CARACTÈRES DISTINCTIFS DE L’ALBUMINE

comme contre-poison du sublimé, parce que le composé mercuriel qui résulte de leur combinaison est moins vénéneux.

Les sels de plomb, de cuivre sont aussi précipités par l’albumine du sang, ce qui doit être pris en considération dans les empoisonnements par ces métaux.

35. Caractères distinctifs de l’albumine de l’œuf et de la sérine ou albumine du sérum. — Tout fraîchement pondu, le blanc d’œuf est légèrement acide au tournesol, tandis que les liquides séreux (kystes ovariques, hydrocèle), et le sérum du sang sont alcalins ; de plus ces derniers liquides laissent fréquemment dégager des bulles d’acide carbonique au moment même de leur extraction, quand on les additionne d’acide acétique ; il n’est pas possible d’invoquer ici la putréfaction du liquide, mais bien la présence des bicarbonates alcalins, puisque ces liquides sont exempts de carbonate d’ammoniaque.

Le sérum du sang et les liquides séreux sont plus riches en matières salines que le blanc d’œuf. Les liquides séreux et le sérum du sang ne sont pas coagulés par l’éther, qui coagule partiellement le blanc d’œuf. Ce même blanc d’œuf, devenu légèrement alcalin (ammoniacal) par un commencement de décomposition putride, n’est plus coagulable par l’éther.

52 MATIÈRES ALBUMINOÏDES

L’albumine de l’œuf injectée dans les veines ou sous la peau passe bientôt dans l’urine, tandis que l’albumine du sérum injectée sous la peau ne se retrouve pas dans ce liquide. Le sérum ou le sang défibriné injecté directement dans le sang d’un lapin passe dans l’urine (CL Bernard).

La sérine ou albumine des liquides séreux ne peut pas être obtenue absolument pure, exempte de sels, par le procédé de M. Wurtz.

Ce sérum est d’ailleurs un liquide complexe que nous étudierons plus loin. Si l’on dissout un blanc d’œuf dans son poids d’eau distillée, de façon à avoir un liquide albumineux à peu près aussi riche en matière solide que le sérum du sang, et que l’on précipite cette solution par 4 à 5 fois son volume d’alcool à 90°, le précipité ne se redissout presque pas dans l’eau.

L’albumine du sérum du sang, précipitée par 4 à 5 fois son volume d’alcool à 90°, puis lavée à l’alcool, se redissout en assez grande proportion dans l’eau distillée. Par un séjour très-prolongé sous l’alcool concentré la sérine perd presque entièrement la faculté de se redissoudre dans l’eau distillée. La sérine séparée de ses solutions par l’acide azotique se redissout plus aisément dans l’eau que l’albumine de l’œuf obtenue dans les mêmes conditions.

La sérine possède un pouvoir rotatoire vers la gauche plus considérable que celui de l’albumine de l’œuf.

RECHERCHE DE L’ALBUMINE. 53

36. Recherche de l’albumine. — Les réactions qui caractérisent l’albumine ne sont pas toutes utilisées quand il s’agit de sa recherche. Mais il importe de connaître les conditions qui viennent compliquer les réactions, font prendre pour de l’albumine ce qui n’en est pas, et laissent méconnaître sa présence où elle existe réellement.

La recherche de l’albumine dans les divers liquides de l’économie est fondée sur les trois ordres de réactions suivantes :

1° L’albumine est coagulable dans des solutions légèrement acides et même neutres, quand la température du liquide est élevée vers 65° à 80°. L’addition au liquide d’un sel neutre, le sulfate de soude, favorise cette coagulation, et la rend plus parfaite.

2° L’albumine est précipitée de ses dissolutions par l’acide azotique (29).

3° L’albumine est précipitée de ses dissolutions par une solution d’acide phénique (45 et suiv.).

L’histoire de l’urine albumineuse, l’action de l’acide azotique sur ce liquide, les cas particuliers, les difficultés que l’on rencontre dans la recherche de l'albumine de l’urine sont décrits au chapitre Urines albumineuses .

