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AGENTS FIXATEURS ET DURQSSANTS 51

nons ici une formule modifiée qui nous a été obligeamment communiquée par M. le professeur Gilson (1893 et 1895).

Acide nitrique à 46° Baume 78 ce.

Acide acétique cristallisable 22 —

Sublimé 95 à 100 grammes

Alcool à 60 p. 100 500 ce.

Eau distillée 4400 —

c Ce mélange donne en général une fixation très délicate et une bonne consistance, ce qui n'est pas le cas pour toutes les solutions mercuriques. Elle n'est en rien nuisible aux colorations.' Son action peut être prolongée non pas indéfiniment, mais du moins très longtemps sans trop d'inconvénient. Elle est très pénétrante.

c Pour des animaux marins il est bon d'ajouter au fond de la bouteille des cristaux d'iode ; on évite ainsi tout précipité par les «els. »

€ Vous aurez peut-être remarqué (continue mon savant correspondant) que les solutions mercuriques donnent souvent des granules dans certains organes, par exemple, dans le testicule des larves de Lepidopter.es et autres organes à prolifération active. Cela pourrait bien être dû à une abondance de phosphates. On les évite grâce à riode, et en tout cas si on les constate dans une coupe on peut les faire disparaître en lavant à l'eau additionnée de teinture d'iode {il faut bien se garder de Viodure, qui précipiterait le sublimé). >

Gilson recommande beaucoup ce re'actif comme donnant de bons résultats, et comme évitant bien des déboires dans les laboratoires où il y a des commençants. Car un excès de fixation, un lavage incomplet, etc., ne causent pas la perte irréparable de l'objet.

On pourra trouver ce réactif utile pour débarrasser, les œufs des Batraciens de leur albumine ; ils s'y débarrassent aussi bien qu'avec les solutions chromiques et y prennent une bonne consistance.

Je l'ai essayé, et j'ai eu de bons résultats. Trouvant la fixation un peu trop faible pour mes objets, j'ai augmenté considérablement la proportion de sublimé, et je m'en suis bien trouvé. J'ai également expérimenté avec des solutions simples de sublimé additionnées d'acide nitrique, et je crois cette addition très recommandable. Il paraît que Frenzel a déjà formulé l'addition de 1 goutte d'acide nitrique pour chaque centimètre cube de solution saturée de sublimé. (Makn, ZeiL f.wiss. Mik., XI, 4, 1894, p. 480.)

67. Bichlorure de mercure et acide picro-salfurique {Formule deLx^G ; ZooL Anzeiger, 1879, p. 46j. — Solution saturée de sublimé corrosif dans de l'acide picro-sulfurique auquel on a ajouté 5 p. 100 d'acide acétique.

68. Bichlorure et acide picrique (Rabl, Zeit. f, wiss. Mik,, XI, 2, 1894, p. 165).

Sublimé, sol. sat. aq 1 volume.

Acide picrique, sol. sat. aq 1 —

Eau distillée 2 —

Rabl y laisse des embryons environ douze heures, lave pendant deux heures à Teau, et passe dans Talcool faible.

La solution de Mann {op. cit.^ XI, 4, 1898, p. 480) contient 1 p. 100 d'acide picrique avec ou sans 1 p. 100 de tanin dans une solution saturée de sublimé dans de la solution physiologique de sel.

68 bis. Liquide de Zenker {Mûnchener med. Wochenschr., no 24, 1894, p. 832). — C'est du liquide de MUller (n**56) additionné de 8 p. 100 de sublimé corrosif et 8 p. 100 d'acide acétique cristallisable (il vaut mieux ajouter ce dernier au moment de s*en servir). Fixer plusieurs heures, laver à Teau, traiter les pièces ou les coupes par Talcool iodé (n® 62). Recommandé avec des détails minutieux, par Mercier, dans Zeit. f. wiss. Mik.^ XI, 4, 1894, p. 471.

69. Sublimé alcooUque (Mann, Anal. Anz., YIII, 1893, p. 441-443).

Alcool absolu 100 ce.

Acide picrique 4 grammes.

