‹ Contribution à l'étude de la fermentation β-hydroxybutyriqueChapitre 10 sur 36 · PAR CM D'ÉMULSION · texte numérisé non relu

PAR CM D'ÉMULSION

Émulsion initiale. .

Emulsion après 4 h.

Emulision après 4 h.

d'examiner. Négatifs aussi les essais que nous avons pu faire en substituant avec le bacille M lacétylacétate à l’acétaldéhyde.

On sait que la cozymaëe est le coferment nécessaire de cette dismutation. Sa présence en quantités aussi importantes que dans la levure a élé signalée dans le Streptococcus lactis, le B. caser, le B. propionicus, “alors s qu’elle semble être absente dans le B. aerogenes, le Penicillium (32).

Elle se dose d’après le test suivant : on prend de la levure de bière séchée qu’on lave plusieurs fois avec de l’eau. Si à cette levure on ajoute du glucose, de l’hexose diphosphate et de la cozymase, la quantité de gaz carbonique dégagé est proportionnelle à la quantité de cozymase ajoutée. Pour que ces mesures aient un sens et soient reproductibles dans le temps, il faut spécifier les condilions et préparer la levure sèche toujours dans les mêmes conditions (32). En ce qui nous concerne, nous voulons simplement voir si la cozymase est présente dans nos bacilles et avoir un ordre de grandeur. Nous avons comparé la teneur de nos bacilles à la teneur d’une levure de bière de la brasserie Demory. Nous avons utilisé la technique simplifiée de Ohlmeyer (33).

On prépare d’abord une émulsion de levure ou de bacilles qu’on porte rapidement à l’ébullition et que l’on refroïdit aussitôt après.

On centrifuge. On lue ainsi les enzymes et on libère la cozvmase à doser. Dans chacune des cupules de Warburg on place 1° 1c.c. d’émulsion de levure séchée (2 g. de levure sèche Demory lavés huit fois avec 80 c.c. d’eau et émulsionnés finalement avee 80 c.c.) ; 2° 0,2 c.c. du tampon de phosphate M/20, pi 6,5 contenant par centimètre cube 25 mg. de glucose, 20 me. de phosphore sous forme d’hexosediphosphate et 40 y de Magnésium sous forme de chlorure ; 3° 0,4 c.c. de liqueur à analvser.

On place les cupules dans le {thermostat à 31° sous atmosphère d’azole à 10 p. 100 de CO, et on mesure les dégagements du gaz

(32) K. Myneäer, Era. der Eng., 1933, 2, 139. (33) OurmEven, Bioch. Z.: 1936; 287, 216.

Page 1