PRÉPARATION DE L'ACÉTYLACÉTATE DE POTASSIUM

La solution d’acétylacétate est préparée d’après Friedmann (51). On part de l’acétylacétate d’éthyle technique du commerce.

6 g. de potasse caustique sont dissous dans 200 c. c. d’eau, on ajoute 13 g. d’acétylacétate d’éthyle, on agite, on laisse une nuit. La liqueur est alors concentrée jusqu'à 100 c.e. sous le vide. pour éliminer l'alcool et l’acélone, en ayant soin que la température du bain entourant le ballon à distüller ne s'élève pas au-dessus de 37°, On vérifie la neutralité.

Cette solution se conserve des semaines à la glacière. Il est à remarquer d’ailleurs que la présence d’acétone qui peut se produire par décarboxylalion spontanée ne gènera pas nos expériences, car nous employons toujours un excès de solution et l’acétone elle-même ne gêne pas.

CARACTÉRISATION DES ACIDES LACTIQUE ET B-HYDROXYBUTYRIQUE.

L'acide lactique et Pacide B-hydroxybutyrique sont deux acides non volalls de propriétés voisines, difficilement séparables, même

(How ct use:

par leurs sels. La caractérisation de l’acide $-hydroxybutyrique s effectue facilement en le transformant en acétone ou en acide crotonique. L’acide lactique n’est pas seul à donner de l’aldéhyde par oxydation permanganique et sa meilleure identification repose sur l'isolement de son sel de zinc.

Pour séparer ces deux acides et les caractériser ensuite, Friedmann (52) uulise la formation d’éther méthylique. Celui de l’acide 8-hydroxybutyrique bout à 67-69° sous 63 mm. et celui de l'acide lactique vers 40-44° sous 9 mm. Les deux éthers sont done facilement séparables par distillation fractionnée. Cet auteur méthylait à l’aide de diazométhane. Nous avons préparé ce corps par action de la nitrosomethylurée sur la soude (53). En cherchant à méthyler l'acide lactique, nous nous sommes aperçu que le rendement de cette réaction n’était que de 30 p. 100 et il est bien certain que toute racémisation n’est pas exclue.

Vu la petite quantité d’acide dont nous disposions, nous avons été obligé de renoncer à cette méthode.

Par chauffage, l'acide G-hydroxybutyrique se transforme en acide crotonique (54) tandis que l’acide lactique donne naissance entre 180 et 250° à des di- ou trilactides à parür desquels on régénère facilement l’acide primitif par hydrolyse de douze heures à 100°. (55).

Par simple chauffage, il est donc possible de séparer l'acide lactique d’un mélange contenant de l’acide B-hydroxybutyrique.

100 g. de bacilles M (poids frais), récoltés d’une culture de vingt-trois heures sur 8 boîtes de Nicole contenant du bouillon de haricots gélosé à 80 g. de glucose par litre, sont émulsionnés avec 260 c. c. d’eau, 300 c. c. de CIK à 0,9 p. 100, 300 c. c. de bicarbonate de sodium à 5 p. 100. 100 c.c. acétylacétate 0,940 M et 40 c.c. de glucose à 20 p. 100. 5

On laisse incuber en agitant ce mélange pendant sept heures à 31° sous atmosphère d'azote à 10 p. 140 de CO,

L’extraction des acides organiques formés s'effectue suivant une technique classique. Le liquide séparé des bacilles par centrifugation est concentré sous pression réduite à petit volume. On ajoute de l’acide sulfurique de manière à maintenir le pH cons-. tamment à la neutralité. Le résidu sirupeux est acidulé jusqu’à réaction acide au rouge Congo avec de l'acide phosphorique (1 partie d’acide phosphorique de densité 1,7, 2? parties d’eau). On ajoute du sulfate de sodium sec de manière à constituer une pâte friable, que l’on extrait à l’éther pendant quarante-huit heures

(H2) Loc cit. un036:

(53) Organic Synthèses XV, p. 48 et XV, p. 3. (54) Visricenus, Zeitschr. Chim., 1869, 326.

(55) Juxcrceicx. et Goncor, C. R., 1905, 440, 502.

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dans un appareil Soxhlet. On chasse l’éther, le résidu est redissous dans 100 c.c. d’eau, on y ajoute un peu de noir animal, on filtre et on complète le filtrat avec les eaux de lavage à 200 c. c.

Par des méthodes que nous exposerons plus loin, nous avons trouvé que ce filtrat contenait :

4,2 g. acide B-hydroxybutyrique.