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cœur dans lesquelles Teau transsude à travers les vaisseaux. Pour la même raison, dans Thémiplégie, le nombre serait plus fçrand du côt« paralysé (Penzoldt). La même augmentation se montre aussi dans les flux intestinaux qui diminuent Teau du sang (Brouardel), ainsi qu'après les sueurs profuses ou la polyurie. Hayem a montré que la proportion des hématoblastes augmente beaucoup après les grandes hémorrhagies ou les maladies aiguës, ce qui indique une active réparation dos globules.

B. Diminution de la masse du sang. — Hémorrhagies. — Le sang, avonsnous dit, est chargé d'assurer les conditions physiques de la vie des cellules, ainsi que l'excitabilité particulière des cellules nerveuses qui gouvernent la respiration et la circulation. Toute perte de sang considérable troublera donc ces vies cellulaires de l'organisme et pourra même amener leur mort, comme on le voit, par exemple, sur un membre qu'on détache du corps ou qu'eu prive de sang par un procédé quelconque. Si on agit sur l'organisme tout entier et non plus sur une partie, la mort générale précédera la mort locale des éléments, parce que le sang n'allant plus porter aux centres nerveux respiratoires et cardiaques l'O. indispensable, le cœur et le poumon s'arrêtent.

La quantité de sang qui peut être perdue sans amener la mort varie suivant les individus, Tâge, le sexe, etc.. La perte de quelques demi-onces de sang, chez le nouveau-né, d'une demi-livre chez l'enfant d'un an, de la moitié de la masse du sang chez l'adulte, peut être mortelle. Les femmes supportent mieux que les hommes des hémorrhagies notables, car, en raison des hémorrhagies périodiques qu'elles subissent, la réparation du sang parait se faire chez elles plus rapidement. Haller a cité à cet égard de curieuses observations, entre autres celles d'une jeune fille qui, pendant 14 mois, fut saignée tous les jours, ou de deux jours l'un, et perdit ainsi, en y comprenant 125 onces de sang à chaque menstruation, le chiffre énorme de 100 kilos de sang. Gavalli, en 1835, a vu une femme, qui dans l'espace de 28 ans, avait été saigné 3,500 fois. Les individus gras, faibles ou âgés, supportent mal les pertes de sang. Si l'hémorrhagie est forte, les accidents surviennent rapidement et dans les hémorrhagies dites foudroyantes la mort peut être immédiate. Elle est précédée de convulsions générales (anémiques). Dans ces hémorrhagies graves, le rappel à la vie n'est possible que par la transfusion. Si la perte de sang n'a pas été mortelle, l'eau et les sels du sang se réparent vite par résorption aux dépens des tissus ambiants ; il faut plus longtemps pour les albuminoïdes et surtout pour les globules, bien que l'on voie une abondance considérable d'hémaloblastes apparaître rapidement dans le sang (Hayeni) et que moins de globules soient détruits, pour la formation de la bile, par exemple. — La teneur du sang en hémoglobine, après les saignées, est diminuée à peu près proportionnellement à l'importance de la saignée (Rizzozero).

Transfusion. — Cette opération est née du grand mouvement médical qui suivit la découverte de la circulation du sang (1628) et son histoire a passé par de curieuses vicissitudes. Il y a quelques années à peine, elle a été, surtout à

PHYSIOLOGIE DL'SANi; îi.i

l'étranger, l'objet d'un engoueineut étrange au point de vue thérapeutique. Mais nous n'en parlerons qu'au point de vue physiologique. Le rùle (|ue nous venons d'assigner au sang, la nature des accidents mortels qui surviennent dans un organisme d'ailleurs sain, lorsqu'une hémorrhagie fait descendre la masse du sang au-dessous d'une certaine limite, nous permettent de supposer que ces accidents seront écartés, si on rend à cet organisme une certaine quantité d'un sang identique à celui qu'il a perdu. La supposition se vérifie, en effet, facilement par l'expérimentation chez les animaux et par des observations déjà très nombreuses chez l'homme même.

L'action de l'oxygène sur les centres nerveux bulbaires nous montre que ce sont les globules rouges oxygénophores qui ont le rôle principal dans le rappel de la vie par la transfusion. C'est donc l'élément globule qu'il importe le plus de rendre à l'organisme exsangue et de nombreuses expériences oikt prouvé que la transfusion du plasma seul est inefficace. Les globules agissent aussi pour une part importante en tant que globules et non pas seulement par leur 0., puisque les injections de plasma oxygéné ou d'une solution d'hémoglobine oxygénée restent sans effet. — Le sang transfusé agit avant tout comme stimulant du système nerveux et de la contractilité du cœur et des vaisseaux. — La défibrination du sang à transfuser n'est qu'une question de technique opératoire acceptée par les uns, repoussée par les autres. Il est préférable d'injecter le sang complet, c'est-à-dire non déîîbriné, car le sang défibriné est du sang mort.

