AUTRES PROTISTES INTESTIN A UX

En outre des deux entamibes, l’une pathogène, l’autre inoffensive, qui vivent en parasites dans l’intestin humain, on peut observer dans les selles d’autres organismes que l’on doit connaître afin de ne pas s’exposer à les confondre avec E . di/senleriae et E. coli.

Ce sont parmi les plus fréquemment observés : des amibes du type Umax , des Flagellés appartenant aux genres Prowazekia, Ghilomastix(= Tetramitus ), Giardia '(= Lamblia), trois protistes, 1 un désigné sous le nom d’ E htamoeba nana , l’autre connu sous le nom de Blastocystis horninis, le troisième sous celui de kystes iodophiles.

Nous allons passer en revue ces divers organismes, en insistani tout particulièrement sur les caractères (pii permettent de ■es distinguer des entamibes intestinales de l’homme.

i" Amibes du type limax. — Les amibes du type Umax, protozoaires saprozoïtes, existent assez fréquemment dans les selles e I homme comme des animaux, mais il est rare que l’on puisse les déceler à l’examen microscopique, soit à l’état frais, soit même sur frottis colorés, car elles ne sont jamais présentes qu’en petit nombre.

kar la méthode des cultures, il est, au contraire, facile de les mettre en évidence. Il suffit d’ensemencer une série de selles sur gélose au lin de Pinoy ou sur milieu de Musgrave et Clegg pour obtenir dans un certain nombre de cas, en l’espace de trois à quatre jours, des cultures abondantes d’amibes.

35fi MATHIS. - L’AGENT PATHOGÈNE DE L’AMIBIASE HUMAINE

Dans les selles, les amibes se rencontrent à l’état végétal i C et à l’état kystique.

Les formes végétatives, à l’état vivant, se reconnaissent aux caractères suivants : elles sont de petite taille (environ i5 jj.); elles ont des mouvements amibo'ides assez lents. Dans leur cytoplasme qui ne contient pas de globules rouges, on observe une vacuole contractile, bien visible à la phase de diastole, et un noyau très apparent constitué par un gros corpuscule réfringent entouré d’un halo clair. Sur préparations colorées à l’hématoxyline ferrique, les amibes végétatives se reconnaissent à la structure de leur noyau formé essentiellement d’un gros bloc chromatique, ayant fortement retenu la laque ferrique et circonscrit par une zone incolore.

Les kystes des amibes du type Umax ne sont vus qu’exceptionnellement dans les selles. Leur enveloppe est épaisse, elle est à double contour, l’extérieur plus ou moins polygonal, l’intérieur arrondi. Leurs dimensions sont variables (en moyenne de 9 à 1 1 f et ils ne possèdent qu’un unique noyau plus ou moins masqué par un protoplasma très granuleux.

Il est probable que les amibes du type Umax que l’on rencontre dans les selles, et pour lesquelles Chatton a créé le genre Vahlk amp fia, appartiennent à plusieurs espèces, mais, dans l’état actuel de nos connaissances, il n’est pas possible de leur assigner des caractères spécifiques.

Les caractères morphologiques que nous venons de donner permettent de distinguer sans difficulté les amibes Umax des entamibes intestinales. On sait que leur présence dans l’intestin a été la cause de maintes erreurs d’interprétations dans les essais que l’on a faits pour cultiver l’amibe pathogène.

Nous verrons plus loin comment ces mêmes amibes se différencient des formes appartenant à Entamoeba nana.

20 Flagellés du genre Prowazekia. — Ces flagellés décrits sous les noms de P rowazekia. asiatica (Castellani et Chalmeis, 1910), P. crusi (Hartmann et Chagas, 1 9 r °) » ^ • Weinbergi (Mathis et Léger, 1910) appartiennent probablement tous a la même espèce.

Ces kystes, de forme arrondie ou ovalaire, mesurent de 5 a 7 nî ils sont par conséquent plus petits que les kystes amibiens typiques. Ils sont entourés d’une mince enveloppe et dans leur cytoplasme doué d’une forte réfringence on n’aperçoit qu un de leurs noyaux.

le trop ho nucléus ou noyau principal.

Avec un peu d’attention on ne confondra pas ces kystes avec ceux des entamibes; ils sont du reste presque toujours accompagnés de formes mobiles.