37. Recherche de l’albumine au moyen de la chaleur. — Pour déceler la présence de l'albumine dans l’urine ou dans tout autre liquide de l’économie, assurez-vous d’abord que ce liquide

MATIÈRES ALBUMINOÏDES

est acide et rougit nettement le papier de tournesol. Pour atteindre ce but, ajoutez goutte à goutte une quantité suffisante d’acide acétique faible en agitant sans cesse le liquide, puis saturez -le de sulfate de soude cristallisé, et parfaitement pur. Cela fait, filtrez la liqueur, remplissez-en aux trois quarts un tube de verre, cliauffez-le sur la lampe à alcool dans la partie supérieure seulement {fig. 8) en tenant le

Fig. 8.

tube incliné. Vous pourrez tenir le tube par la partie inférieure, et le tourner sans cesse autour du même axe pour répartir bien également la chaleur à la surface du liquide. Gardez-vous de chauffer la partie du tube qui n’a pas le contact du liquide, vous la feriez bientôt éclater. Quand la température se sera élevée vers 00% le liquide deviendra opalescent, puis, la température s’élevant à 72° — 80°, le trouble sera plus manifeste, s’il y a de l’albumine. 11 n'est pas nécessaire de chauffer jusqu’à l’ébullition pour produire la coagulation de l’albumine,

RECHERCHE DE L’ALBUMINE

niais on est bien plus sûr d’avoir complété le coagulum quand un commencement d’ébullition se manifeste par des bulles de plus en plus grosses qui s'élèvent le long des parois du verre.

Le trouble produit par le coagulum est parfois très-faible, il tranche pourtant avec la couche sousjacente dont la température s’est très-peu élevée à cause de la faible conductibilité du liquide. Aussi faut-il prendre garde de mélanger les deux couches par une agitation trop brusque.

Dans d’autres cas, ce sont les plus fréquents, le trouble est plus complet, des flocons blancs se séparent et se déposent lentement; enfin, si l’albumine existe dans une proportion considérable, le coagulum se prend en une masse solide, et, si l’on chauffe le tube dans toute sa longueur, on peut, l’opération terminée, le retourner sans qu’il s’écoule une seule goutte de liquide.

L’emploi du sulfate de soude est inutile quand la proportion de l’albumine n’est pas trop faible, il suffit de rendre le liquide légèrement acide par l'acide acétique.

Si vous n’avez à votre disposition qu’une trèsfaible dose de liquide, employez un tube très-étroit, de quelques millimètres seulement de 'diamètre; l’opération réussira tout aussi bien.

38. Le trouble produit par la chaleur ne doit pas disparaître quand on ajoute à la liqueur encore chaude , goutte à goutte , de C acide acéticpie ou de

MATIÈRES ALBUMINOÏDES

oü

L'acide azotique. Une urine, par exemple, peut rougir légèrement le papier de tournesol, parce qu’elle est chargée d’acide carbonique, et, quoique dépourvue de toute trace d’albumine, se troubler dès que la chaleur agit sur elle. Dans ce cas, elle dépose du phosphate bibasique de chaux, parfois du carbonate de chaux que l’acide carbonique maintenait en dissolution. Au fur et à mesure du dégagement de l’acide carbonique en bulles visibles, le liquide se trouble. Yient-on à faire tomber à sa surface quelques gouttes d’acide acétique ou d’acide azotique faible, le liquide va s’éclaircir instantanément s’il ne renferme pas d’albumine, et si le trouble est le résultat unique de la présence du carbonate et du phosphate de chaux. Des bulles d’acide carbonique se dégageront si le liquide est encore chaud. L’acide chlorhydrique produit dans ce cas le même effet que l’acide acétique et l’acide azotique, et rend à l’urine toute sa transparence. Mais , si le trouble produit par la chaleur ne disparaît pas quand on ajoute à l'urine encore chaude 1 /20e de son volume cl'acide azotique , c'est quelle renferme de l'albumine.

Ce qui vient d’être dit pour le cas particulier et très-fréquent d’une urine albumineuse s’applique également à toutes les liqueurs albumineuses. Bien plus, quand les liquides séreux peu riches en albumine sont très-chargés de carbonate de soude (liquide céphalo-rachidien), la coagulation de Faibli-

RECHERCHE DE L’ALBUMINE

mine ne s’effectue pas par la chaleur seule, et, si l’on observe un léger trouble par l’action d’une température voisine de celle de l’ébullition, il est aisé de constater, après le refroidissement complet, que le dépôt blanchâtre que l’on peut isoler par repos et décantation (carbonate et phosphate calcaire) se dissout dans l’acide acétique faible. Ce qui précède prouve combien il est important d’aciduler tout d’abord le liquide par l’acide acétique, parce que cet acide sature l’alcali qui maintiendrait la matière albumineuse en dissolution même dans un liquide bouillant, et qu’il s’oppose en même temps à la précipitation des phosphates. — Si, au contraire, on chauffe jusqu’à l’ébullition un liquide séreux assez alcalin pour que l’albumine reste en dissolution, l’acide acétique versé goutte à goutte dans le liquide bouillant ou presque bouillant dissoudra immédiatement le trouble produit par le phosphate de chaux et le carbonate de chaux, et fera apparaître à sa place le précipité d’albumine coagulée.

