Hématoxyline acide d'EHRLiCH (Zeit, f\ wiss Mik

Eau 100 ce.

Alcool jabsolu 100 —

Glycérine . . . 100 —

Acide acétique crislallisable 10 —

Hématoxyline 2 gr.

Alun en excès.

On laisse ce mélange exposé pendant longtemps à la lumière, jusqu'à ce qu'il ait pris une teinte rouge saturée. A partir de ce moment, la solution est devenue stable ; sa puissance de coloration ne varie pas, même pendant des années ; et il ne s'y forme pas de précipités, du moins si l'on a soin de conserver la solution dans un ilacon bien bouché. Pour obtenir des colorations doubles, on peut y ajouter des matières colorantes sous forme d'acides libres (par exemple de l'éosine) ou de bases colorantes.

Des coupes de matériaux durcis soit par l'alcool, soit par le bichromate se colorent en quelques minutes, et donnent une coloration nucléaire sans aucune surcoloration, laquelle n'a même pas lieu après une immersion prolongée. Pour cette raison, cette teinture est très propre à la coloration de pièces en masse.

Pour avoir la coloration bleue, il faut laver à l'eau de source.

Il me semble que de toutes les anciennes formules que j'ai essayées, c'est celle-ci qui m'a donné les colorations nucléaires les plus précises et les plus faciles à réaliser.

On peut avec avantage se servir d'hématéine pour faire la teinture (Mann, Zeit. f. wiss. Mih, XI, 4, 1895, p. 487.)

137. Glycérine hématoxyline de Renaut {Arch. de Physiol.y 4881^p. 640).

138. Autres solutions aluniques aqueuses. Arnold, Quart. Journ. Mie. Sci., 1878, p. 86. Mitcuell, Journ. Roy. Mie. Soc., -1884, p. 311 - (méthode très compliquée d'extraire 1q bois de Campôche}. IIigkson, Qwrtw'

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Joum. Mic. Scù, 4883, p. 244 (idem). Cook, JoUm. of Anat. and Phys.y 1879, p. 140 (solution au sulfate de cuivre; j'en ai trouvé la préparatioi^ par trop aléatoire). Haug, ZeiL f. v)iss. Mik., VIII, I, 1891, p. 51 (solution à l'acétate d'alumine). Sanfeuce, Joum. de Microgr.y XIII, 1889, p. 335; Joum. Boy. Mie. Soc, 1889, p. 837) (Mayer, qui a étudié cette teinture (Vk MiUh. ZooL Stat. Neapel, X, I, 1891, p. 178-182) dit que c'est essentiellement une solution de Boehmer contenant une plus grande proportion d'aU cool et un peu d'iode. L'iode n'aurait pas d'autre utilité que d'empêcher la précipitation de la matière colorante à la surface des organes). Gage, Proc. Amer. Mie. Soe., 1893» p. 123; cf. Journ. Roy. Mie. Soe., 1893, p. 564 (solution additionnée d'hydrate de chloral pour prévenir le développement de ferments vivants. Elle ne se conserve pas mieux pour cela (Mayer, in lilt.). Hache, Comptes rend. Soc. Biol. Paris, 10, I, 1894, p. 253-369 (complique et superflu, Mayer, in litL).

b. Solutions alcooliques.

- 139. Hœmacalcium (Mayer, MiUh. ZooL Stat. NBapel, X, 1, 1891, p, 182). — Hématéine (ou bien hématéate d'ammoAiaque, n** 125)^ .1 gr. ; chlorure d'aluminium, 1 gr. ; chlorure de calcium, SO gr. ; acide acétique cristallisable, 10 ce. (ou 20 ce. de Tacide ordinaire) ; alcool à 70 p. 100, 600 ce. Broyez intimement ensemble les deux premiers ingrédients.; ajoutez l'acide et l'alcool et faites dissoudre à l'aide de la chaleur ou à froid ; ajoutez en dernier lieu le chlorure de calcium.

Liquide d'un violet rougeâtre, imaginé pour remplacer Thématoxyline de Kleinenberg en vue des sérieux désavantages qui sont inséparables de la préparation de celte dernière (voyez plus bas, n** 141). Emploi comme pour celle-ci. Si les tissus se colorent en un ton trop rouge, ■il faut les traiter par une solution de chlorure d'aluminium dans l'alcool (2 p. 100 environ), ou par une solution (de 0,8 à 1 p. 100) d'acétate de soude ou de potasse dans l'alcool absolu, ou par du bicarbonate de soude (voyez au n° 128, vers la fin).

Avec certains objets, la pénétration de cette teinture laisse à désirer, la coloration ne se faisant bien que dans les couches super<ficielles. On remédie à cela soit en acidifiant la solution, soit (ce qui vaut mieux) en laissant les objets pendant quelque temps avant la coloration dans de Talcool acidifié. En tout cas, les tissus à colorer ne doivent pas avoir une réaction alcaline. En prenant ces précautions, il ne sera pas nécessaire d'employer des acides pour les lavages.

Enfin, pour certains objets (Hydraires, par exemple), on peut augmenter la puissance de pénétration du liquide en l'allongeant d'environ un tiers de glycérine ou en augmentant la proportion de chlorure d'aluminium, jusqu'à environ huit fois celle de l'hématéineu

Mayer a trouvé depuis (Milth.^ X, 3, 1892, p. 499) que a solution n'est pas parfaitement stable, mais vire au bleu avec le temps et précipité. Pour éviter cet inconvénient on peut faire le mélange dans deux flacons, dont chacun contiendra la moitié de Talcool et de l'acide, mais l'un d'eux contiendra en outre tout le chlorure de calcium, et Tautre toute l'hématéine et tout le chlorure d'aluminium. On prend alors pour préparer le bain de teinture une quantité égale dans chaque flacon.

Il faut bien comprendre que Mater ne recommande pas cette solution comme donnant d'aussi bons résultats, comme teinlure^ que THémalun ; elle lui est au contraire inférieure sous le rapport de la caloration. Mayer est même d'avis qu'aucune solution alcoolique d'hématéine ne saurait fournir une coloration aussi précise que les solutions aqueuses ; car la nature aqueuse de la menstrue parait être en elle-même une condition favorable pour la qualité de la coloration. Il la recommande seulement à titre de remplaçant de Thématoxyline de Kleinenberg pour les cas qui demandent une teinture alcoolique, comme étant facile à préparer, commode à employer, et d'un effet constant. Or aucune de ces qualités ne peut être attribuée à Thématoxyline de Kleinenberg.