TRAITÉ PRATIQUE DE MIGROORAPHIE

de sulfate de soude pur préablement déshydraté en poudre assez fine; ce sel doit recouvrir toute la partie inférieure élargie du cône. »

L’appareil, ayant été stérilisé après avoir été fermé à la lampe aux deux extrémités, peut se conserver indéfiniment. On le met en usage en faisant traverser le sulfate de soude par un volume déterminé d’air. L’aspiration cessant, on referme les deux extrémités du tube soit a la lampe^ soit tout simplement avec de la cire pour isoler le contenu. Pour observer les microbes arrêtés par le filtre, on dissout le sulfate de soude à l’aide d’une pipette renfermant de l’eau stérilisée que l’on fait couler dans l’appareil. La solution est reçue dans un flacon conique dans lequel on a placé 4 à 5 gouttes d’une solution d’acide osmique au centième. Les microbes se rassemblent au fond du flacon, on peut les isoler par décantation et les porter sous le microscope. Pour obtenir des cultures, on répartira la solution entre des flacons contenant du bouillon nutritif.

Cultures sur des milieux solides. — Les procédés que nous venons de décrire donnent des résultats certains et qui semblent à l’abri de la critique. C’est à titre de renseignement que nous parlerons des cultures sur gélatine solidifiée, telles que les pratiquent MM. les docteurs Miquel et Hesse, car on a reconnu que ce mode opératoire est loin d'être aussi sensible que les cultures dans les bouillons. Il a l’avantage d’éviter de longues manipulations et peut donner malgré tout des indications utiles. Le docteur Hesse fait usage d’un tube de 70 centim. de long et de 35 millim. de diamètre, fermé à l’une de ses extrémités par deux capuchons de caoutchouc superposés : l’externe est plein, l’interne est percé au centre d’une ouverture de 1 millimètre. La seconde extrémité du tube est fermée par un bouchon traversé par un petit tube de verre à l’aide duquel il sera relié à un aspirateur. On introduit dans le tube 50 grammes de gélatine peptonisée, on stérilise le tout par la vapeur d’eau à 100°, puis on dispose l’appareil horizontalement et, avant que la gélatine se solidifie, on tourne plusieurs fois l’appareil sur son axe afin de le revêtir totalement d’une mince couche de gélatine. Lorsque celle-ci a fait prise, on enlève le capuchon externe et l’on fait traverser le tube par un courant d’air dont la vitesse d’aspiration ne doit pas dépasser un litre par 3 ou 4 minutes. En agissant ainsi, les germes tombent en totalité dans la première partie de l’appareil, ce qui prouve qu’il n’en a laissé échapper aucun. Avec le temps, les germes vivants se développent et deviennent les centres d’autant de colonies qu’il est facile de dénombrer. H y a une cause d’échec dans l’arrivée, à rintérieur du tube, de germes de bactéries qui liquéfient la gélatine et amènent par suite la confusion de toutes les colonies. Les résultats sont encore faussés par la présence de ces moisissures qui ont la propriété de lancer leurs spores; la dilïusion de celles-ci augmente le nombre des colonies.

M. Miquel a modifié ce mode de culture : il fait usage de feuilles de papier bristol vernies à la gomme laque et recouvertes d’une gelée faite avec un litre de bouillon de bœuf neutralisé à la soude et non salé, additionné de 15 grammes de gelée sèche de Caragaheen et de 10 grammes de gélose. Des bandes de ce papier, stérilisé à Eétuve à 110", sont mises à gonfler dans l’eau stérilisée, puis sont arrosées, à Laide d’une burette graduée, d’eau ayant servi à recueillir par barbotement les spores. Le tout est porté à l’étuve à 35" et après 4 ou 5 jours chaque germe a produit une colonie. Les bandes sont ensuite plongées dans une solution d’alun, lavées à l’eau bouillie et immergées 30 secondes dans une dissolution d’acide sulfo-indigotique contenant 2 grammes d’indigotine par litre. On lave la feuille à Peau et on la trempe dans un bain à 1 pour 1000 de permanganate de potasse jusqu’à ce que le fond de la feuille redevienne blanc. On lave le papier à Peau et on laisse sécher. Les colonies se détachent nettement en bleu verdâtre sur le fond blanc.