Sublimé 15 —

Acide tannique 6à8 —

L*acide tannique est ajouté pour prévenir un durcissement excessif.

69 bis. Sublimé et acide osmique (Mann). — Ce mélange a été donné au numéro 39.

Autres chlorures

70. Chlorure de platine, PtGl^. — Ce sel étant extrêmement déli- 'quescent, il vaut mieux se le procurer en solution. On trouve en eiïet dans le commerce des solutions à 10 p. 100. La solutioa aqueuse simple de ce sel a jusqu'à présent peu servi. R\bl (Morphol. Jahrb,. X Bd., 1884, p. 216) s'en est servi dans ses recherches sur la cytodiérèse. Elle a une action semblable à celle du chlorure d'or, avec l'avantage de ne pas être réduite par la lumière ou la chaleur.

Rabl se sert d'une solution de 1/300. Il y laisse les objets pendant vingtquatre heures. Il lave à l'eau, durcit ensuite à l'alcool, fait des coupes, et les colore avec l'hématoxyline de Delafield, ou la safranine.

C'est surtout sous forme de mélanges que sert le chlorure de platine. Nous avons parlé plus haut (n^ 53) du mélange de Merkel, et nous allons maintenant en citer un autre qui est très en vogue à Thcure qu'il est.

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71. Mélange platino-acéto-osmique (Herhann, Arch. f. mik. Anat.y XXXIV, 1889, p. 88). — Hermann a proposé de substituer la solution de chlorure platinique à 1 p. 400 à la solution d*acide chromique dans la liqueur de FLEMinNO, Nouvelle Formule, soit Mélange fort, les autres ingrédients restant les mêmes, ou bien Tacide osmique étant diminué de moitié. Il croit avoir obtenu ainsi une fixation plus Qdële des parties plasmatiques des tissus. Nous avons noté plus haut (n^ 41) que Tacide chromique a le défaut de précipiter certains constituants liquides des tissus sous forme de réseaux ou de filaments qui peuvent simuler des éléments normaux des tissus. Le chlorure platinique n*a pas cet effet.

C'est là certainement un avantage, qui peut être considérable en certains cas. J'ai trouvé aussi que les pièces brunissent moins qu'avec l'acide chromique, et il me semble que les coupes sont moins opaques. A part cela, après des essais soigneux de ce réactif, je n'ai pas pu trouver qu'il possède une supériorité réelle sur celui de Flehming, il m'a semblé même souvent qu'il donnait des fixations moins bonnes. Et comme il est en même temps extrêmement coûteux, il me semble qu'il y a lieu de le réserver pour des recherches spéciales, et de continuer à employer le liquide de Flembong pour les travaux ordinaires.

Le traitement ultérieur des préparations est le même que pour le liquide de Flehming.

71 his. Sublimé platinique (Rabl) v. numéro 553.

72. Le chlorure de palladium a été employé comme fixateur en solutions aqueuses de 1/300, 1/600, ou 1/1000. La fixation se fait en une ou deux minutes, pour les petits objets. Cattâneo le recommande comme étant le meilleur flxateur pour les Infusoires.

Ce sel se trouve à Tétat sec dans le commerce. Pour le dissoudre, il est nécessaire d'employer de Feau acidulée avec de Tacide chlorhydrique. Il faut prendre, pour 10 grammes du chlorure sec, un litre d*eau et 4 à 6 gouttes de HCl. Il faut vingt-quatre heures pour que la dissolution soit complète.

Ce chlorure imprègne les tissus en les colorant en brun.

Il a été employé comme agent durcissant, voyez F.-E. Schultze, Arch, /. mik. AnaL, III, 1867, p. 477.

73. Perohlorure de fer (H. Fol, ZeiL wiss. ZooL, XXXVIII, 1883, p. 491 ; Fol, Lehrb, d. vergl. mik, AnaL, p. 102). — Ce réactif a trop de défauts pour qu'on puisse le recommander.

74. Z«e chlorure de zlno n'est employé que pour Yencéphale. Voyez dans la Deuxième partie.

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