OBTENTION DES BACTÉRIES

Pour toutes ces recherches, nous avons utilisé la souche M. EL. du laboratoire des Fermentations qui était entretenue sur bouillon de haricot gélosé. Nous utilisons des cultures soit sur moût de bière, soit sur bouillon de haricots, milieux gélosés à 2 p. 100, et répandus dans des boîtes de Nicole de 25 x 30, à raison de 600 c.c. par boîte ou dans des boîtes de Petri de 9 cm. de diamètre à raison de 50 c.c. par boîte.

Le moût de bière était préparé d’après Lemoigne (50) : 2 ke. de farine de malt sont versés dans 10 litres d’eau à 45-48°. Cette température est maintenue une demi-heure puis élevée progres-

(43) NeuBERG et ARENSIEIN, Bioch. Z., 1921, 117, 269. (44) Fromaceor et Tarum, Bioch. Z., 1933, 267, 360.

(45) Puecps, JOHNSON, PETERSON, Bioch. J., 1939, 33, 1606. (46) Ausez, C. R., 1921, 173, 1493.

(47) Ausez, C. R., 1923, 176, 332.

(48) L. F. Hewir, Bioch. J., 1932, 26, 208-217.

(49) VirTanEN, Hopp. Seyl. Z., 1924, 138, 136-143. COMTE, Cris Riou

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sivement à 70° en trente minutes. On la laisse stationnaire pendant une demi-heure. Durant toute l’opération, on brasse conslamment et on vérifie avec l’iode que la saccharification est termince. Après filtration, le moût est amené à 10 litres avec les eaux de lavage. On ajoute 1,5 g. d’urée par litre.

Le bouillon de haricots se prépare à raison de 100 g. de haricots par litre. On y ajoute, pour ces quantités, 10 g. de peptone, 80 g de saccharose. Une des principales difficultés de cette étude a été d'obtenir des cultures à développement constant. Les résultats sont certes meilleurs sur bouillon de haricots mais on obtient parfois une récolte donnant facilement avec de l’eau une émulsion qui est difficile à centrifuger.

Sur moût de bière on oblient une récolte d’aspect rugueux qu'il faut agiter avec des billes de verre et de l’eau pendant un quart d'heure pour avoir une émulsion homogène qui se centrifuge bien. d

Mais, dans ce dernier cas, la masse des bactéries récoltées est beaucoup plus inconstante. Le bacille M ne se prête pas à des repiquages fréquents sur moût de bière. Le procédé qui nous a donné les meilleurs résultats a été le suivant : on part d’une souche vieille de plusieurs mois sur bouillon de haricots, qui, par conséquent, a complètement sporulé ; on la repique une fois sur un tube de moût gélosé qui, plusieurs jours après, nous servira à ensemencer nos boîtes.