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Les résultats obtenus dans les tableaux ci-dessus, peuvent être interprétés de la façon suivante :

Examen organoleptique. — La couleur, la consistance, l’odeur et la saveur des miels sont particulières à chaque région et dépendent des plantes sur lesquelles vont butiner les abeilles. G’est ainsi que les miels de Bretagne et des Landes qui proviennent du nectar des fleurs de bruyère et de sarrazin sont marrons, parfois rouges ; les miels du Gâtinais, de Seine-et-Oise, récoltés sur des fleurs de sainfoin, de mélilot, sent blancs ou légèrement jaunes.

L’odeur de ces mêmes plantes se retrouve dans le miel et, de cette dernière particularité, jointe à la saveur propre à chaque miel, dépendent souvent les variétés commerciales.

Examen microscopique. — L’examen microscopique nous a révélé la présence d’un peu de cire (miels de Bretagne et des Landes surtout) et de pollen provenant des fleurs visitées par les abeilles.

Grâce à ce pollen aux formes multiples, nous avons pu constater que les échantillons n°s 32, 33, 34, 3.3, 36, 37, renfermaient du pollen de sainfoin, de mélilot, d’acacia. Les 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23 du pollen de labiées ; les n®® 1, 2, 3, 4, 5 du pollen de bruyère, de trèfle ; les n®® 38, 39, 40, du pollen de tilleul, de labiées, de mélilot.

Examen saccliarimétrique. — Déviations saccharimétriques. — Les déviations des miels étudiés ont été

faites au tube de 2 dcm. et à une température qui a été notée. Pour tous les échantillons examinés, la déviation avant inversion a été lévogyre et a varié :

Pour les miels de Bretagne : avant inversion entre

— 8®,3 et — t2®4 et après inversion entre — 8“,9 et

Pour les miels des Landes : avant inversion entre — 8»,3 et — 16»,4 et après inversion entre 8»,8 et 17»,6. Pour les miels des Gévennes : avant inversion, entre

— 3»,9 et — 11»,3 et après inversion entre —: 7»,5 et

Pour les miels des Alpes : avant inversion, entre — 0»,3 et — 7»,8 et après inversion entre — 9» et — 12»,5.

Sucres réducteurs avant inversion. — La teneur oscille entre 67 »/o et 78 »/„, avec une moyenne de 70 »/o.

Saccharose. — La teneur moyenne varie pour les miels de Bretagne entre 0 gr. 22 et 1 gr. 17. Le n» 11 n’en contenait pas.

Pour les miels des Landes, entre 0 gr. 42 et 1 gr. 99. Pour les miels du Gâtinais entre 1 gr. 12 et 7 gr. 88. Et pour les miels des Alpes entre 1 gr. 52 et 11 gr. 76.

Examen chimique. — Azote total et matières protéiques. — Nous avons dosé l’azote total sur tous les miels examinés, après séparation du pollen. Celui-ci, en effet, contient de petites quantités de matières azotées que nous avons évalué sur du pollen de conifère (cèdre, du Liban) et sur les spores du lycopode (lycopodium clavatum). Nous avons trouvé, pour lé pollen du cèdre une moyenne de 1,68 »/„ d’azote et pour les spores du lycopode 1,72 °j

Les quantités d’azote des miels varient avec leur origine :

C’est ainsi que pour les miels de Bretagne, on trouve une moyenne de 0 gr. 20 °/o d’azote et pour les miels du Gâtinais, de Seine-et-Oise, une teneur de 0 gr. 04 “/q.

Nous donnons dans le tableau suivant les résultats obtenus sur certains miels : en matières albuminoïdes coagulables par la chaleur en serine et en globuline.

On voit que : 1) en transformant l’azôtè total en matières albuminoïdes, et cela en multipliant le poids d’azote par le coefficient 6,36, on a une légère différence

due probablement aux matières albuminoïdes de transformation (albuminoses et peptones ?).

2) que les quantités d’albumine (sérine) et de globuline sont variables ; tantôt, la sérine est en excès par rapport à la globuline, tantôt aussi, c’est le contraire.

Dextrine. — Nous avons trouvé de la dextrine dans tous les miels examinés et en plus fortes proportions dans les miels des Landes : 1 gr. 04 “/o à 1 gr. 99 ;

elle ne se colore pas au contact de la liqueur iodo indurée.

Cendres. — Le poids de cendres trouvé varie, suivant l’origine des miels et leur mode d’extraction. Toutefois, pour un miel normal, ce poids ne dépasse pas 0,40 “/g.

Les miels blancs n®® 30, 31, 33, 35, etc., nous ont donné des résultats variant entre 0 gr. 01 “/o et 0 gr- 08 %•

Les miels blonds n°® 17. 18^ 19, 38... etc., entre 0,07 et 0,32 et les miels roux qui sont ordinairement d’extraction grossière, entre 0,17 et 0,40 “/o-

Dans les cendres des miels étudiés au point de vue qualitatif, nous avons trouvé :

1) Des cendres alcalines au tournesol et à la phtaléine de phénol.

2) Des sulfates, des phosphates, des chlorures, du calcium et du sodium.

3) Dans certains cas des nitrates (n®® 4 et 40) et du fer (no^ 1, 2, 6, 7, 12, 13, 13, 39).

Nous avons fait l’examen des sulfates, phosphates, du calcium, du fer et des nitrates, directement sur les cendtes. Dans le cas de présence du fer, les cendres étaient jaunes, parfois vertes.

Chlorures. — Nous avons recherché les chlorures en

-retraitant le charbon refroidi et pulvérisé par de l’eau. Le précipité donné par l’azotate d’argent en présence d’acide azotique n’est pas visible, aussi nous avons eu recours au réactif de M. A. Villiers (1) fondé sur l’action du chlore sur une solution d’aniline et d’ortholuidine.

