EXAMEN DU SANG

tifs altèrent les globules; on devra au paravant chauffer ceux-ci, ce qui les rend inaltérables (Ehrlich), par exemple, en les laissant un certain temps à l'étuve sèche à 120°. Parmi les substances qui constituent les éléments globulaires du sang, les unes, celles des hématies, sont colorées par des réactifs acides, d'autres, de même que les bactéries et les microorganismes, les noyaux des leucocytes, sont sensibles aux colorants basiques, tandis que les granulations protoplasmiques de ceux-ci le sont aux colorants neutres; on doit donc se servir d'un bain colorant mixte, neutre.

Gilbert recommande la formule suivante qui colore en rouge les hématies et en violet les granulations leucocytiques : à 5 volumes de solution aqueuse saturée de fuchsine acide ajouter en agitant 1 volume de solution concentrée de bleu de méthyle dissous dans 5 volumes d'eau distillée.

Cette solution colorante devra être filtrée et préparée quelques jours d'avance.

Lorsque les éléments cellulaires du sang sont altérés, leur protoplasma ne se comporte plus de même vis-à-vis des matières colorantes et l'on voit des globules normalement sensibles aux réactifs colorants acides le devenir aux réactifs basiques et vice versa. En employant un colorant double tel que l'éosine hématoxylique, par exemple, on verra, dans les cas d'altération du protoplasma globulaire des hématies, les portions altérées se teindre en bleu, tandis que les portions saines prendront la coloration rouge brique ordinaire (Gilbert).

Les préparations microscopiques du sang ne suffisent pas pour apprécier l'état histologique de ce liquide, il est nécessaire de compter le nombre des globules rouges, nombre qui varie essentiellement selon les diverses maladies du sang, et de se rendre compte également du nombre des globules blancs et de leur rapport avec le chiffre des hématies.

Pour numérer les éléments sanguins, il est indispensable de diluer le sang; en utilisant le sérum iodé, on obtient tout à la fois la dilution nécessaire et une coloration acajou plus ou moins foncée des hématies qui permet de les distinguer facilement. MM. Hayem et Nachet ont imaginé un dispositif commode pour cette numération : c'est une petite cellule analogue à celle dont nous avons parlé plus haut pour la préparation du sang frais; cette cellule a une hauteur de 1/5 de millimètre. Un plan quadrillé situé, soit dans l'oculaire, soit sur le fond de la cellule, soit sous la platine du microscope, permet de compter les globules situés dans un carré de 1/5 de

millimètre. Etant donné la hauteur du liquide à examiner qui est également de I/o de millimètre, on voit que l'on a ainsi le chiffre des globules contenus dans ijo de millimètre cube et par un calcul simple, en tenant compte du degré de dilution, on arrive à connaître le nombre des globules dans 1 millimètre cube de sang, qui est le chiffre auquel on rapporte toutes les opérations de cette nature.

3° État chimique du sang. — Pour cet examen, il est nécessaire d'avoir une certaine quantité de sang. Il a pour but de doser l'hémoglobine, ce qui, au moyen de la numération des globules, permet d'obtenir la valeur globulaire ou quantité d'hémoglobine contenue dans chaque globule.

Le dosage de l'hémoglobine se fait par la chromométrie. L'appareil de M. Haj'em se compose de deux petits réservoirs en verre et d'une série de rondelles en papier dont la couleur est de plus en plus foncée, correspondant chacune à une solution sanguine de plus en plus riche en hémoglobine et de titre connu.

On remplit les deux réservoirs, le premier avec une solution de sang à essayer diluée d'une façon déterminée, le second avec de l'eau pure. Puis, derrière celui-ci, on fait successivement passer les rondelles jusqu'à ce que l'une d'entre elles possède une coloration égale à celle de la solution de sang de l'autre réservoir. Il suffît alors, en tenant compte de la dilution de ce sang, de voir à quelle valeur en hémoglobine elle correspond pour connaître la richesse de ce sang en hémoglobine.

L'examen chimique du sang se complète par l'examen speetroscopique qui est d'un intérêt capital pour le diagnostic des intoxications. L'oxyde de carbone, on le sait, réduit l'oxyhémoglobine et fait apparaître, entre les raies D et E du spectre, une bande large et unique (Stokes) à la place des deux bandes de l'oxyhémoglobine.

La méthémoglobine, composé chimique différant de l'oxyhémoglobine, qui se produit dans les intoxications, par exemple, par le chlorate de potasse, et lors de l'administration à doses médicamenteuses de substances telles que le nitrite d'amyle, le bleu de méthylène, l'acétanilide, etc., se révèle à l'examen spectroscopique par la production de trois ou quatre bandes, selon la réaction alcaline acide ou neutre de sa solution, bandes qui se trouvent l'une entre C et D, les trois autres dans les régions jaunes, vertes et bleues du spectre (Gilbert).