Les bactéries les plus communes dans Pair sont, d’après Miquel, les Micrococcm aitrantiacus, chlorinus^ prodigiosus^ ureœ^ les Bacteriiim lineola^ catemila, xanthinum^ syiicyaniim, œruginosum ; les bacilles y sont abondants; on n’y rencontre habituellement que deux espèces de vibrions et l’un d’eux est le Vihrio serpens.

ANALYSE DE l’eAU.

Dans l’analyse microscopique de Peau, il y a deux opérations distinctes à faire. Dans la première, on étudie la faune et la llore en s’en tenant aux formes véritablement microscopiques : tout le monde sait qu’une eau qui ne peut nourrir ni poissons ni mollusques, et qui ne contient aucune phanérogame est une eau impropre à l’alimentation. Nous ne pouvons songer à entrer dans l’énumération de tous les habitants de l’eau, il faudrait un volume et encore nous ne serions pas sur d’être complet. Comment pourrionsnous citer tous les corps qui peuvent tomber accidentellement à Peau ou qui proviennent de la voirie ou d’industries se débarassant de leurs résidus en les lançant à la rivière? Nous avons eu plusieurs fois à analyser des eaux souillées par des mégisseries, teintureries et lavages de laines, blanchisseries, etc., etc. : l’infection était due à des débris de tissu conjonctif et à des textiles, corps que l’on est peu habitué à rencontrer dans Peau. Dans la seconde opération, on fait le dénombrement des Bactériacées et des germes de champignons susceptibles de se développer. Nous ferons remarquer que, contrairement à ce que l’on observe pour Pair, les Bactériacées de l’eau se

présentent dans leur état végétatif et sont, par conséquent, parfaitement et directement reconnaissables.

1“ Etude de la faune et de la flore. — Est-il nécessaire, avant d’entrer dans le sujet, de rappeler que les vases qui serviront à la prise de l’échantillon seront parfaitement propres et même stérilisés lorsqu’il s^agira de faire

Fig. 279. — Goutte d’eau d’uu bassiu recevant des eaux pluviales et des eaux de Seine (Thiais, 1879) ; elle est peuplée par des organismes appartenant à différentes familles d’Algues (cliché communiqué par M. L. Marchand).

le dénombrement des microbes ; que la prise devra être faite dans les lieux mêmes où les habitants ont l’habitude de puiser leur eau et en se rapprochant autant que possible des pratiques qu’ils emploient pour se la procurer. En un mot, il ne faut point dénaturer l’échantillon, ou, en quelque sorte, en créer un factice.

Dans un très grand verre à précipité, conique, on versera 2^'*, 50 environ d’une solution d’acide osmique au centième et l’on y mêlera peu à peu en agitant avec une tige de verre 100 gr. de l’eau à analyser. Une demi-heure après, on remplira le verre d’eau distillée stérilisée pour modérer raction colorante de l’acide osmique et l’on abandonnera le tout au repos pendant quelques heures pour permettre la précipitation de tous les corps tenus en suspension. Il est bien évident que pendant toutes les opérations l’on devra se mettre à l’abri des poussières atmosphériques. Par des décantations faites avec méthode, on rassemblera le dépôt dans 2 ou 3 cc. de liquide et on le

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portera par gouttes sous le microscope en faisant usage des colorants s’il y a lieu. M. Gérardin, en se fondant sur l’inspection des végétaux contenus dans le liquide, fait six types d’eau. Il part de ce principe que les eaux potables renferment seules des algues vertes et que les eaux non potables sont d’autant plus nuisibles que les Bactériacées qu’elles renferment sont d’une taille plus réduite. Voici l’énumération de ces types.

Mo Règne des Cladophora La Vanne, la Dhuis.

poaies \ ^0 — Zijgnema La Seine à Port-à-l’Anglais.

(a gués vertes) Jihynchonema Le canal de l’Ourcq.

S 4° Règne des Hypheothriæ [Crenoihrix,

Cladolhrix?) La Seine à Argenteuil.

(algues blanches) J5o Règne des Begrjlatoa ‘ La Rièvre.

\ 0'’ — Vi])rions Égouts de quelques établis-

sements classés.

