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sont de l’ordre de 0,02, trop proches, par conséquent, des erreurs d'expérience pour mériter un crédit irréfutable.

Jover-LAVERGNE, lui, a comparé le métabolisme basal de femmes enceintes de garçons et de filles et a noté des variations au détriment de ces dernières, voisines de 6 à 7 p. 100. Malheureusement, ces résultats ne sont que des moyennes portant sur un très grand nombre de cas et ne permettent: pas des diagnostics individuels.

Enfin, les célèbres expériences de MANoÏLOFF, après des discussions passionnées et d'innombrables épreuves et contre-épreuves, amenèrent une déception à l’échelle de l'espoir qu’elles avaient fait naître tout d’abord :

Ce médecin russe proposa, en 1923, une méthode colorimétrique permettant de différencier du sang masculin de sang féminin. Peu après, appliquant la même technique à du sang de femme enceinte, il prétendit que sa sensibilité permettait même le diagnostic du sexe fœtal. :

Voici le protocole opératoire

On recueille, dans 10 cm* de sérum physiologique, 1 em° de sang prélevé, à jeun, par ponction veineuse au niveau du bras. Les globules sédimentent. On agite alors le tube de façon à obtenir une concentration en globules équivalente colorimétriquement à celle d’une émulsion de 1 cm° de sang normal dans 60 cm*° de sérum. À 3 cm“ de ce mélange, on ajoute, sans agiter, X gouttes d’une solution de papayotine à 1 p. 100, III gouttes de solution alcoolique de vert de méthyle à 1 p. 100, VI gouttes d’esculine à 1 p. 100, X gouttes de solution de permanganate de potasse à 1 p. 100. Après une agitation énergique, on acidifie par III gouttes d'une solution de 40 em* d’acide chlorhydrique concentré, dilué dans 60 cm° d’eau distillée, et on traite enfin par V gouttes de thiosinamine en solution aqueuse à 1 ou 2 p. 100.

Alors que les sangs d’homme sont complètement décolorés par ce traitement, ceux de femme restent jaune; si la femme est enceinte, un fœtus masculin provoque une teinte claire, foncée dans le cas contraire,

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Sur 80 sangs examinés et dont 44 ont été prélevés cinq ou six heures avant la naissance, et 8 une semaine avant, le diagnostic s’est confirmé 77 fois.

M'° GurewirsH, de Léningrad, apporte une statistique aussi séduisante : sur 23 grossesses à terme, 20 diagnostics exacts, soit 87,13 % des cas et, sur 37 femmes en travail, 33 résultats justes, soit 89,11 % des cas. En tout, il n’y eut que 4 erreurs pour 32 garçons et 3 erreurs pour 28 filles.

De son côté, KonsucHas, de Léningrad également, ne se trompe que 14 fois sur 69 cas, soit 72,7 % de succès, et R. Jerro, en Italie, 69,5 %.

Par contre, CASABONA, MACAGGI, MARGRETH et CANUTO obtiennent des résultats tout à fait discordants.

D'ailleurs, la première partie même de la découverte de MaANoïÏLoFF a été battue en brèche par quantité d'auteurs. GALWIALO, WLADIMIROW, WINOGRADOW, OPEL, ALSTENBERG, CALISTO, FERREIRA DE MIRA, POLONOVSKI et BOULANGER notamment, ont montré que la couleur définitive obtenue dépend uniquement de l’oxydation plus ou moins complète du produit colorant ajouté et que, si cette oxydation paraît constamment différente dans des sangs d’homme et de femme, il s’en faut de si peu, et les chiffres extrêmes obtenus dans les deux cas sont tels, qu'aucun diagnostic n’est possible si ce n’est exceptionnellement, lors d’un écart sensible avec les moyennes.

Par voie de conséquence, la discrimination du sexe fœtal par cette méthode serait donc encore plus hasardeuse.

Dans l’état actuel de la science, la chimie semble donc incapable de résoudre seule le problème et si, depuis les travaux de MANoïLOFF et les contrôles qui en découlèrent, elle est encore mise à contribution, son rôle plus modeste se borne désormais à permettre l’interprétation de réactions nouvelles, découvertes seulement au début de ce siècle, et dues à ces entités encore bien mystérieuses : les anticorps.

L'ALLERGIE

La découverte des réactions de défense d’un organisme contre les albumines étrangères, laissant entrevoir tout le bénéfice qu’on pouvait logiquement en attendre, captiva aussitôt toute l’attention des chercheurs pour diriger leurs efforts vers des méthodes d’une rare élégance.