Si, au lieu d'injecter du sang de même espèce, on injecte du sang d'une espèce différente, les résultats sont bien moins favorables ou même tout à fait mauvais, et les expériences faites récemment ont montré qu'il n'y a pas, comme on l'avait cru, de greffe sanguine, que les globules du sang de mouton, par exemple, injecté chez l'homme se dissolvent très rapidement et que l'hémoglobine est éliminée par l'urine. Une certaine quantité des globules de l'homme sont en même temps détruits par le sérum du sang hétérogène transfusé. En résumé, la transfusion de sang animal à l'homme ne peut avoir que des effets bienfaisants très fugitifs, tandis qu'elle occasionne des accidents qui peuvent être graves. Il ne faut donc point pour celte première et capitale raison l'employer, comme on l'a fait dans ces derniers années, en Allemagne, en Russie, eu Italie, dans les cas de folie, d'anémies et de cachexies diverses *.

Effets physiologiques de la s.mgnée. — D'après Hayom, une perte de sang unique, même abondante, est bien supportée ; les saignées coup sur coup sont d'une réparation moins facile, parce qu'elles équivalent presque à une saignée unique aussi importante que toutes les saignées réunies; enfin les saignées copieuses faites à intervalles assez éloignés pour que la réparation ait déjà commencé au moment où on les fait sont de beaucoup plus graves, attendu quelle'; allèrent le type physiologique des hématies et entravent la rénovation

' Pour l'appréciaiion et la critique de cos diverses applications de la Transfusion, voir ^«nlt: Etudes $ur la Transfusion du sang cl sur quelques injections iîilra- veineuses. Thèse *« Paris,, 18::.

quantitative et qualitative du sang. Comme il faut aussi tenir compte de rélat du tube digestif et des organes hématopoïétiques, il en résulte que la saignée est formellement contre-indiquée dans la plupart des maladies chroniques.

2« Lésions de qualité. — Depuis les recherches mémorables d'Andral et Gavarret sur l'état du sang dans les maladies, de nombreuses découvertes ont été faites dans ce domaine et nous ne pouvons qu'indiquer sommairement les principaux résultats obtenus jusqu'ici. Les altérations du sang sont liées à une diathèse, à une cachexie ou se développent secondairement, à la suite de toutes les maladies affectant les fonctions du tube digestif, la sécrétion de l'urine ou de la bile, l'activité du cœur ou des poumons.

- Globules. — Peuvent varier dans leur forme, leur consistance, leur nombre ou leur composition. — Ces variations sont révélées par le microscope ou par l'analyse chimique. Les maladies chroniques et les maladies aiguës qui, en se prolongeant, imposent le repos et la diète, diminuent la quantité des globules. Au point de vue du nombre, on les voit dans les anémies très intenses (aglobulies) descendre jusqu'à i, 000,000 par millimètre cube (Hayem) et même, dans * un cas mortel, jusqu'à 4i4.000. Au point de vue de la teneur en hémoglobine qui est de i3 p. iOO dans le sang normal (Preyer), Quincke et Quinquaud ont fait d'importantes recherches, desquelles il résulte que, dans la chlorose, le chiffre de l'hémoglobine est en moyenne de 6,5 p. 100 et peut descendre au* dessous de 5 p. 100. Il y a, bien entendu, une diminution proportionnelle dans la quantité de fer contenu dans le sang. Dans toutes les maladies chroniques en général, le chiffre de l'hémoglobine subit une diminution variable. Nous avons indiqué précédemment dans le sang des anémiques l'existence de globules nains et de globules géants.

Plasma. — Nous l'avons vu augmenté dans les cas de pléthore séreuse et aqueuse ; il peut être diminué en masse dans certaines maladies, notamment le choléra, caractérisées par la transsudalion intestinale des liquides de l'organisme, et le sang présente alors la consistance demi-solide d'une gelée de groseilles.

Fibrine. — Andral et Gavarret ont découvert ce fait important que la fibrine augmente dans les maladies inflammatoires, surtout le rhumatisme articulaire aigu, la pneumonie, etc., et peut monter de 3 à 9,10 et même 11 p. 1,000. Elle augmente aussi dans certaines anémies et dans l'alimentation insuffisante.

Serine. — Diminue dans beaucoup de maladies : phlegmasies, pyrexies, dysenterie, néphrite brigh tique ; augmente dans le choléra et les flux causés par les drastiques.

Urée. — Augmente dans ralbuminurie, le choléra, le diabète et, d'après Picard, dans les fièvres et l'anémie.

TECHNIQUE HÉMATOLOGIQUE 97

Acide uriqle. — Abondant dans le sang des goutteux.

SicRE. — Augmente légèrement chez les diabétiques.

Sels. — Augmentent — surtout les sels alcalins — dans les fièvres érup- U?es, le typhus, les fièvres pernicieuses, la fièvre typhoïde, la dysenterie, le scorbut et les hydropisies. Diminuent, dans le choléra et dans les maladies inflammatoires.

3*Ijésions traiixnatiqaes. — On peut considérer la défibrination du sang employé dans la transfusion comme un véritable traumatisme. Les globules battus sont des globules tués ; ils s'agglomèrent entre eux, s'empilent et deviennent, avec de petits caillots fibrineux, microscopiques, produits par le battage, des noyaux d'infarctus capillaires dans le poumon et dans d'autres organes. Le ferment fibrinogène, mis en liberté par le battage, peut aussi produire des caillots dans le sang du transfusé.