Les Prowazekia se cultivent en symbiose avec diverses bacic-

TECHNIQUE POUR LETUDE DES AMIBES

ries sur la plupart des milieux de culture usuels. Pour éviter une

Fig. 38. — Kystes de Lamblia intestinulis dans les selles de l'homme.

i, Kysles vus à l’état, frais Gross. 1.000 O.; 2 à i5, Kystes fllx;s et colorés; 2 à 11, Liquide de Scbaudinn, hématoxyline- ferrique-éosine ; 1 a [à 1 5, Alcool absolu, Giemsa .

trop grande pullulation bactérienne, il est indiqué de faire le

premier ensemencement en milieu neu miirl» if. « bouillon ordinaire dilué. 1 ' Cau PePt0^,

Kystes de Chilomastix Mesnili fWenvon iQtm r i de ce flagellé d’abord ,:on„u sons «i nS

conS» etrnm‘tUS “ “ beauconpl

Dans leur forme typique, ils présentent généralement une nro lulterance a 1 une de leurs extrémités, ce qui leur donne l’as nea d un citron. 1s peuvent être arrondis ou piriforu.es et mesure,, de 7 a io p dans leur plus grand diamètre. Ils sont pourvus d’un noyau unique de structure assez particulière. La chromatine est en majeure parue rassemblée à l’un des pôles contre la mem‘ b, aile nucléaire, d ou 1 aspect d’un noyau en châton de Invuc On voit en outre a l’intérieur du cytoplasme un vestige du cydo l tome et parfois un résidu de flagellé. J

Ces caractères permettent de distinguer les kystes de Chiln mnstix de ceux des enlamibes intestinales. On évitera également de les confondre avec les kystes de Giardia (== Lambda) intestinale dont nous allons maintenant donner les caractères.

, /+° Kystes de Giardia (= Lamblia) iutestinalis. — Ce lla-ellc nest pas rare dans les selles de l’homme, où on le rencontre parfois uniquement à la phase d’enkystement.

Les kystes sont ovoïdes, à gros bout postérieur. Us mesurent de ro à ii» y. de long sur 8 à 9 y de large. Quelques-uns, vus en projection verticale, apparaissent sous une forme arrondie et donnent ainsi l’impression de petits kystes d ’E. dijsejiteviae mais les plus nombreux ont un aspect ovalaire. Ces kystes, de couleur grise, modérément réfringents, sont pourvus d’une mince enveloppe. Avec un grossissement de 5oo diamètres on peut parfois distinguer dans leur intérieur une ou plusieurs lignes légèrement recourbées et dirigées selon le grand axe du kyste. Avec un peu d’attention il sera quelquefois possible d’apercevoir un groupe de 2 à 4 noyaux très rapprochés les uns des autres et situés dans la moitié antérieure du kyste.

Si l’on avait une hésitation sur la nature de ces formations kystiques, à l’état vivant, il n’y aurait qu’à faire un frottis de selles, à le fixer à l’alcool absolu après dessiccation et à le colorer par le mélange bleu azur II-éosine. Par ce procédé, les kystes se colorent en bleu et au niveau de leur extrémité antérieure se détachent vivement trois ou quatre masses nucléaires d’un rouge violacé. II est bien entendu que, pour 1 élude cytologique, il faut avoir recours à la fixation à l’état humide, mais la coloration à I azur-éosine a 1 avantage de permettre une diagnose rapide des la m bli es e n kys tées .

f>" Entamœba nana (Wenyon et O’Connor, 1917). — Ce protiste.

TECHNIQUE POUR L’ETUDE DES AMIBES 359

vu par Wenyon en 1916 et rapporté d’abord par cet auteur à Amoeba Umax, a été décrit ensuite par Swellengrebel et Winoto (février 1917), etc.

Wenyon et O’Connor l’ont appelé Entamœba nnna. Il diffère cependant notablement par sa structure nucléaire des entamibes, et, pour notre part, il nous paraît douteux qu’on puisse le ranger dans le genre Entamœba. Il se rencontre très fréquemment dans l’intestin humain où du reste il n’exerce aucune action pathogène. Il est toutefois intéressant à connaître, car, sous sa forme végétative, il a certainement été souvent confondu avec des amibes du type Umax, et sous la forme kystique quadrinucléée, il doit être distingué des kystes ù quatre noyaux d ’E. dtjsenteriae.

Dans les selles,/?, nana se présente à l’état de formes mobiles et de kystes.

Les formes mobiles mesurent de 6 à 12 y. de diamètre, en moyenne 8 y.. Elles se rapprochent par leur structure générale des amibes du type Umax mais elles ne possèdent pas de vacuole contractile. Leur protoplasma, généralement très vacuolaire, devient homogène avant l’enkÿstement. Le noyau est difficilement visible à l’état vivant. Sur préparations colorées à l’hématoxyline ferrique on distingue une membrane nucléaire nette et un caryosome relativement volumineux et souvent de forme irrégulière. Ce caryosome est cependant plus petit que celui d’une amibe Umax typique. Chez certains individus il semble occuper une position centrale, mais ce n’est là qu’une apparence, en réalité il est placé excentriquement ; parfois on constate que la grosse masse chromatique est unie par un filament à un granule situé sur la membrane nucléaire au pôle opposé.

