Méthode de PÉGArILAC

Cette méthode est fréquemment employée aux Pays-Bas.

Elle est basée sur la formation de gaz dans un milieu spécial constitué par du tanin, de la peptone, du lactose et du violet de gentiane.

A 1 litre d’eau stérilisée, on ajoute :

50 gr. de noix de galle ; On maintient la cuisson pendant uné 10 gr. de peptone !/ heure environ jusqu'à dissolution.

On neutralise à la lessive de soude en présence de phénolphtaleine (rose faible), on filtre et on ajoute 4 cm* de solution à 1 % de violet de gentiane. Avec ce liquide on remplit des tubes, on porte à l’autoclave pendant 13 minutes sous une atmosphère.

Pour déceler la formation de gaz, on emploie soit le tube ordinaire de fermentation avec bras ouverts, soit de préférence le tube DurHam (petite éprouvette renversée et plongée dans le bouillon).

On prépare des dilutions :

19 - Pour le lait de qualité, de marque et le lait stérilisé :

PEL 10/1100 de 6m?

Pour le lait cru : 1/1.000 cc.

On garnit 2 tubes de chaque dilution et après au moins 48 heures d’incubation à 379 on détermine jusqu'à quel degré de dilution on observe encore un dégagement de gaz.