Méthode de ZAPATÉRO
NÉrI et SIMONETTI proposent une technique basée sur la fermentation du lactose. |
ZAPATÉRO (89) cherche une méthode plus élective afin de fonder le titre colorimétrique du lait sur le colibacille du type fécal exclusivement ; elle est basée sur la fermentation de la dulcite en eau peptonée, mais la dulcite coûte très cher, on recherche le minimum de ce qu'il faut employer, soit 5 mgr. par 1 cc.
Préparation des milieux :
a) Extrait de viande Liebig 10,0 PÉDLONOE ae AR 10,0 | Dissolution à chaud NACRE PO À, 0 ( puis on mélange.
A Ce 1.000 )
On neutralise au CO* NA? N/10 (le tournesol suffit pour vérifier la réaction), on filtre, on ajoute 5 cc. d’une solution à 1100 de rouge de phénol dans le carbonate de sodium N/10, on complète à 1 litre. On stérilise à l’autoclave.
b) Solution de dulcite 5 mgr. par 1 cc., on stérilise.
Mode opératoire. La veille des examens.
On prend des tubes à hémolyse (100X10 mm.), on y place 1 c:. de solution de bouillon, 1 cc. de dulcite ; on mélange en roulant le tube ; on porte à l’étuve à 379 jusqu’au lendemain. Le milieu doit être parfaitement limpide et teinté de rouge.
On prépare 10 dilutions de lait dans des solutions physiologiques 1.10, 1 20 ; 1/50 ; 1/1005 1,200 ; 1/500 ; 1/1.000 ; 1,2.000 ; 1/5.000 ; 1/10.000.
12 tubes à hémolyse.