La faune pourrait fournir le fond d’une classification semblable : toute eau riebe en infusoires peut être regardée comme mauvaise, car ceux-ci, de même que toutes les Bactériacées ne vivent que dans des milieux chargés de matières organiques : la présence d’euglènes et de monades est surtout significative. La rencontre dans l’eau de certains animaux plus élevés en oi*ganisation et celle de leurs œufs (oxyures, anguillules, œufs des tæuias et d’autres parasites) doit faire rejeter l’eau.

Nos trois figures 12-13-14 de la planche XL, reproduisent des préparations obtenues par le procédé à l’acide osmique inventé par Certes. C’est le seul convenable pour ce genre de recherches : il tue tous les êtres vivants, n’en laissant échapper aucun, et les précipite au fond du vase. 11 permet seul de retrouver les Bactériacées dans l’eau.

2° Numération des bactéries et des germes de moisissures. — Les bactéries se trouvent parfois en nombre formidable dans l’eau. Pour en donner un exemple, nous citerons l’eau de Seine puisée à Bercy qui, sans être des plus recommandables, n’est pas regardée cependant comme non potable, ne renferme pas moins de 4.800.000 bactéries par litre, d’après Miquel.

On diluera dans de l’eau stérilisée une quantité déterminée du liquide à analyser, mais celle-ci sera d’autant plus faible que l’eau sera soupçonnée d’être contaminée plus fortement (des dilutions au 5000% au 10000° pourront devenir indispensables); en tout cas, cette quantité sera telle que cinquante gouttes de cette eau projetées dans 50 matras différents contenant du bouillon nutritif, y donneront au plus naissance à trente-cinq cas de germination. En comptant le nombre de vases contaminés et sachant d’un autre côté quelle est la dilution de l’eau que l’on a employée, on calculera sans peine le nombre des Bactériées renfermées dans un litre d’eau. M. Miquel agit aussi autrement : il arrose avec l’eau contaminée son papier

gélatineux et il compte les colonies qui se développent à la surface en suivant le procédé que nous avons décrit à propos de l’analyse de l’air.

EXAMEN DES TEXTILES (pl. XXXIX, fig. 8-14).

Cet article est tiré des ouvrages de Yétillart et de Schlesinger qui résument, je le crois du moins, nos connaissances sur la matière. Nous ferons du reste remarquer, comme nous l’avons déjà fait plusieurs fois, que nous ne traiterons pas complètement la question et que nous désirons simplement initier les élèves aux opérations nécessitées par ce genre d’analyse: pour préciser, nous ne parlerons que des textiles d’un usage habituel chez nous, c’est-à-dire de la soie, de la laine, du lin, du chanvre, du coton, du jute. Nous y joindrons la ramie qui est appelée à devenir dans un avenir prochain un textile courant, et l’alfa parce qu’il rentre dans la confection des papiers et que nous aurons bientôt besoin de savoir le reconnaître.

Il suffit de placer sous le microscope quelques filaments du textile, montés dans l’eau ou la glycérine, pour en connaître l’origine : les fibres VÉGÉTALES étant formées par des cellules à paroi plus ou moins épaisse se distingueront par la présence en leur milieu d’une cavité plus ou moins large (^fig. 8-13); la laine dont la structure est beaucoup plus complexe et pluricellulaire sera caractérisée par les cellules épidermiques qui en recouvrent les filaments (fig. 21, XXXVII). La soie du Bombyx mori (fig. 14,) et toutes les soies, d’une façon générale, ne présentent ni cavité centrale, ni écailles superficielles ; les filaments de ces textiles sont hyalins, plutôt anguleux que cylindriques et partagés en deux longitudinalement par une ligne très fine que l’on peut laisser échapper lorsque l’instrument n’est pas parfaitement au point. Cette ligne marque la jonction des deux filaments produits par le ver, filaments qui s’accolent normalement aussitôt après leur sortie des filières: la preuve en est fournie par ces boucles que l’on rencontre quelquefois sur le trajet des filaments et qui sont formées par les deux fils restés indépendants. Quelques filaments de soie montrent d’autres stries longitudinales, très fines, que l’on peut du reste faire apparaître dans tous les fils par l’action de l’acide chromique étendu.

Il sera bon de contrôler l’examen microscopique par un essai microchimique : la lessive de soude au lO'" dissout la laine et la soie tandis que les textiles végétaux lui résistent.

