AU MICROSCOPE

Les huiles grasses peuvent se présenter dans la cellule avec deux aspects différents : lorsqu’elles sont à l’état de réserve nutritive dans les graines, soit dans l’albumen (pavot, ricin), soit dans les cotylédons (lin, crucifères, cacao, amandes, etc.), elles sont toujours en granules extrêmement fins qui seraient méconnaissables si la section n’amenait çà et là la fusion d’un certain nombre d’entre eux en gouttelettes plus ou moins volumineuses, jaunes, fortement réfringentes et à cause de cela faciles à distinguer; si, tout au contraire, elles doivent leur origine à la dégénérescence de certaines cellules ou parties de cellules ayant achevé de jouer leur rôle (péricarpe de l’olive, parenchyme des feuilles à l’automne, altération de la chlorophylle), elles affectent toujours la forme de gouttelettes très réfringentes. Il est vrai que de jeunes grains d’amidon peuvent avoir le même aspect; les réactifs ou colorants les différencieront facilement : l’eau iodée, sans action apparente sur les graisses, colorera en bleu l’amidon; de plus, la teinture d’orcanette communiquera une teinte rouge aux corpuscules graisseux, mais il faut noter que l’action de ce colorant est bien plus nette avec les huiles insolubles dans Falcool, ainsi elle réussit mieux avec le

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lin qu’avec le ricin. J’engage les débutants à tenter la coloration de coupes transversales de graine de lin ; la section est plongée aussitôt après son obtention dans une goutte de réactif et y est abandonnée quelques minutes avant d’être montée dans la glycérine. Lorsque la plante est fraîche, il est indispensable de traiter au préalable la préparation par l’eau qui dissout le sucre et les hydrates de carbone susceptibles de retenir l’huile et de la dissimuler.

L’acide osmique est le réactif par excellence des corps gras qu’il colore d’abord en brun, puis en noir. La cyanine ou bleu de quinoléine en solution aqueuse ou alcoolique teint les graisses en bleu. Les huiles grasses sont solubles dans l’éther, le chloroforme; elles ne sont pas volatiles.

Ce dernier caractère permettra de les distinguer des Jiiiiles essentielles qui sont éminemment volatiles, mais jouissent comme les précédentes d’une forte réfringence, et de la solubilité dans l’éther, le chloroforme. L’alcool à 90°, sans action sur les huiles grasses, sauf pourtant l’huile de ricin, dissout au contraire facilement la plupart des huiles essentielles. Celles-ci se présentent le plus souvent en gouttelettes beaucoup plus volumineuses que les huiles grasses; leur localisation toute différente (Voy. Appareil secréteur) empêchera encore la confusion. Leur constitution chimique très variable a empêché, et empêchera peut-être toujours, de trouver un réactif général des huiles essentielles. Aussi, verrons-nous les liquides qui serviront à caractériser les huiles essentielles, communiquer à ces corps des colorations fort diverses sans qu’aucun d’eux ne teinte de la même façon toutes les essences. Ou a donné une liste assez longue de ces réactifs ; ceux qui nous semblent convenir le mieux aux micrographes sont : 1° l’acide azotique fumant; 2° l’acide sulfurique concentré; 3° le réactif de Frœhde que l’on obtient en dissolvant un centigramme de molybdate de sodium dans un centimètre cube d’acide sulfurique concentré; 4° l’hydrate de chloral impur; 5° une solution chloroformique de brome à 1/20 h

Jd est également difficile de donner des réactifs généraux des résines qui sont bien plus caractérisées par leurs propriétés physiques que par leur constitution chimique, d’autant plus que bien souvent elles se présentent à l’état de mélange, témoin les gommes-résines, les térébenthines, les baumes. Leur aspect au microscope est aussi très variable : ainsi chez les Convolvulacées les résines sont à l’état d’émulsion, c’est-à-dire en granules impalpables, dans le suc des laticifères (rhizome de turbith, pl. YI, fig. 1, L, r); dans les térébenthines, elles sont dissoutes dans les essences et le tout forme sous l’objectif des masses ou traînées grisâtres, mielleuses,

1. Pour plus de détails nous renvoyons au tome X de l’Encyclopédie chimique : Analyse chimique des végétaux, par Dragendorff et Schlagdenhauffen.

souvent écumeuses. La résine que l’on observe dans les fruits du poivrier se présente en petites masses homogènes, d’un jaune serin à peine translucide. Poulsen donne comme réactifs généraux des résines : 1° la teinture d’orcanette qui les colore en rouge; 2“ le violet d’Hanstein qui les teint en bleu et 3° la solution aqueuse d’acétate de cuivre (réactif de Franchemont et d’Unverdorben) qui communique aux résines, après cinq à six jours d’immersion dans son intérieur, une belle coloration vert-émeraude. La fuchsine les teint en bleu ou violet. Beaucoup sont solubles dans Talcool; la plupart le sont dans l’éther, le chloroforme; on utilisera cette propriété pour débarrasser les tissus des résines ou térébenthines lorsqu’elles deviennent gênantes par leur trop grande abondance.