39. Dosage de l’albumine. — Ce qui suit est applicable au blanc d'œuf dissous, au sérum du sang, aux divers liquides séreux, à l’urine albumineuse.

Trois méthodes principales servent au dosage des matières albumineuses : 1° l’emploi de la chaleur après acidification légère du liquide ; 2° l’emploi de l’alcool concentré ; 3° l’emploi d’une solution d’acide phénique.

Ce que j’ai dit précédemment de l’acide azotique

MATIÈRES ALBUMINOÏDES

montre qae cet acide ne peut pas servir au dosage de l’albumine, car le coaguïum albumineux, fut-il complet, ne pourrait pas être lavé sur le filtre avec de l’eau distillée sans se redissoudre en grande partie. D’autre part, l’albumine s’altère rapidement au contact de l’acide azotique un peu concentré (20).

On a proposé d apprécier la quantité d’albumine d’un liquide en le chauffant dans un tube à essai ; le coaguïum se rassemble peu à peu, et l’on juge approximativement de sa quantité par la hauteur du précipité. Mais la même quantité d’albumine pure ajoutée à des liquides salins ou à de l’urine de diverses densités, donne des résultats extrêmement différents. La nature et la quantité des matières organiques et des sels en dissolution, la couleur du liquide varient trop pour que l’on puisse chiffrer les résultats, lors même que l’on prend la précaution d’acidifier également ces liquides et de les laisser reposer pendant un temps toujours égal. L’opacité du coaguïum ne conduit pas à de meilleurs résultats. Ce sont là des approximations et non pas des mesures précises.

40. Dosage de l’albumine par l’action de la chaleur. — Au liquide albumineux ajoutez goutte à goutte de l’acide acétique faible jusqu’à ce qu’il ofire au papier de tournesol une réaction franchement acide; cela fait, fdtrez-le. Cette condition est de rigueur, surtout avec l’urine ; l’oublier, c’est

DOSAGE DE L’ALBUMINE

s’exposer à ajouter à la quantité réelle d’albumine les matières en suspension, les urates, des phosphates, etc., et, si le liquide était alcalin, à maintenir en solution, grâce à cet alcali, une quantité de matière albumineuse proportionnée à la quantité d’alcali libre.

Le liquide acidifié légèrement, pesez-en 10, 20, 50 ou 100 grammes de manière à avoir 2 à 5 décigrammes d’albumine sèche. Cette condition n'est pas rigoureuse, mais elle est commode pour la plus facile dessiccation du précipité. L’habitude de cette opération fait juger vite de la quantité de liquide qu’il est bon d'employer, car, en chauffant dans un tube de verre une partie du liquide, on obtient un trouble dont l’opacité plus ou moins grande sert de guide. S’il suffit de20 grammes du liquide pour avoir cette quantité d’albumine (4 décigr. environ), portez ce volume à 100 centimètres cubes en ajoutant 80 grammes d’eau. S’il fallait, au contraire, 35 grammes de liquide albumineux, ajoutez 65 grammes d’eau. Cette addition d’eau a pour but d’obtenir un coagulum très-divisé et facile à laver sur le filtre. Chauffez le liquide dans une capsule, sur une lampe à alcool, en remuant sans cesse avec une baguette de verre et maintenez 1 ébullition pendant une ou deux minutes. Le coagulum nage au milieu d’un liquide transparent ; pour obtenir ce résultat nettement, il faut quelquefois verser encore quelques gouttes d’acide acétique affaibli.

60 MATIÈRES ALBUMINOÏDES

Jetez le coagulum sur un petit filtre de papier de Suède, d’environ 5 centimètres de rayon, rincez la capsule avec de l’eau distillée que vous jetterez ensuite sur le précipité, lavez bien (1), et desséchez le filtre et son contenu dans une étuve chauffée à 100° et meme à 105°, tant que deux pesées consécutives ne vous donneront pas le même poids. Le précipité est très-hygroscopique, et, pendant sa pesée, il absorbe rapidement l’humidité et augmente de poids ; pour parer à cet inconvénient, pesez le filtre entre deux verres de montre appliqués l’un sur l’autre à l’aide d’une pince en laiton, après refroidissement sur l’acide sulfurique.