V Empoisonnements. — Oxyde de carbone. — Nous avons déjà, p. 57, indiqué le? caractères du sang dans l'empoisonnement par l'oxyde CO. Nous n'ajouterons qu'une chose, c'est que CO produit la mort par asphyxie en empêchant les globules de se charger d'O dans la respiration, c'est-à-dire en paralysant la fonction globulaire. Il en est de même de l'acide cyanhydrique et du bioxyde d'azote.

AaDE CARBONIQUE. — Les caractères connus du sang veineux sont exagérés dans le sang empoisonné par GO*. La mort est due pour les uns au défaut d'O, pour d'autres à une action particulière (paralysie de fatigue consécutive à l'hyperexcitation) exercée sur les trois centres, de la respiration, de l'arrêt du c<pur et des vaso-moteurs.

Hydrogène sulfuré et sulfhydrate d'ammoniaque. — N'exercent que peu d'action sur l'hémoglobine réduite, mais absorbent l'O. de l'oxyhémoglobine H forment une sorte d'hémoglobine sulfurée donnant une bande d'absorption <*ntre G et D.

In grand nombre de substances agissent ainsi sur le sang, telles que les composés arsenicaux, antimoniaux, le phosphore, la bile et les sels biliaires, certains venins, les bactéridies du charbon, etc., mais le mécanisme intime de Taction de ces poisons du sang n*a pas toujours été reconnu et nous n'y insisterons pas davantage.

E. — TEGHNIQUE HÉMATOLOGIQUE

Pn>oédés d observation microscopique du sang. — Il suffit d'une wwlte de sang pour l'examen histologique et on l'obtient chez l'homme par >n^ piqûre au bout du doigt. Chez la grenouille, pour avoir du sang exempt de

PSTSIOLOGIE HUIIALNE. 7

lymphe, il faut le prendre dans le cœur même. Cette goutte de sang placée entre deux lames de verre montre les particularités que nous avons signalées précédemment. Si l'examen doit être prolongé, il est bon, pour éviter Tévaporation qui altère les globules, de placer la gouttelette dans une chambre humide dont le modèle le plus simple consiste en un mince anneau de moelle de sureau imbibé d'eau qu'on place autour de la goutte et qu'on recouvre de la lamelle. L'action de la chaleur sur les globules sera étudiée au moyen de la chambre chaude, de Isl platine chauffante, de la barre d'étain, etc. L'emploi de la chambre chaude est indispensable pour observer les mouvements amiboïdes des leucocytes dans le sang des animaux à sang chaud. — Ces mouvements se voient au contraire à la température ordinaire sur les globules blancs de la grenouille. La dessiccation immédiate obtenue en recevant une goutte de sang sur une lame de verre chauffée préalablement à 70° conserve aux globules leur forme et leurs dimensions et a permis à Welcker de faire des mensurations rigoureuses. La dessiccation lente altère et détruit même les globules, ce qui explique la presque impossibilité de les reconnaître dans les anciennes taches de sang.

L'action du froid, signalée par Rollet, sera étudiée en plaçant pendant quelques minutes une préparation de sang bordée à la paraffine, dans une glacière artificielle, et en la faisant ensuite dégeler. L'hémoglobine se dissout dans le sérum et les globules deviennent incolores.

L'action des gaz et de l'électricité sera étudiée au moyen des chambres à à gâz et du porte-objet électrique.

Numération. — La nume'ration directe des globules contenus dans une quantité donnée de sang a été exécutée, il y a déjà plus de trente ans, par

FiG. 33. — Cellule compte-globules.

Vierordt et Welcker et a donné des résultats que les auteurs plus récents n'ont fait en quelque sorte que confirmer.

Procédé de Cramer, Potain et Malassez. — Il consiste à introduire le sang préalablement étendu d'une quantité connue de sérum artificiel (au moyen du mélangeur Potain) dans un tube capillaire exactement divisé en |x et de capacité connue. Ce capillaire artificiel est placé sous le microscope et on y compte les globules au moyen d'un oculaire pourvu d'un micromètre quadrillé. En multipliant ce chifi're par le titre de la solution, Malassez arrive au chifl're de 4.000.000 de globules par millimètre cube dans le sang du doigt.

TECHNIQUE HÉMATO LOGIQUE

Procédé iVHayem et Nacket, — D'après ces auteurs, les appareils capillaires très difficiles à remplir de sang donnent des résultats inexacts. Ils emploient comme compte-globules une petite cellule de hauteur connue (1/5 de millimètre), dans laquelle on dépose le sang après Tavoir dilué dans une quantité déterminée de sérum, puis on place sur le tout une lamelle de verre. Le sang dilué forme ainsi une lame liquide à faces parallèles qu'un oculaire quadrillé

FiG. 3i. — Appareil mélangeur.

Avec la pipette B on prcntl i/i ce. du ^érum artificiel qu'on met dans le vase C ; arec la pipette A on aspire t nm. c. de »ang a une piqûre du bout du doigt cl on le mélange avec le sérum du Taxe C. On met une goutto d« ce mélange dans la cellule, fig. 33.

divise en cubes parfaits ( fig. 35). On compte les globules dans un ou plusieurs de ces cubes et, par un calcul très simple, on a le nombre des globules par millimètre cube. En se mettant à l'abri des causes d'erreur, Havem est arrivé au chiffre de 5. 500.000 globules par millim. cube dans le sang du bout du doigt. Les chiffres obtenus par la numération ne sont qu'approximatifs, car les chances d'erreur sont considérables et ces erreurs étant multipliées par les calculs (jusqu'à 20.000 fois), il peut en résulter des écarts énormes de 500.000 globules et plus î par millimètre cube. 11 s'en suit qu'on ne peut accepter de chiffres qu'autant qu'ils sont dus au même observateur et aux mêmes méthodes.