Cette amibe a des mouvements paresseux ; elle émet de rares pseudopodes mousses et hyalins. Elle se nourrit de bactéries. A basse température, elle ne tarde pas à s’arrondir età mourir. Les essais faits pour la cultiver ont jusqu’ici échoué.

Les kystes sont ovalaires (8 à 10 y. dans leur plus grand axe) ou sphériques (7 à 8 y. de diamètre). Sur le frais et même après action de l’iode on ne peut distinguer aucune structure. Après fixation et coloration à l’hématoxyline ferrique, ou aperçoit 1, 2 ou !\ noyaux généralement groupés. Les noyaux ont le môme aspect que celui des amibes libres, mais dans les kystes au stade quadrinucléé, ils sont de taille plus petite. Ils diffèrent donc par leur structure des noyaux des kystes d ’E. dt/senteriae, qui sont constitués, comme on le sait, par une couronne de granulations appliquées contre la membrane nucléaire et par un amas central, plus ou moins compact, de tins granules sidérophiles correspondantau caryosome. De très rares kystes peuvent contenir jusqu’à 8 noyaux. A l’intérieur des kystes, à côlé des noyaux, il existe

MATHIS. - L’AQENT PATHOGÈNE DE L’AMIBIASE HUMAINE

un nombre variable de granules fortement réfringents possédant certaines réactions de la volutine. Enfin quelquefois au stade binucléé on constate la présence d’une substance qui, d’après ses réactions, serait du glycogène (Debell et Jepps, 1917). Les kystes peuvent se conserver sans altération dans les selles humides plus de trois semaines. O11 peut les colorer aussi bien que dans les matières récemment émises.

Maintenant que l’on a appris à identifier ce protiste longtemps méconnu on le rencontre sans difficulté, et assez souvent dans les selles.

6” Blastocystis hominis. — Ce protiste se rencontre fréquemment et parfois en extrême abondance dans les selles de l’homme. Des organismes identiques en apparence ont été observés dans les matières fécales de divers animaux (rats, batraciens, blattes sangsues, etc.).

Les Blastocystis ont été d’ab.ord considérés comme des kystes de Trichomonas inteslinalis ; en 191 1 , Alexeieff les a placés dans les Ascomycètes, à côté des Cbytridinées, mais tout récemment Chatton (19T7), en étudiant les Blastocystis d’un Gecko, a vu le contenu se transformer et donner des flagellés du phylum des Bodonidae.

Sans nous prononcer sur la nature de ces corps, nous devons, les signaler ici, car les observateurs peu familiarisés encore avec l’examen des selles peuvent les confondre avec des kystes d’amibes.

Dans les selles humaines les Blastocystis se présentent sous des aspects variés : corps sphériques, formes allongées, étirées, en biscuit.

Seuls les corps sphériques qui ont l’apparence de kystes ont de l’intérêt pour nous.

A I état frais, on constate qu’ils sont entourés d’une membrane souple et délicate. Ils ont un diamètre de 10 à i5 p., ils sont doués d une grande plasticité qui se manifeste par les déformations qu’ils subissent, lorsque, entraînés par des courants dans la préparation, ils viennent à heurter des résidus d’aliments immobilisés. Eu outre de la membrane d’enveloppe, les Blastocystis sont constitués de deux parties : une mince couche de cytoplasme périphérique en contact avec la membrane et contenant dès noyaux en nombre variable et une masse centrale, arrondie, très réfringente, tantôt incolore, tantôt de couleur jaune pâle et ne montrant aucun détail de structure.

Tels sont les caractères principaux des Blastocystis que l’on constate dans les selles humaines. 11 suffit de connaître leur existence pour ne pas risquer de les confondre avec les kystes des autres protistes de l’intestin.

TECHNIQUE POUR L ETUDE DES AMIBES

7U Kystes iodophiles. — Dans les selles humaines, YVenyon et O’Connor ont observé assez fréquemment des kystes sur la nature desquelles on n’est pas fixé et qui se caractérisent tout particulièrement par la présence à leur intérieur d’une substance réfringente iodophile. Ces kystes de dimensions variables mesurent de 7 à 1 5 p. e t même davantage. Ils sont ordinairement sphériques ou ovalaires, mais ils peuvent avoir un contour plus ou moins lobé. Ils contiennent un unique noyau, plus petit que celui des kystes uninucléés de L’amibe dysentérique et d’une structure différente, selon Wenyon et O’Connor.

A l’état frais, il est souvent difficile et parfois impossible de distinguer les kystes iodophiles des kystes à un noyau de l’amibe pathogène et il est presque toujours indispensable de traiter la préparation par une solution iodée pour mettre en évidence les corps iodophiles.

Sur préparations colorées à l’hématoxyline ferrique la distinction est également très difficile à faire, car, à la place des corps iodophiles, il ne reste plus que des espaces vacuolaires. Dans certains cas, on n’arrivera à se faire une opinion que par des examens répétés durant plusieurs jours.