Du poids total (appareil de verre, pince et filtre chargé d’albumine) il vous faudra déduire le poids du filtre et celui de l’appareil avec sa pince pour avoir le poids de l’albumine. Le poids du filtre aura été apprécié dans les mêmes conditions de dessiccation,

41. On peut simplifier ce mode de procéder de la manière suivante : au lieu de prendre le poids du filtre, placez ce filtre vide sur l’un des plateaux de la balance, équilibrez-le avec un filtre ou du papier à filtre de même nature que vous mettrez sur l’autre plateau. Desséchez cette masse de papier à filtre à la même température que le filtre albuminifère, équilibrez exactement ce dernier filtre placé entre

(1) Dans beaucoup de cas un lavage ît l’alcool peut être nécessaire ; je le pratique presque toujours; le filtre imbibé d’alcool est plus rapidement desséché, et l’albumine est plus pure.

DOSAGE DE L’ALBUMINE. 61

les verres de montre avec des poids non marqués ; cela fait, enlevez le fdtre albuminifère, remplacez-le par le papier à fdtre desséché à la même température que lui, laissez refroidir le tout sur l’acide sulfurique comme quand il s’est, agi du fdtre à albumine, replacez l’appareil sur le plateau de la balance, enfin rétablissez l’équilibre détruit par des poids marqués qui exprimeront le poids de /’ albumine.

Il n’est guère possible avec les matières albumineuses de se servir de filtres doubles, parce que les lavages sont plus lents et que la séparation de ces filtres est souvent impossible à effectuer exactement.

42. En se coagulant, l’albumine entraîne avec elle quelques matières colorantes qui augmentent son poids, mais la proportion de ces substances étrangères est ordinairement assez faible. Elle retient surtout des sels, des phosphates de chaux et de magnésie plus particulièrement : on peut en tenir compte en incinérant le coagulum. Quand on opère avec un liquide peu concentré, acidulé par l’acide acétique, l’albumine se prend en flocons faciles à laver et à dépouiller des matières extractives ou salines qui l’accompagnent, et qu’il serait impossible de séparer d’une masse compacte comme le blanc d’œufs ouïes liquides séreux de l’organisme.

Les eaux mères de l’albumine coagulée et les eaux de lavage ne doivent pas être précipitables par l’acide azotique, ni coagulables par la chaleur après

Méhu. 4

MATIÈRES ALBUMINOÏDES

qu’on les a saturées de sulfate de soude. Si l’on n’avait pas obtenu ces résultats, c’est que l’opération aurait été mal dirigée, ou que l’albumine serait déjà en putréfaction.

43. Coagulée par la chaleur, l’albumine contient beaucoup moins de matières salines que l’albumine brute de l’œuf ou du sérum ; aussi, dans des expériences d’essai, où l’on aurait introduit dans un liquide un poids déterminé d’albumine brute, on ne saurait retrouver plus des 19/20 de ce poids en albumine coagulée et lavée (46).

L’albumine en présence du pus, et celle qui a subi un commencement de putréfaction n’est pas toujours complètement coagulable par la chaleur, tout en ayant conservé presque toutes les autres qualités de l’albumine. L’addition du sulfate de soude rend la coagulation beaucoup plus parfaite après addition d’une quantité d’acide acétique suffisante pour rendre la liqueur fortement acide. À l’aide de lavages à l’eau distillée, on enlève les dernières traces de sulfate de soude. L’incinération du produit ne doit donner qu’un résidu minéral insignifiant, si le lavage a été bien fait.

44. Dosage de l’albumine à l’aide de l’alcool.— On acidulé assez fortement le liquide albumineux par l’acide acétique, on ajoute 3 volumes d’alcool concentré, on chauffe jusqu’à l’ébullition naissante, au bain-marie, puis on recueille lepréci-

DOSAGE DE L’ALBUMINE

pi té sur un filtre. Ce procédé donne de bons résultats, mais il est coûteux et inapplicable à l’urine dans la plupart des cas (à cause des sels, de l’acide urique); il faut d’ailleurs acidifier assez fortement ie liquide pour maintenir les sels (les phosphates terreux) en dissolution. L’incinération du coagulum ferait d’ailleurs connaître la proportion des sels minéraux à déduire du poids de l’albumine. J’ai souvent appliqué cette méthode aux liquides séreux qui ont subi un commencement de putréfaction.

5 volumes d’alcool suffisent à précipiter toutes les matières albumineuses des liquides séreux, mais le précipité doit être lavé exclusivement avec de l'alcool à 90 p. 100, tant que l’évaporation du liquide filtré laisse un résidu appréciable.

45. Dosage de L albumine par l’acide phénique (1). — L’acide phénique coagule l’albumine sans se combiner avec elle. Pour utiliser cette propriété de l’acide phénique au dosage de l’albumine, il faut d’abord le dissoudre dans un mélange d’alcool et d’acide acétique. Voici la formule de la solution :

Acide phonique cristallisé 1 partie en poids.