Ëvaltiation de la masse totale du sang. — Il existe une quinzaine de procédés se rapportant aux méthodes suivantes :

i* Saignée à blanc ; 2<* dilution des principes fixes du sang par l'eau distillée Valenlin) ; 3** dilution d'une solution saline titrée par le sang ; •4'' méthode

colorimétrique (Welcker) ; 5** méthode spectroscopique (Preyer) ; 6' méthode basée sur la numération. La méthode colorimétrique est la meilleure.

Voici le procédé de Welcker (1854) :

On recueille tout le sang d*un animal saigné à blanc et on le pèse A. On fait passer un courant d'eau distillée ou mieux salée dans les vaisseaux jusqu'à ce que cette eau revienne incolore et on la recueille. On coupe l'animal en morceaux et on épuise par Teau distillée les tissus hachés ; ces eaux de lavage sont réunies et forment ainsi un mélange Ma d'une certaine coloration. On ajoute alors à une portion de sang recueilli directement A une quantité d'eau distillée suffisante pour donner au mélange Mb la coloration de Ma, et, pour arriver à l'égalité de teinte, on peut se servir du colorimètre de Duboscq d'un emploi plus simple que le procédé primitif de Welcker (Jolyet). On connaît donc : 1° la quantité d'eau distillée ajoutée à cette portion de sang ; 2" la quantité de cette portion de sang ; 3** la quantité d'eau injectée et d'eau de macération. 11 s'agit d'en tirer l'inconnue ar, c'est-à-dire la quantité de sang contenue dans les eaux de lavage. — Une simple proportion algébrique la donne, et cette quantité ajoutée à la saignée donne la quantité totale. — On peut (Gscheidlen) faire agir l'oxyde GO sur la portion du sang dilué et sur l'eau de lavage, pour faciliter et rendre plus sûre la comparaison des colorations, l'hémoglobine oxycarbonée étant inaltérable.

On peut employer comme témoin dans cette méthode, au lieu d'une dilution titrée de sang, une solution depicrocarminate,ou môme des verres colorés.

MÉTHODE DU BAIN. — Méthode de Tarchanoff, — Cette méthode toute récente et relativement facile est applicable à l'homme. Elle consiste à épaissir le sang en plaçant le sujet dans un bain d'étuve. Comme on peut déterminer avec précision la proportion d'hémoglobine contenue dans un centimètre cube de sang avant et après le bain, et la quantité d'eau perdue dans l'étuvè, le problème se trouve réduit à la solution d'une équation au premier degré dans laquelle a et a' représentent la quantité d'hémoglobine par centimètre cube de sang avant et après le bain, p la quantité d'eau perdue par évaporation et X la masse initiale du sang.

La quantité d'hémoglobine renfermée dans la masse totale du sang ne varie évidemment pas par la sudation ; si donc on la représente avant le b€Ùn par ax,et après le bain par a'(a:-p), ces deux valeurs seront égales, on en tirera facilement la valeur de x. — Hayem a fait observer qu'il n'est pas absolument prouvé que la totalité de la perte aqueuse sdit fournie par le sang.

Le dosage de l'hémoglobine doit être extrêmement rigoureux pour éviter la multiplication considérable des erreurs même minimes par le calcul.

Séparation des globales et du plasma. — Le sang de cheval se coagulant lentement, si on ralentit encore sa coagulation en le recevant, au sortir de la veine, dans une éprouvette de verre mince qu'on place dans un mélange réfrigérant, les globules se précipitent peu à peu et on peut les isoler, au bout d'une heure environ, par décantation du plasma. — En retardant, par l'addition

TECHNIQUE HÉH ATOLOGIQUE 101

Jun peu d'eau sucrée, la nnapulation du «ang do grenouille, Millier a montré qu'oD peut le flllrer ; le plasma passe mais les globules restent sur le filtre. Le sanç des grenouilles en Trai est normalement très peu coa^ulable et on peut le

F[r.. X>. — >i limera liun (Ivs f-'ioliules : Aïjiecl (le In préparation.

Gltrcr sans addition de sucre. — Par la force centifuge, le saog recueilli dans une éprouvette et soumis à une rotation très rapide, se si'pare et les globules gagnentle fond du tube(Salet etDaremberg). — On peut enfin obtenir celte séparation par la liltration d'un sang quelconque rendu incoagulable parl'additioD de solutions salines concentrées (Denis, Schmidt, Gautier), mais les globules sont alors rétractés et déformés, ayant perdu par exosmose une partie de leur substance.