La liqueur de Schweitzer (p. 70) dissout la soie et n’agit sur la laine que pour en rendre les cellules épidermiques plus visibles. L’acide sulfurique

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concentré dissout la soie et désorganise la laine, mais sans faire disparaître les éléments de cette dernière.

Certains tissus sont formés par un mélange de ces textiles; la constatation n'en est point difficile, car la confusion est plus apparente que réelle. Pour s’éclairer, il suffit de porter successivement et séparément sous le microscope les fils de la chaîne et ceux de la trame, isolés par le procédé qu’on emploie pour obtenir la charpie. Des difficultés de fabrication s’op- ])Osent à ce que l’on prépare des fils formés par un mélange de substances aussi difierentes que le sont la soie, la laine et les fibres végétales.

L’opération devient plus difficile lorsqu’il faut déterminer la variété de soie qui entre dans le tissu, le nom de l’animal qui a fourni la laine, la fibre végétale avec laquelle on se trouve en présence.

Les différentes soies se distinguent par leur épaisseur variant entre 17 et P-, leur coloration, l’apparence droite ou contournée des fils, enfin, par l’action de la lumière polarisée. J’en reste aux principes, car la soie du Bombyx mori dont j’ai donné les caractères plus haut est exclusivement employée en France.

J’en dirai autant des laines qui proviennent toutes du mouton. Plus la laine est fine, plus elle est estimée parce que son élasticité est inversement proportionnelle à son diamètre et que les cellules épidermiques par lesquelles se fait l’intrication des filaments sont relativement plus nombreuses chez elle. Les laines grossières [laine de la jarre) renferment des cellules médullaires disposées en amas plus ou moins puissants. La longueur des fils de laine varie entre 4 et 32 centimètres, leur épaisseur entre 14 et 60 a. Les poils du mouton (fig. 21, XXXVII) ont un aspect assez caractéristique pour que leur sophistication par des poils d’une espèce diflerente saute immédiatement aux yeux: un simple coup d’œil sur notre planche XXXVII en laissera la conviction.

La détermination des fibres végétales repose : 1° sur les caractères mor- ])bologiques de ces fibres, 2° sur la constitution chimique de leur paroi. Les caractères morphologiques sont fournis : L par l’examen de fibres entières et isolées, 2° par la mensuration de leur longueur et celle de leur épaisseur, 3° par l’étude de leur coupe transversale, étude qui complète les notions acquises par la vue de la fibre entière. La constitution chimique est donnée par des réactifs appropriés.

On ne peut juger de la forme des fibres et prendre les dimensions de CCS éléments que lorsqu’ils sont isolés. Parmi les textiles qui nous occupent les poils du cotonnier sont seuls indépendants à l’état naturel; les filaments fournis par les autres plantes sont en réalité des faisceaux de fibres sur lesquels il faut absolument faire agir les dissociants pour permettre la mise en liberté de leurs composants. M. Vétillart conseille pour

cela de faire bouillir pendant une demi-heure la prise d’essai dans une solution de carbonate de soude ou de carbonate dépotasse à 10 p. 100. La matière est lavée à l’eau dislillée au sortir du bain, séchée ensuite, et, finalement, divisée en trois paris destinées à des opérations distinctes. On fait aussi usage d’une solution à 50 p. 100 d’acide chromique impur et encore humide, obtenu par l’action d’un excès d’acide sulfurique sur du bichromate de potasse et, 2° d’une solution aqueuse au 10® de potasse ou de soude, mais l’on s’expose avec ces corps dont l’action est rapide et fort énergique à gonfler et même à altérer totalement les fibres, aussi préférons-nous le procédé de Vétillart. En tout cas, quelques-uns des filaments traités par les dissociants seront portés sur une lame à la surface de laquelle on aura déposé une goutte d’eau et, les maintenant dans le liquide avec l’index de la main gauche, on en isolera les éléments au moyen de l’aiguille droite courant parallèlement à la direction des fibres. Malgré tous les soins apportés à l’opération, les préparations ne renfermeront jamais qu'un petit nombre d’éléments entiers et parfaitement isolés. L’on a toujours une certaine peine à reconnaître les éléments libres au milieu des fibres non dissociées : l’examen de ces fibres isolées est incontestablement la partie la plus difficile de l’opération. L’observation des extrémités des éléments sera faite avec une attention particulière et l’on notera avec soin le volume de la cavité médiane. Les dimensions seront prises par les procédés micrométriques que nous avons exposés à la page 53 ; les mensurations seront répétées pour obtenir des moyennes.