Ne séduit-elle point, en effet, l'hypothèse que le testicule fœtal est un antigène pour la mère et que, par conséquent, le sérum des femmes enceintes de garçons doit contenir des anticorps aux extraits testiculaires ?

Deux sortes de méthodes s'offrent alors pour les rechercher : les unes tendent à les mettre en évidence, in vitro, dans le sang maternel; les autres essayent de provoquer, in vivo, des réactions anaphylactiques cutanées, par injection à la mère d’extrait de testicule.

In vitro

Le premier groupe de procédés a surtout tenté les expérimentateurs de langue allemande et, dès 1914, LEHMANN, modifiant la technique d’ABDERHALDEN qui ne tendait qu’au diagnostic global de grossesse en partant d’extraits placentaires, opérait de la façon suivante : on place dans un dialyseur un fragment de testicule et du sérum maternel. Après quinze à vingt heures d’étuve à 37°, si le sérum contient des anticorps « antitescule », une partie des albumines testiculaires seront transformées en peptones et acides aminés par désintégration, puis dialyseront. La réaction du biuret ou celle de la ninhydrine permettront alors de les mettre en évidence par l’obtention d’une couleur bleue caractéristique.

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En 1917, KRauss et SAUDEK confirmèrent les premiers résultats de LEHMANN.

LüTrGE et Vox MERTZ ont publié, en 1924, une technique une peu différente : les fragments testiculaires subissent une préparation spéciale et sont immergés dans du sérum de femme enceinte pendant vingt-quatre heures à 37°. Le liquide est alors repris par l'alcool à 96°, filtré et traité comme précédemment à la ninhydrine. Sur 61 cas, 100 % de succès.

En 1925, ALBANO et RAGUSA, préparant selon une méthode due à RÉBaAUDI et MENNITI des extraits d’ovaire et de testicule, obtinrent, par la coloration à la ninhydrine, 30 % de succès en les mettant au contact de sérum sanguin maternel, et 50 % avec du sang du cordon.

Remplaçant le sérum par l'urine, dans laquelle il pensait que les anticorps passaient, Rvosr Iron, de Hukuoka (Japon), exposa minutieusement, en 1940, une technique dont voici la traduction :

«1° Préparation de la substance albumineuse testiculaire. — Des testicules de lapins sont libérés, autant que possible, du sang, de la graisse et du tissu conjonctif, puis broyés. On fait bouillir cette purée vingt minutes dans de l’eau distillée de pH 4,7 et on recueille le liquide. Recommencer ce traitement aussi souvent qu’il le faut pour obtenir une réaction négative à la ninhydrine dans le liquide. Le nettoyage rapide des précipités de graisses et de lipoïdes se fait par un lavage à l’acétone puis à l’acétone-éther à parties égales, enfin à l’éther. Ensuite sécher.

« 2° Préparation de la solution d'anticorps. — 30 cm* de l'urine de la mère sont filtrés, neutralisés et additionnés de 30 cm° d’acétone. Agiter et centrifuger. Dissoudre le précipité dans 15 cm* de sérum physiologique avec 2 cm d’une solution tampon de bore à N/2 d’un pH à 7,5.

« 3° Méthode d'expérience. — 7 cm* de la solution d’anticorps sont placés dans un tube à essais et on ajoute 5 mg.

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de substance albumineuse testiculaire. Le tube, fermé par du caoutchouc, est gardé quarante-cinq heures dans une étuve à 37°. On filtre alors le liquide et, à 3 cm“ de celui-ci, on ajoute 10 cm* d’eau distillée. Il s’agit de déterminer alors les amino-acides libres dans cette solution.

« 4° Méthode de détermination des amino-acides libres. — On emploie la méthode de Florkin : à 3 cm* de la solution à examiner, on ajoute 3 cm* d’une solution tampon de bore à N/4 d’un pH de 8,3, et 2 cm*° d’une solution de B-naphtoquinone sulfatée sodique à 0,5. Après vingt heures de chambre noire, on y ajoute encore 2 cm* d’une solution de formaline pour décolorer, et 2 cm* d’une solution à N/10 de thiosulfate de soude. Cinq minutes plus tard, on compare au photomètre, à l’aide du filtre S 47, les éléments aminoazotés de l’urine traitée par l'extrait testiculaire et les éléments de la même urine non traitée.

«5° Résultats. — Dans l’urine de femme enceinte d’une fille, il n’y a aucun écart sensible entre les deux valeurs. Avant la naissance d’un garçon, au contraire, la différence très nette confirme l'hypothèse de l’existence, dans l’urine maternelle, d’un ferment protéolytique lysant l’albumine testiculaire en amino-acides. »

Nous reproduisons ci-contre le tableau des quinze cas publiés par Irox (tableau IT).

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