Pr^aration des oristaux d'hémoglobine . — Il existe plusieurs méthodes pour les préparer en grand. — Yoici une de celles d'Hoppe-Scyler : OD commence par séparer les globules en ajoutant à du sang défibriné de cbien ou de cheval dix fois son volume d'une solution de chlorure de sodium ; on expose au froid pendant un ou deux jours pour laisser déposer les globules, on décante le liquide surnageant, puis on verse les globules dans un ballon avec de l'eau, on y ajoute de l'éther et on agite vivement. On décante la touche cthérée, on filtre rapidement et on ajoute h la fiqueur filtrée refroidie *0°ie 1/4 de son volume d'alcool à 0° et on abandonnele tout ii — 5° pendant pluâeurs jours. Le liquide se prend en une masse cristalline. On fait recristalliser à plusieurs reprises pour obtenir l'hémoglobine entièrement pure.

Examen Bpeotroscopiqae dn sang. — On le pratique au moyen du speetroscope de Kirchoff et Bunsen.

Le spectroBCOpe se compose essentiellement des organes suivants : i" un prisme très pur P, installé verticalement sur un support et recouvert d'un tambour noirci à l'intérieur et percé de trois ouvertures pour le passage de

trois tubes ; 2^ un tube A portant un collimateur, c'est-à-dire une fente verticale étroite, placée au foyer principal d'une lentille qui convertit en rayons parallèles les rayons divergents envoyés par la fente ; 3° un tube B portant une lunette grossissante destinée à observer l'image spectrale; 4** un troisième tube D portant un micromètre destiné à relever exactement la position des

FiG. 36. — Spectroscope.

raies. Ce micromètre est éclairé par derrière à l'aide d'une lampe et se trouve au foyer d'une lentille convergente située à l'autre extrémité du tube destinée à en donner l'image. On s'arrange de manière que l'image du micromètre se réfléchisse sur la face d'émergence du prisme et soit renvoyée dans la lunette. De cette façon l'image grossie du micromètre vient se placer au-dessus de celle du spectre et on les voit toutes deux en môme temps.

Le sang ou le liquide à analyser est placé dans une petite auge en verre à faces parallèles cuve hématinomé trique Smm et disposé derrière la fente ; une flamme à gaz ou à pétrole est placée derrière le liquide. Les rayons lumineux de cette flamme ayant traversé le liquide entrent par le collimateur, tombent à l'état de parallélisme sur le prisme qui les décompose et les dirige ainsi décomposés en spectre dans la lunette, où l'œil les perçoit avec l'image superposée du micromètre.

Extraction des gaz du sang. — L'appareil employé presque exclusivement aujourd'hui dans les recherches gazométriques faites sur le sang est la pompe à mercure de Ludwig diversement modifiée par les physiologistes. Le modèle employé en France est celui de Grchant, il comprend :

1° Un baromètre à siphon (fig. 37) dont la longue branche se termine par une forte ampoule destinée à augmenter la capacité de la chambre barométrique, la petite branche étant un réservoir à mercure qui se trouve en communication avec l'autre branche par un tube de caoutchouc et qu'on peut abaisser

TECHNIQIE HKMATOLOGIQUE 10

ou élever à volonté au moyen- d'une corde s'eiiroulanl autour d'une poulie

m. 37. — Toinpo h n

â° Une petite cuve à mercure destinée à recevoir réproiivelte T remplie de mercure où doiveiitse rendre les gaz expulsés. Cette cuve est en communication avec la longue branche du tube-baromètre au moyen d'un tube muni d'un robinet à trois voies ;,

3^ Un ballon à long col tubulaire, destiné à recevoir le sang et que l'on peut mettre en communication avec la chambre barométrique en ouvrant le robinet placé au-dessus de cette chambre ; le ballon est uni à la pompe par un tube à joints immergés, le ventre du ballon est chauffé au bain-marie, le col est refroidi par un manchon d'eau froide ;

4® Dans les laboratoires allemands dés appareils à dessiccation sont interposés entre le récipient renfermant le sang et la chambre barométrique et destinés, selon le conseil de Pfluger, à produire le vide sec.

Opération. — On commence par vider d'air tout l'appareil, y compris le ballon, en manœuvrant la pompe et le robinet à trois voies jusqu'à ce qu'il ne reste plus une seule bulle d'air dans la chambre barométrique, lorsque, la communication étant interceptée entre cette chambre et le récipient, on soulève le réservoir mobile au-dessus de la chambre barométrique. L'air extrait du ballon s'échappe à travers le njercure de la cuvette. Il s'agit alors d'introduire du sang frais dans le réservoir du récipient et de l'empêcher de se coaguler ou de bouillonner trop vivement pendant l'opération. A cet effet, on introduit d'abord dans le réservoir vide d'air 15 à 20 cent, cubes d'une solution bouillie de sel marin à 20 p. 100, en ayant soin de ne laisser entrer aucune trace d'air. Dès que la quantité nécessaire de la solution salée est entrée, on y fait arriver le sang de l'animal par un tube en caoutchouc à robinet immergé R, qui le reçoit directement de la veine ou de l'artère et qui est aussi rempli d'eau bouillie (Mathieu et Urbain) ; ou mieux, on introduit le sang au moyen d'une seringue graduée, et on pousse ensuite un peu de mercure qui chasse et fait tomber dans le ballon le sang qui aurait pu rester dans le tube. EnOn, la température du bain d'eau étant élevée à 36 ou 37°, on ouvre avec précaution le robinet. Les gaz se précipitent dans la chambre barométrique d'où on les chasse dans l'éprouvetteT par la manœuvre dc'la pompe. Le sang est mesuré après l'expérience en laissant écouler le liquide dans une éprouvette graduée. Son volume, diminué de celui de la solution salée, représente le volume du sang. Ce volume se trouve mesuré directement si on a emplové la seringue graduée.