Pour préparer des coupes transversales de fibres, on rassemblera un certain nombre de filaments et, les ayant disposés bien parallèlement, on en fera de petites bougies paraffinées (V. p. 38) qui, étant montées après refroidissement dans la moelle de sureau, se laisseront facilement sectionner. Les coupes seront vues dans l’eau ou la glycérine, les fibres étant prises dans l’encollage qui maintient les filaments verticaux par sa large surface.

Les parois des fibres textiles sont formées par de la cellulose pure ou plus ou moins incrustée de lignose ; quelques-unes possèdent une membrane mitoyenne lignifiée et des couches propres cellulosiques (chanvre) ; ces faits sont faciles à constater par l’action des réactifs caractéristiques de la cellulose (p. G9) et de la lignose (^p. 71). Pour obtenir des résultats comparables, on se borne ordinairement à l’emploi de quelques-uns de ces réactifs. Le traitement de beaucoup le plus usité consiste à faire agir successivement sur les fibres la solution iodée-iodurée (p. 43) et l’acide sulfurique de Vétillart (p. 70) : sous leur influence la cellulose se teint en bleu pur ou en violet-lie de vin, la lignose en jaune. Pour être certain de réussir, il faut se plier absolument au mode opératoire que nous avons donné à la page 70. Il faut ajouter aussi que l’action de l’acide ne se fait

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pas sentir sur toutes les fibres avec la même rapidité et que la coloration se fait parfois attendre un quart d’heure et plus. Après deux heures de contact avec l’acide, la fibre s’allère et se décolore. On fait aussi usage: 1“ du réactif de Schweitzer (p. 70) qui dissout la cellulose, gonfle les fibres partiellement lignifiées, mais est sans action sur celles qui le sont complètement ; 2° de la solution aqueuse de sulfate d’aniline qui colore les libres lignifiées en jaune foncé, et cette teinte s’accentue encore si on traite la préparation par l’acide sulfurique dilué (p. 72). Les fibres qui se colorent en bleu par fiode et l’acide sulfurique sont très longues, élastiques, elles supportent les lavages et sont éminemment propres à la confection de tissus servant à l’habillement ; les fibres lignifiées sont courtes, cassantes, ne peuvent se laver ; on les réserve pour la fabrication de tentures ou celle de toiles d’emballage.

Pour tirer parti des colorants, on doit les faire agir sur des fibres isolées, sur des filaments à l’état naturel et aussi sur des coupes transversales.

L’iode et l’acide sulfurique appliqués aux filaments entiers nous permettent de diviser les textiles qui nous intéressent en quatre groupes :

1° Filaments se colorant en bleu ou en violet Lin, coton, ramie.

2" — — vert Chanvre.

3° — — jaune Jute.

4® — présentant des parties vertes et jaunes.. Alfa.

Les filaments de la première section se distingueront entre eux par leur forme, leur longueur, l’état de leur extrémité, l’aspect de leur coupe transversale; mais, pour éviter les redites, énumérons plutôt les caractères de chacun de ces textiles.

Les fibres péricycliques du lin (fig. 8) sont nettement polyédriques et leur paroi fort épaisse laisse parfaitement distinguer ses stries d’hydratation (c). Leur corps présente parfois de légères nodosités et leurs terminaisons sont effilées, longuement coniques (or). Elles mesurent 4 cent, de longueur et 25 [A de largeur dans leur partie médiane. L’iode et l’acide sulfurique colorent la paroi en bleu et le contenu des fibres 7î07i hlamhies en jaune ; l’action, en se faisant sentir avec plus de force en certains points de la paroi, y cause l’apparition de taches cruciformes bleues, se détachant bien sur le fond par leur coloration plus intense. Le réactif de Schweitzer gonfle irrégulièrement, mais fortement, ces fibres, dans lesquelles le sulfate d’aniline indique un commencement de lignification.

Les poils qui constituent le coton (fig. 11) peuvent atteindre 5 cent, de longueur, tandis que leur diamètre transversal varie entre 11 et 37 p* pour cette raison que ces organismes possèdent une extrémité longuement conique, mais se distinguant de celle du lin par sa terminaison arrondie [a).

