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cultures aussi jeunes que possible et le plus virulentes possible, il les desséchait dans le vide et les mettait à l’abri dela lumière. L’addition du moindre antiseptique altérait les propriétés immunisantes de la nouvelle tuberculine. On était sûr d’avoir séparé le liquide ayant la valeur voulue, quand, après centrifugation, il formait la moitié du liquide mis primitivement dans l'appareil.

Le liquide était conservé dans la glycérine et était ainsi livré au public.

L'opération, en raison des dangers que pouvait entraîner la fabrication, était faite en grand, dans une usine spéciale.

Koch administrait son nouveau liquide sous forme d’injections sous-cutanées, mais à des doses bien inférieures. Le taux initial n'était plus que de 1/500 de milligramme, la préparation contenant 10 milligrammes detuberculine pour chaque centimètre cube de la solution, et, pour cela.il l’étendait d’une quantité suffisante de solution physiologique de chlorure de sodium, afin d’amener son liquide au titre voulu.

Un peu plus tard, Koch modifiait encore son procédé, et donnait alors une nouvelle méthode de fabrication, qu'il disait être parfaite et non susceptible d'améliorations.

Il desséchait des cultures pures, virulentes de bacilles, les broyait dans un mortier, les mêlait à l’eau distillée et centrifugeait le tout. La couche supérieure liquide décantée, le sédiment. était séché, puis, trituré de nouveau dans un mortier ; après avoir rajouté de l’eau distillée, on remettait le mélange dans le centrifugeur. Puis on recommencçait l’opération,un nombre de fois suffisant pour obtenir un liquide parfaitement clair, ce qu’on atteignait quand tout le sédiment était broyé et dissous. On avait, en dernier lieu, transformé toute une masse de cultures bacillaires en une série de liqueurs de plus en plus liquides et transparentes.

Et Koch appelait la première tuberculine obtenue après la première opération, la tuberculine TO, la dernière,la tuberculine TR. La première était trouble, épaisse, contenait encore de nombreux sédiments solides, tandis que la dernière était parfaitement fluide et limpide. Entre les deux, il avait produit toute une série de liqueurs intermédiaires.

Quoi qu'en ait dit Koch, cette nouvelle tuberculine était loin

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d’être parfaite: elle fut vraiment critiquée dans sa fabrication par Letulle (1), Péron (2), certains auteurs allemands.

D'abord, la méthode de préparation semblait un peu empirique, et n'avait pas de règles suffisamment fixes. Il avait été reconnu que l'absence de tout liquide antiseptique permettait à la liqueur de s’altérer facilement Elle provoqua des abcès de l'infection généralisée, et l'examen bactériologique permit d'y retrouver diverses bactéries, et même des streptocoques et des pneumocoques.

Pour nous, nous nous sommes servi, dans le cours de nos propres expériences, de la substance préparée à l’Institut Pasteur et qui nous a été obligeamment fournie par M. Martin. C’est un liquide tout à faittransparent, brunâtre, sirupeux, possédant l’odeur très affaiblie de fleurs particulière aux cultures du bacille de Koch.

La solution était au millième ; elle était renfermée dans des petits tubes en verre effilés aux deux extrémités et scellés à la lampe, ce qui en rendait la conservation parfaite. Nous rejetions les tubes dont le contenu paraissait un peu louche ou floconneux, pour ne nous servir que de ceux qui étaient parfaitement transparents. Chaque tube contenait exactement un centimètre cube d’une s0lution au millième.

Nous l’étendions, au moment de son emploi, de dix fois son volume d'eau bouillie et distillée, et nous faisions le mélange dans l’'éprouvette de l'hématimètre, soigneusement stérilisée à l’eau bouillante.

Pour faire les injections, nous employions la seringue de Lüer, entièrement en verre, avec piston en verre, après l’avoir également stérilisée, et nous injections ainsi, dans la paroi de l'enfant, une solution de tuberculine au dix-millième.

Grâce à ces précautions, nous n'avons eu aucun abcès dans les 74 injections que nous avons pratiquées.

Quoi qu'il en soit, et malgré les déceptions éprouvées, il n’en restait pas moins acquis un fait considérable : Les travaux de Koch avaient conduit à la découverte d’une substance spéciale qui

(1) Leruice, La nouvelle tuberculine, 1897.

(2) PErow, In Semaine médicale, 1897.