L'analyse et le dosage des gaz recueillis dans l'éprouvette eudiométrique T qu'on porte sur la cuve à mercure se fait par les méthodes ordinaires usitées en chimie; l'O. est absorbé par le phosphore ou l'acide pyrogallique ; le CO* par la potasse; TAz est dosé par différence.

Pfluger qui a signalé l'avantage de l'extraction dans le vide sec, tandis qu'avant lui on opérait en présence de la vapeur d'eau fournie par le sang, a montré que la totalité des gaz est expulsée par ce procédé, même le CO" combiné et que les acides n'en dégagent aucune proportion nouvelle. Il a montré en outre qu'en opérant en quelques minutes, on avait des résultats plus exacts qu'en opérant plus lentement.

TECHNIQUE HÉMATOLOGIQUE iO:î

Méthode générale d'analyse du 'sang. — La méthode ancienne de Prévost et Dumas ne pouvait pas donner la proportion réelle des globules dans le sang à leur état physiologique, c'est-à-dire à l'état humide, car toute Teau évaporée du caillot était supposée provenir du sérum interposé entre les globules, et ceux-ci étaient évalués comme s'ils eussent été des éléments secs. Les méthodes nouvelles dues à Hoppe-Seyler, Gautier, Bouchard sont plus rigoureuses puisqu'elles permettent le dosage des globules tels qu'ils sont réellement, e'eât-à-dire humides. Yoici d'ailleurs la série des opérations pour avoir la composition brute du sang total :

!• On pèse le sang à analyser ;

2' On commence par ôter la fibrine par le battage, on la lave à l'eau, à l'alcool et à Téther, on la dessèche et on la pèse ;

3* On dose Veau du sang défibriné en évaporant au bain-marie à siccité, chauffant ensuite le résidu à 120° et on pèse le résidu ;

4* Ce résidu, qui représente les matériaux solides (globules secs, albumine exiractifs et sels), est incinéré et donne le poids des matières minérales ;

3* Le poids des globules (secs) est donné par la différence entre le résidu du sang défibriné et le résidu du sérum.

Pour doser \ albumine on la précipite en acidifiant le sanq défibriné par l'acide acétique et en le versant dans l'eau bouillante. On sépare le précipité par ûltration on le lave, on le sèche et on le pèse.

L^matières extractives et lesse/* se dosent en évaporant à siccité le liquide précédent d'où on a extrait l'albumine. On pèse le résidu et, en l'incinérant, on a le poids des sels et par différence celui des extractifs.

Les graisses sont dosées en évaporant à siccité un poids déterminé de sang défibriné, en pulvérisant le résidu, en l'épuisant par l'éther et en pesant cet extrait éthéré.

Tous ces dosages se font de la même façon avec le sérum.

Dosage des globules humides. — Procédés d'Hoppe-Seyler. — 1° Par la détermination de la fibrine du plasma ; ne s'applique qu'au sang de cheval qui se coagule très lentement.

2* Par la détermination de l'hémoglobine et des substances albuminoïdes des globules: applicable au sang de l'homme. On recueille quatre portions de sang. On fait déposer les globules en ajoutant à la première portion du sang une solution étendue de sel marin (1,5 p. 100), qui ne les altère pas, on décante le liquide qui surnage et, après avoir lavé les globules avec la solution saline, on y dose l'hémoglobine et les matières albuminoïdes en les coagulant par J'alcool. On dose de môme les albuminoïdes et l'hémoglobine d'une deuxième portion de sang complet. En faisant la différence des deux pesées on a le poids des substances albuminoïdes contenues dans le plasma.

Si l'on détermine à l'aide d'une troisième portion de sang la quantité de fibrine, puis les matières albuminoïdes du sérum provenant d'une quatrième portion de sang coagulée, on a tous les éléments pour le dosage des globules hQfnidf.*s. On obtient, au moyen d'un calcul très simple, le poids total du sérum

contenu dans le sang par le poids des albuminoïdes du sérum analysé; on a le poids du plasma en ajoutant le poids de la fibrine au poids du sérum ; on a enfin le poids des globules humides en retranchant le poids du plasma du poids total du sang.

Procédé de Bouchard. — Fondé sur la propriété qu'a une solution de sucre de canne d'une densité de 1,026, de permettre au sang de se coaguler saua altérer les globules. Ce procède' très simple est le plus recommandable en clinique. On recueille deux quanti te's égales de 15 grammes de sang dans deux capsules, dont l'une a reçu au préalable 10 grammes de solution sucrée. On laisse reposer ; le sang se coagule. Au bout de vingt-quatre heures on prend dans chacune d'elles 4 grammes du sérum formé, on les dilue séparément dans Teau acidulée et on les coagule à 100*; on lave les coagulums à l'eau chaude et on les pèse. Ces deux pesées suffisent pour avoir le poids total du sérum pour 100 gr. de sang. Soit en effet a le poids d'albumine du sérum pur, b celui du sérum sucré, le problème revient à savoir quelle est la quantité de liquide qu'il a fallu étendre de lOcc. pour l'amener à contenir -j^ d'albumine, au lieu de -^ , et l'arithmétique nous enseigne qu'on trouve ce nombre en calculant le rapport i^J. On connaît donc ainsi le poids du sérum dans 15 grammes de sang et par conséquent pour 100 grammes. On dose la fibrine dans les 15 grammes de sang pur, on rapporte à 100 de sang. On a donc le poids sérum + fibrine ou le poids du plasma de 100 grammes de sang, et on en conclut par différence le poids des globules humides.