Acide acétique du commerce I —

Alcool à 90° 2 —

10 centimètres cubes de cette solution se dissolvent

(1) Consultez l’article que j’ai publié in Archives générales de médecine, mars 1 8U9, sur ce procédé de dosage.

6i- MATIÈRES ALBUMINOÏDES.

sans trouble clans 100 centimètres cubes d’eau ou

de tout autre liquide non albumineux.

Pour procéder au dosage de l’albumine dans une urine, par exemple, rendez ce liquide légèrement acide à l’aide de quelques gouttelettes d’acide acétique, fdtrez-le et pesez-en 100 grammes. Yersez

centimètres cubes d’acide azotique, agitez, versez ensuite, à l’aide d’une pipette, 10 centimètres cubes de la solution titrée d’acide phénique. Agitez bien pour diviser le précipité floconneux d’albumine, recueillez-le sur un filtre de papier Berzelius. Le liquide s’écoule rapidement ; quand il ne restera plus ni liquide ni précipité à rassembler sur le filtre, laissez égoutter, puis lavez le filtre avec de l’eau phénique bouillante saturée d’acide phénique. Étalez le filtre pour le faire dessécher à l’étuve chauffée à 100° ou mieux encore à 105°. Le filtre sec, enfermez-le entre les deux verres de montre, laissez refroidir sur l'acide sulfurique, enfin pesez le tout.

Du poids total retranchez le poids de l’appareil (verres et pince) et celui du filtre vide et sec, vous aurez le poids de l’albumine. Vous pourrez vous dispenser de prendre le poids du filtre vide, en opérant comme il est dit § 41.

Il est avantageux d’avoir sur le filtre un poids d’albumine qui ne dépasse pas 1 / 2 gramme, pour rendre le lavage plus facile et plus parfait. Souvent il ne faut que 10 à 15 grammes de liquide albumineux , et, dans tous les cas, on porte le volume sur lequel.

DOSAGE DE L’ALBUMINE. 65

on opère à 100 centimètres cubes par addition d’eau distillée.

Le liquide qui s’écoule du filtre chargé d’albumine ne doit pas être coagulable par la chaleur, même après l’addition du sulfate de soude, ni précipitable par l’acide azotique, sans quoi le réactif aurait été employé en trop faible proportion par rapport n la quantité d’albumine. Il faudrait alors recommencer l’expérience sur une moindre quantité de liquide albumineux.

Ce procédé, appliqué au dosage de l’albumine dans l’urine, donne de très-bons résultats. Dans les conditions prescrites, la liqueur filtre si rapidement que l'on n’a pas à craindre qu’il se précipite de l’acide urique qui ajouterait son poids à celui de l’albumine. Un bien grand avantage du réactif, c’est d’être entièrement composé d’éléments volatils, par conséquent d’éviter toute surcharge due au réactif luimême.

La présence d’une quantité considérable de substances minérales dans les liquides albumineux (sérum, kystes, urines, ascite), ne gêne en rien l’application de ce procédé. Le sucre de diabète n’apporte également aucune entrave. Bien au contraire, quand les liquides albumineux sont très-chargés de sels, la solution phénique n’a pas besoin d’être aidée par l’acide azotique.

Le précipité albumineux obtenu avec la solution phénique se redissout un peu dans l’eau pure et

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dans l’eau acidulée par l’acide acétique : ces solutions sont précipitées par le sulfate de soude. C’est pourquoi le lavage se fait avec de l’eau boui lante chargée d'acide phénique, sans alcool ni acide acétique.

46. Le réactif phénique donne un précipité qui ne contient pas 1 p. 100 de cendres, tandis que l'albumine de l’œuf en donne 6 à 7 pour 100, et les liquides séreux de l’économie une quantité encore plus forte. On conçoit dès lors qu’en répétant ce procédé sur des poids connus d'une solution d’albumine brute d’une richesse déterminée à l’avance, on n’obtienne guère que 95 pour 100 environ du poids de l’albumine brute, puisque le précipité ne relient qu’une très-faible partie des sels minéraux de l’albumine.

47. Traces d’albumine décelées par la solution phénicjue. — La solution phénique peut faire reconnaître des traces d’albumine, dans des conditions où ni l’acide azotique, ni une température voisine de l’ébullition ne peuvent y parvenir. Dans ce but, prenez un verre très-conique (un verre à champagne), versez-y le liquide à examiner après l’avoir saturé de sulfate de soude pur, acidulez-le par l’acide acétique et fdtrez. Ce liquide doit être d’une transparence parfaite. Ajoutez encore 2 à 3 pour 1 00 d’acide azotique, puis 1/10 du volume total e la solution d’acide phénique, agitez vivement le