Le caoutchouc se présente en fins granules tenus en suspension dans le latex d’un grand nombre de plantes. Il est surtout abondant chez les Morées et les Euphorbiacées. On le recherchera chez le Ficus elastica dont on pourra facilement recueillir quelques gouttes de latex en brisant le limbe de la feuille et mieux le pétiole ; on pourra préparer des coupes longitudinales du pétiole qu’on montera immédiatement dans la glycérine afin d’éviter la déperdition du liquide ; on rencontrera les laticifères dans le tissu conjonctif. Les huiles essentielles, la benzine, le sulfure de -carbone, le chloroforme dissolvent le caoutchouc. La gutta-percha se présente avec le même aspect dans les laticifères des Sapotées.

Nous arrivons à la troisième catégorie : les corps solides.

Les plus importants sont sans contredit, bien que l’attention n’ait été attirée sur eux que dans ces derniers temps, les plus tide s masses incolores (ce qui les a fait appeler leucites par M. Yan Tieghem) de substance azotée provenant de la différenciation et de l’individualisation de certaines parties du protoplasma, à côté duquel on devrait les placer logiquement. Ils sont parfaitement visibles avec un grossissement de 300 diamètres; beaucoup plus volumineux que les microsomes^ ils n’atteignent

Fig. 11. — Cellules de l’albumen du Melampyrummacrocarpum contenant des plastides de formes diHerentes et un noyau beaucoup plus volumineux (W. Schimper).

cependant jamais la taille du noyau, comme le montre la figure 11. Leur nom, très correct, de plastides (de ûXa'îtriç, qui forme) leur vient de leur pouvoir générateur; ce sonl eux qui formoni, en effet, de bonne

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heure les grains d’amidon, les corps chlorophylliens et les pigments solides. Etant générateurs d’amidon, ils constituent les corpuscules amylogènes; formateurs de chlorophylle, ils sont les chlorophores azotés des anciens auteurs; mais ils peuvent créer à la fois do l’amidon et de la chlorophylle. Schimper, qui lésa décrits dans ces derniers temps*, recommande, pour les étudier, d’éviter le contact de l’eau qui les gonfle et les altère, et conseille d’immerger immédiatement les coupes dans de la teinture d’iode étendue d’eau, mais il n’indique pas les proportions les plus convenables.

D’après nos essais une liqueur étendue est préférable à une solution riche en alcool, car la teinture d’iode pure n’agit que peu ou pas sur les granules d’amidon, ce qui est particulièrement fâcheux dans le cas actuel où Ton doit suivre la genèse de ces corps. J’ai obtenu les meilleurs résultats d’un réactif préparé en mélangeant à 4 parties de la solution iodée iodurée habituelle (Kl, 1 gr ; IIO, 100; I, Q.S. pour saturer) une partie de teinture d’iode (I, 1 ; alcool à 90% 12) ; il colore nettement l’amidon en bleu, les plastides en brun jaunâtre.

On prendra comme sujet d’étude de jeunes rameaux de Phaseolus et de pomme de terre; on pratiquera des coupes dans le dernier entre-nœud, le plus jeune, et Ton immergera celles-ci dans un verre de montre contenant quelques grammes du réactif. L’observation se fera également dans le réactif. Les plastides seront recherchés dans la moelle ; ceux de la pomme de terre, arrondis ou très légèrement elliptiques, sont surtout groupés autour du noyau; ceux des Phaseolus compressus, tumiclus, multiflorus, sont arrondis et répartis cà et là dans le protoplasma pariétal.

Ayant ainsi fait connaissance avec les plastides, on pourra les observer

Fig. 12. — Plastides générateurs d’amidon et de chlorophylle d’après Sachs, a, b, corpuscules jeunes; d, e corpuscules envoie de division ; /•, g, plastides altérés par l’eau (feuille du Funmda hygrometrica).

avec leur coloration naturelle dans l’eau additionnée d’un tiers d’alcool à90L Les plastides s’accroissent. Lorsqu’ils ont acquis un certain volume, ils se multiplient par scissiparité à la suite de la formation d’un étranglement médian (fig. 12, d.).

Amidon. — Genèse. Si nous n’abandonnons pas nos rameaux de haricots