Dosage de l'hémoglobine. — Très important, car il sert à mesurer la capacité respiratoire du sang. Peut se faire diversement :

1° Par la quantité de fer contenue dans le sang. — Cette méthode repose sur l'analyse de l'hémoglobine et sur la proportion de fer qu'elle contient, qui est de 4,3 p. 1000 ; on peut aussi peser directement l'hémoglobine ;

2** Par T analyse spectrale (Preyer). — Une solution concentrée d'hémoglobine, sous une épaisseur déterminée et éclairée par une lumière très vive ne laisse passer que les rayons rouges, tandis qu'une solution plus diluée, et de même épaisseur, n'absorbe qu'une partie des rayons jaunes et verts. Si donc on dilue un volume connu de sang placé dans l'hématinomètre jusqu'à ce qu'il commence à laisser passer les rayons verts, et si on a eu soin de noter l'apparition de ces rayons verts dans une solution d'hémoglobine titrée à l'avance on peut doser par comparaison la quantité d'hémoglobine contenue dans le sang à examiner ;

3° Par la colorimétrie , c'est-à-dire par la comparaison de l'intensité de la couleur du sang dilué et d'une solution titrée d'hémoglobine ou d'hémino (H. Seylcr), ou de picrocarminate d'ammoniaque (Malassez), ou de verres coloriés (Jolyet),ou de rondelles'de papier teintées (Hayem). Cette méthode est d'un emploi facile en clinique ; et si on se sert, comme Jolyet et LafTont, du colorimètre de Duboscq, on supprime presque entièrement l'erreur due h

TECHNIQUE HEMATOLOGIQUK 107

rappreVialion de chaque observateur quand il s'agit déjuger lYgalUé de deux - teintes.

L'appareil (lig. 38) eu m prend deux cuves cylindriques ^ fonii plat en glace [ qu'éclaire par dessous un miroir incliné. Dana chaque cuve descend un tube ; fermé en basparun disque en glace plane. Si on regarde par en haut le liquide ■ coloré des cuves, on le voit en couche d'autant plus mince et par suite d'autant moios coloré que le plongeur sera plus enfoncé dans la cuve, or cet enfoncement M règle au moyen de vis micrométriques. Si les cuves contiennent des liquides de teintes différentes, on pourra, en abai-isunt plus im muiiis l'un des

riii, 38, — CoIorimÈIre (le Oiitjosrq.

S les rendre égales, et lire sur les échelles les rapports di>s épaisseurs qui TOût, en même temps, le* rapports colorimétriques. Pour diminuer l'erreur lelle. un prisme amène simultanément à l'œil les imagos juxtaposées î lieuï cuves cl l'égalité des deux teintes est exactement appréciée, — rerre colore, dont on a déterminé la valeur comparée à une solution * il hémoglobine, sert d'étalon inaltérable et toujours prêt ; \ "firla dosage vûlumélriçue de l'oxygène sAisorbi- dans le sang saturé de l* pi IQuinquaud, Gréhant). 1 gr, d'hémoglobine absorbe 1 .1(8 ce. d'O.

Dosage du glycose. — On aspire avec une seringue, ou l'on tire par la saignée, dans une capsule de porcelaine tarée 10 à 25 gr. de sang; on y ajoute le poids égal de sulfate de soude cristallisé et quelques gouttes d*acide acétique; on fait bouillir pour cbaguler le sang. Le caillot, d'abord rutilant, étant devenu noir et spongieux, on y rajoute exactement Teau perdue par évaporation, puis on exprime à chaud et. on dose le sucre dans le liquide à Taide de la liqueur de Fehling, titrée à 5 milligr. de glycose par centimètre cube (Cl. Bernard) .

Dosage de l'urée du sang. — On coagule un volume donné de sang en y ajoutant 4 fois son volume d'alcool, et quelques gouttes d'acide acétique; on fait bouillir, on flltre, on exprime le caillot, on le délaye dans un peu d'alcool et on exprime encore. Les liqueurs alcooliques réunies sont distillées au bain-marie, le liquide aqueux qui reste est évaporé à siccité dans le vide, puis repris par l'alcool absolu additionné d'un peu d'éther. On chasse Talcool et l'éther, on reprend par l'eau et on précipite la solution par l'azotate mercurique.

