GiEMS.\, Munch. mediz. Woch., 1010, p

un mélange homogène; une coloration de 3 à 5 minutes suffit. On termine par un lavage à l'eau courante, on sèche et on examine à l'immersion.

D'après Billet*, on rend les résultats de la méthode de Giemsa plus constants en renforçant la solution, prête pour l'emploi, par quelques gouttes de bleu carbonate. Il est préférable de placer le bain colorant à 45-50°.

« La méthode de Romanowsky, dit Minchîn, est incontestablement la meilleure méthode pour étudier les caractères généraux des trypanosomes, spécialement quand elle est combinée avec la fixation osmique. » Toutes -les parties chromatiques paraissent notablement plus grosses qu'avec les méthodes cytologiques classiques. Minchin en donne de très bons exemples en figurant des trypan. fixés de la même façon et colorés les uns par l'Heidenhain (v. cidessous), les autres par le Romanowsky. En poussant graduellement la décoloration de ceux-ci, on a une tendance à se rapprocher de la structure révélée chez ceux-là. Le Romanowsky conduit à certaines illusions : comme flagelle et périplaste se colorent en rouge, on a une tendance à les considérer comme de même origine que le noyau qui se teint de la même façon. Or, la méthode de Twort (v. cidessous) colore flagelle et périplaste en vert, alors que les deux noyaux prennent une teinte rouge.

Giemsa s'est attaché à remédier à certains de ces inconvénients en traitant les préparations, maintenues constamment humides, comme nous l'avons indiqué ci-dessus (v. page 15). Après le lavage à l'eau courante, on colore de 1 à 12 heures avec la solution de Giemsa étendue (1 goutte pour 1 à 2 ce. d'eau) en ayant soin de renouveler le colorant après la première demi-heure. Giemsa recommande vivement que l'eau distillée à employer pour cette dilution ne soit pas acide.

Après coloration, passage à l'eau distillée, puis dans les bains :

a) Acétone 95 ce. -|- xylène 5 ce.

b) Acétone 70 ce. -f- xylène 30 ce.

c) Acétone 30 ce. -j- xylène 70 ce.

On y laisse les frottis des temps variables suivant le degré de différenciation désiré. On termine par un lavage au xylène et on monte à l'huile de cèdre.

On remarquera l'utilisation de l'acétone au lieu de l'alcool comme déshydratant.

Giemsa a donné ultérieurement ^ des figures montrant les excel-