudopodiques, puissent arriver jusqu’au foie par la môme voie que l’Amibe pathogène.

La pénétration des amibes du type limàœ dans les cavités des abcès hépatiques permetainsi d’expliquer les cas où l’on a obtenu des cultures amibiennes à partir du pus d’hépatite dysentérique. 11 était, par contre, impossible d’admettre que des kystes inertes pussent arriver jusqu’au foie et dans les cas où, à la suite de l’ensemencement de pus riche en amibes pathogènes, on obte-

Fiç. 18. — Division nucléaire chez une Amibe du type Umax (Promitoses), de a à i, ier mode; j, k, l, second mode.

a, Caryosome central volumineux, pas de substance périphérique figurée,, membrane nucléaire mal individualisée ; b, c, Le caryosome s’étire en biscuit, puis s’étrangle et donne naissance à. un, fuseau, de séparation achromatique ; rf. Apparition de la plaque équatoriale; e, La plaque équatoriale grossit, les corps polaires diminuent de volume; /, La plaque équatoriale se scinde en trois chromosomes ; g, Plaque équatoriale à six chromosomes ; h, i, Les chromosomes par moitié migrent aux pôles où ils seconfonsent avec les corps polaires ; j, k, l, La plaque équatoriale ne se fragmente pas en chromosomes mais constitue une masse de chromatine qui se divise simplement en d’étirant. (D’après E. Chatton, in Archives de zoologie expérimentale , oct. 1910).

naît desamibes, on en tirait un argument en faveur de leur identité bien qu’elles fussent différentes par leurs caractères morphologiques et cytologiques.

Enfin Çhatton (1912) a attiré l’attention sur une cause d’erreur que l’on peut faire dans l’identification des amibes de culture.

Ayant ensemencé des selles d’un singe ( Maccicus cynoniolgus )

contenant uneLntamibese rapprochant des Entamibes humaines, Ghatton vit, au bout de six jours, se développer un organisme amœbiiormc, à noyau vésiculeux, sans caryôsome central et ressemblant davantage au noyau du type A’ ntamoebci qu’à celui du type Umax. De petits filaments ne tardèrent pas à s’élever, çà et là, sur la gélose et l’on put se rendre compte que l’on avait affaire à un myxomycète de la tribu des Acrasiées : Dictyostelium mucoroides, Breleld. Le fait indiqué par Pinoy que certains myxomycètes peuvent se cultiver, presque indéfiniment, à l’état de myxamibe montre combien peut être délicate l’identification des formes amibiennes de culture.

En résumé, personne na réussi à obtenir le développement in vitro de 1 Amibe de la dysenterie et on peut conserver de forts doutes sur la réalité de la culture d JE. coli% Les expérimentateurs pour la plupart ont donc vu pousser, sur leurs milieux, des amibes libres du type limax provenant de kystes ingérés avec les aliments.Ces kystes, protégés par leur épaisse enveloppe, traversent le tube digestif et sont rejetés avec les fèces sans avoir subi aucune modification. Dans certaines conditions cependant, comme l’ont vu Ghatton, Wenyon, C. Mathis, ils germent dans l’intestin et donnent naissance à des amibes mobiles. Mais la présence d’amibes limax. sous leur tonne libre, dans des selles mêmes diarrhéiques n implique pas nécessairement que ces organismes aient un rôle pathogène. Gomme pour les Prowazekia , l’apparition d une crise diarrhéique peut tout simplement créer un milieu intestinal favorable à leur multiplication.

Au point de vue morphologique, les amibes de culturesont été d abord placées dans le genre Amoeba, Ehrenberg. Récemment, Ghatton et Lalung-Bonnaire ont proposé de faire une coupure danscegenre. Ils réservent le nom générique Amoeba aux amibes de grande taille, telles que A. verrucosa, A . vespertilio et ils ont établi un genre nouveau Vahlkampfia pour les amibes inférieures du type Umax : protozoaires saprozoïtes, très répandus dans le milieu extérieur (eau, sol, air) et hôtes habituels des macérations végétales.

Le genre Vahlkampfia se caractérise ainsi : Amibes de petite taille, né dépassant pas 3o p. ; le plus habituellement une vacuole pulsatile. Noyau à membrane virtuelle, àcaryosome central, volumineux, compact entouré d’une petite quantité de chromatine périphérique, figurée ou diffuse (type protokaryon). Division par caryodiérèse promitotique (Niigler) essentiellement caractérisée : i° par deux corps polaires formés par étirement puis par scission du caryosome et 2° par une plaque équatoriale constituée aux dépens de la chromatine périphérique. Kystes uninucléés.

Presqu’en même temps qiie Chattonet pour les mêmes raisons

AMIBIASE EXPÉRIMENTALE

que lui, Alexeieff (1912) créait pour ces mêmes organismes le genre Ndgleria. Mais le genre Ncigleria , Alexeieff, 27 février 1912, doit tomber en synonymie avec le genre Vahlkarnpfia, Chatton et Bonnaire, i4 février 1912.

Les Vahlkampfies poussant facilement sur les milieux artificiels, sont mises en évidence avec la plus grande facilité par la méthode des cultures, alors que l’examen direct, soit à l’état frais, soit après coloration, ne les révèle que très difficilement et très rarement dans les selles.

Par des expériences toutes récentes faites sur l’Homme, Walker et Sellards (igi3) ont démontré que les amibes de culture n’étaient nullement pathogènes. Nous avons vu, cependant, qu un certain nombre d’auteurs ont conclu que les amibes isolées soit del’eau,soit de la terre, soitdes selles dysentériques, etc..., étaient capables de vivre en parasites chez l’Homineetles animaux et que parfois elles produisaient des symptômes dysentériques et des lésions ulcératives de l’intestin.

Walker et Sellards ont fait ingérer à dix prisonniers des cultures d’amibes provenant de n origines différentes (eaux d’alimentation de Manille, paille, trèfle, selles de personnes saines, selles diarrhéiques, selles dysentériques). Les amibes appartenaient à 8 espèces que les auteurs ont caractérisées et ont désignées par les lettres A. B. C. D. E. F. G. H.

On peut résumer ainsi les résultats obtenus. Les amibes ingérées par les sujets en expérience ont pu ctre décelées dans les selles par la méthode des cultures dans les premiers jours qui suivent l’ingestion mais jamais dans la suite. Les examens microscopiques des selles ont été constamment négatifs. Aucun homme n’a contracté la dysenterie

Les auteurs américains arrivent ainsi à la conclusion que les amibes de culture nesontpas pathogènes elqu’elles ne jouent aucun rôle dans l’étiologie de la dysenterie endémique tropicale.

En résumé, le problème de la culture des En tamibes intestinales de l’Homme n’a pas encore reçu de solution.