Il se précipite des flocons jaunâtres qui renferment l'urée; mais comme l'azotate mercurique précipite aussi d'autres substances, il faut mettre l'urée en liberté et la doser autrement. On délaye donc le précipité mercurique dam l'eau et on le décompose par l'hydrogène sulfuré. La liqueur filtrée incolort renferme toute l'urée. On la dose à l'aide de l'hypobromite de soude. (V. Ufm technique urologiq eie. )

Étude médico-légale des taches de sang. — La médecine judiciain peut retirer de l'application des données précédentes des renseignemenfc utiles pour la détermination des taches de sang. On procède de la manièn suivante :

I. Détermination des globules rouges. — Il faut que la tache ne soit pa trop ancienne, que les globules ne soient pas détruits et soient encore recon naissables au microscope, circonstances qui se présentent rarement. En trai tant la tache par l'eau, on pourrait, dans un cas favorable, difl^érencier un tache de sang d'oiseau d'une tache de sang de mammifère, mais il serait im possible de distinguer s'il s'agit de sang humain ou de sang d'un mammifér quelconque. — En règle générale donc, l'examen microscopique ne peut to« au plus révéler qu'une chose, c'est que la tache est due à du sang.

IL Recuerches chimiques. — On a employé plusieurs méthodes puremei chimiques ; deux seulement ont de la valeur : 1° la recherche des cristau d'hémine et 2*» la recherche du fer de l'hémoglobine.

1** On ajoute au sang desséché ou à l'eau de lavage recueillis dans un verre <] montre un petit grain de sel et de 8 à 20 gouttes d'acide acétique glacial ; o broie le tout avec une baguette de verre et l'on chauffe quelques instants liquide sur une petite flamme ; puis on le fait évaporer sur un bain-marie € dans une rluvr* à iMY. Lf résidu ser vu au microscope, doit montrer des cri

TECHNIQl K HKMATOLOGlUl'K 109

toux d'hémine (v.p. 58). Scriba a obtenu des cristaux d'héuiiiie avec des taches de sang datant authentiquemenl do quarante ans.

2* Pour la recherche du fer, qu'on ait trouvé ou non les cristaux d'hémine, on arrose le résidu précédent avec de Teau pure qui ne dissout pas Thémine et on le lave sur un petit filtre. On ajoute alors quelques gouttes d'une solution étendue de soude caustique qui dissout l'hémine et l'entraîne dans un petit creoset qu'on place au bain-inarie. Le résidu de la solution ainsi évaporée est incinéré et les cendres sont traitées par l'acide chlorhydrique. Après une nouvelle évaporation au bain-marie il reste une petite quantité de chlorure ferrique, dans lequel on décèle le fer à l'aide du ferrocyanure de potassium.

3* Si la tache n'abandonne rien à l'eau pure ou ammoniacale on ajoute une ^atte de soude caustique qui dissout l'hématine et on opère comme ci-dessus.

lïl. Recdercues spectroscopioues. — Le.s taches sont raclées, découpées si elles sont snr une étoffe, et mises en macération dans un peu d'eau ammoniacale. Au bout d'un certain temps on examine le liquide au spectroscope, et, si on voit les deux raies d'absorption de l'oxyhémoglobine, ou larsde de la méthémoglobine, on est sûr de la présence du sang dans la tache. — Si ces deux raies ne paraissent pas, on cherche le spectre de l'hématine. Pour cela, on traite la solution ammoniacale dans un flacon bouché à l'émeri par de l'acide acétique eristailisable jusqu'à réaction acide, on ajoute un égal volume d'éther et on «gîte plusieurs fois. La séparation de l'éther étant effectuée, on voit que cet élheràune teinte brune rouge. On l'examine au spectroscope et on voit les deux bandes de Yhématine en solution acide (p. 61, fig. 30), à moins que la dilution de la liqueur ne soit trop grande. La recherche de l'hématine est seule possible pour les anciennes taches, car, d'après Gorup-Besanez, on ne peut plus déterminer l'oxyhémoglobine après une quinzaine dejours. — Cazeneuve épuise la tache par l'eau ammoniacale, traite par l'hydrosulfîte de soude et obtient to spectroscope deux nouvelles raies caractéristiques.

LYMPHE ET CHYLE

, ^ .^ . . I Couleur, odeur, saveur, densité, réaction, coagulabilité,

A. Caractères physiques. { q^^^tité, constitution physique.

I 1** Globules blancs, globulins, etc.

B. Caractères anatomiques. j g» piasma.

1" Globules.

\ r Plasma I ^^^'''''^- / i Sérum.

/ 3** Analyse générale.

\ 4* Gaz.'

/ Variations ! ^"^"^'^^^ ^^ diverses conditions.

/ * Modifications dans la traversée des ganglions.

Développement et origine.

iNutrition.

T>. ) Partielle : des leucocytes.

^ ^, . , . , , , V. ^ ^"^^ propre / ^^^^' Générale : coagulation.

/). Physiologie de la lymphe ) ^e la lymphe i Généraux : circulation.

'^ ^" '^' '• 1 [ Mouvements. \ i I>es globules:

^ ( Partiels 5 diapèdèse.

\ rariieis, s ^^ plasma :

\ transsudations.

Usages et rôle physiologique de la lymphe et du chyle.

Définition. — La lynipho est une humeur consliluante dont le chyle est une variété momeiilauée. Une partie du plasma sanguin traverse par endosmose les parois des capillaires et se répand dans les interstices des éléments (liquide interstitiel, hlasteme de Robin). Ce liquide plus ou moins modifié par les éléments vivants, est repris par les origines des vaisseaux lymphatiques et devient la lymphe qui finit par retourner au système veineux et par se nu*langer de nouveau au sang dont il e'tait parti. Le chyle est la lymphe qui revient do l'intestin niélant^ée aux produits résorbés de la digestion.