Leur corps {b) est contourné sur lui-même ; il ressemble à un ruban qui serait bordé par deux ourlets. L’explication de cette apparence est fournie par la coupe transversale (c) qui montre les filaments aplatis et recourbés sur les bords. L’iode et l’acide sulfurique colorent inégalement ces poils les uns en bleu, les autres en violet-lie de vin et font aussi apparaître quelques granules jaunes dans leur cavité. Le réactif cupro-ammoniacal gonfle, puis dissout ces poils en laissant un léger résidu qui est constitué par la cuticule.

La RAMIE est constituée par les fibres péricycliques du Bœhmena utilis (fig. 13) qui sont caractérisées par leurs formes très variables chez le même individu ; elles sont irrégulièrement polygonales et leur cavité fort inégale est beaucoup plus large que dans les deux espèces précédentes. Leur longueur considérable est comprise entre 8 et 22 cent. ; leur largeur varie peu : elle mesure en moyenne 15 [x, ce qui se comprend bien lorsqu’on connaît leurs terminaisons obtuses [a). L’iode et l’acide sulfurique les colorent en bleu ou en violet et font apparaître quelques granules jaunes dans leur intérieur. Le réactif de Scbweitzer les gonfle énormément et le sulfate d’aniline n’y indique pas de traces de lignification.

Les fibres péricycliques du chanvre (fig. 9) ont 2 cent, de longueur et de 10 à 28 [X de largeur. Leur contour est polyédrique, fort irrégulier ; il présente même parfois des angles rentrants (c). Leurs extrémités sont amincies, mais arrondies ou spatulées à la pointe [a). Leur cavité est souvent aplatie, arquée ou triangulaire. Vues de face, elles montrent toujours des stries parallèles au grand axe. Par l’action de l’iode et de l’acide sulfurique les filaments se colorent en vert ou en jaune sale, tandis que les cellules isolées peuvent se colorer en bleu pur, ce qui s’explique par la lignification de la lamelle mitoyenne qui a disparu de la surface des fibres mises en liberté par les dissociants. Les coupes transversales colorées [d) montrent la lamelle mitoyenne teinte de jaune-brun et le corps de la fibre de bleu ou de violet. Le réactif cupro-ammoniacal gonfle fortement ces éléments et les dissout partiellement. Le sulfate d’aniline leur donne une coloration plus ou moins intense.

Le JUTE (fig. 12) est fourni par les fibres libériennes des Corchorm olitorim^ c«'jU6z//«met/2^5cz^s(Tiliacées). Ces fibres sont très régulièrement polygonales (c). L’épaississement fort inégal de leur paroi qui fait varier considérablement la largeur de leur cavité est caractéristique [b). Leur longueur ne dépasse pas 4 mm. et leur largeur varie entre 10 et 30 ix. Elles se terminent par une pointe conique [a) souvent arrondie ou en pointe de sabre, mais qui est parfois fort irrégulière. Le sulfate d’aniline, l’iode et l’acide sulfurique les colorent fortement en jaune.

L’alfa (fig. 10), produit par le /curzcmvV??<7(Craminéesb est constitué

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par un mélange de fibres entièrement lignifiées et de fibres cellulosiques réunies par des lamelles mitoyennes lignifiées. Cette connaissance rend compte du mélange de vert et de jaune que Ton obtient lorsqu’on traite deb filaments entiers par l’iode et l’acide sulfurique. La longueur des fibres est voisine de 1 mm. b ; leur largeur ne dépasse pas 8 p-. Leur forme est à peu près polyédrique (c) ; leur paroi est fort épaisse et leur terminaison est longuement acuminée [a).

On fabrique avec les fibres végétales un certain nombre de tissus mixtes dans lesquels les fils de la trame ne sont point composés par la même matière que ceux de la chaîne. La marche à suivre dans ce cas est la même que celle que nous avons indiquée pour l’analyse d’un mélange de textiles végétaux et animaux.

Si l’on se trouvait en présence de fils mixtes, ce qui est rare du reste, on préparerait des coupes transversales de ces fils, et, les ayant colorées, on ferait sur elles le dénombrement exact des fibres de chaque sorte qui les composent. Un calcul simple donnerait ensuite la proportion en centièmes de chaque textile.