Mode opératoire. —Nôus avons ajouté à 10 cc. de solution de chlorure provenant du charbon de 10 gr. de naiel : 5 cc. d’un mélange à volumes égaux d’acide sulfurique et d’eau et 10 cc. d’une solution saturée de permanganate de potasse ; le tout contenu dans le ballon d’un petit appareil à distiller. Nous avons chauffé doucement en recueillant le gaz dans 5 cc. du réactif contenu dans un tube à essai plongeant dans l’eau froide. Nous avons obtenu des teintes, variant du rose faible au rouge, teintes correspondant à 0,001 de HCl (2).

Dosage des phosphates. — Pour les doser nous avons charbonné 10 gr. de miel dans un creuset couvert, et à aussi basse température que possible. Après refroidissement, nous avons pulvérisé la masse obtenue, nous l’avons arrosée avec un lait de chaux contenant environ 0 gr. 05 de chaux (CaO), évaporé à sec et calciné. Nous avons repris le résidu par 20 cc. d’eau, contenant 3 gouttes d’acide azotique, filtré et titré au nitrate d’urane.

Les analyses ainsi conduites sur les n®® 5, 6, 7, 15, 27, 35, 38, 39, 40, 44, 48, 49, 50, nous ont donné des résultats variant entre 0,01 et 0,02 ®/o exprimés en P^O®.

(1) Prés, du réactif : Sol. aq. saturée d’aniline incolore. 100 cc.

— — orthotoluidine. 20 cc.

— -Ac. acétique crist. 30 cc.

(2) labl. d’anlyse quai. A. Villiers, 4' éd. (p. 147).

Eau. — La quantité d’eau dépasse rarement 24 On peut donc prendre une teneur de 25 “/o comme un maximum pour des miels naturels.

AcmiTÉ. — L’acidité exprimée en acide formique est faible et reste entre 0 gr. 03 et 0,13 °/o. Pour certains miels des Landes, nous avons trouvé une teneur un peu supérieure, 0,10 % à 0,21 ®/„.

b. Examen biologique.

Nous avons vu (page 13) que le saccharose du nectar est transformé dans le jabot de l’abeille en sucre interverti, grâce à un ferment spécial nommé invertine. Ce ferment, ainsi que le ferment amylolitique de Pabeille se retrouve dans le miel ainsi que nous allons le voir.

Déjà Dubrunfaut, constatait qu’après un certain temps, le saccharose disparaissait dans le miel.

En 1910, Auzinger (1) constata, dans les miels qu’il examina la présence d’amylase et de catalase et l’absence de peroxydases.

Nous avons repris cette question des ferments du miel et dans ce chapitre, nous caractériserons la présence de l’amylase, de l’invertine et de la catalase dans les miels français. Nous donnons les principales propriétés de ces ferments et après avoir déterminé les conditions optimum d’acidité, nous indiquons la méthode pour les rechercher et les doser dans les miels, et nous donnons les résultats de nos analyses dans un tableau placé à la fin.

(1) Zeits. f., Unlersuchung der Nahrungs und genusmillel, 1910, p. 6S et

Isolement des ferments. — Pour isoler les ferments du miel, différentes méthodes peuvent être employées.

C’est ainsi que l’on pourrait produire dans le miel mis en solution un précipité de phosphate de chaux, qui en se précipitant entraînerait par un véritable collage les diastases présentes (méthode Cohnheim). Mais étant donné la faible quantité de ferments dans le produit examiné, nous n’avons pas obtenu d’aussi bons résultats qu’avec la méthode suivante basée sur la précipitation des ferments par l’alcool ;

On dissout le miel dans le moins d’eau possible (quelques centimètres cubes), en s’aidant au besoin de la douce température d’un bain-marie. On verse ensuite goutte à goutte le miel ainsi fluidifié dans dix fois son poids d’alcool absolu. On précipite ainsi les ferments, les matières albuminoïdes et un peu de sucre. On centrifuge et on décante ensuite le liquide clair surnageant (le précipité adhérant généralement aux parois du vase). On reprend par 10 cc. d’eau distillée et la solution trouble obtenue est filtrée, pour séparer les matières albuminoïdes insolubles dans l’eau, le pollen. . ., etc. On rince finalement le filtre avec un peu d’eau distillée. On a ainsi une solution limpide de ferment.

Propriétés des ferments obtenus. — Si on réduit la solution aqueuse de ferments jusqu’à un volume de quelques centimètres cubes, qu’on reprécipite ces ferments en versant la solution concentrée dans 100 cc. d’alcool absolu, on obtient un précipité, présentant les caractères d’une poudre blanche, sans forme cristalline quand on l’examine au microscope. Si on décante à

nouveau l’alcool et si on reprend^par quelques centimètres cubes d’eau le précipité adhérant aux parois dii tube à centrifuger, on constate qu’il se dissout immédiatement.

Nous avons ensuite recherché à quels ferments nous avions à faire.

a) Recherche de l’amylase. — Nous avons ajouté à 100 ec. d’une solution de ferment (provenant de 10 gr. de miel), 1 cc. d’empois d’amidon à l^ (1). Nous avons prélevé 1 cc. du mélange pour y verser une goutte de solution iodo-iodurée (2) ; nous avons eu une solution bleue tenant en suspension de fines granulations de grains d’amidon gonflés. Nous avons alors mis la solution à étudier dans une étuve réglée à 50-60“. Après cinq minutes, en répétant l’essai précédent avec la liqueur d iode, nous avons encore obtenu une coloration bleue, mais une disparition des grains d’amidon. Enfin, en répétant ces essais, toutes les cinq minutes, il s’est formé toute une série de teintes : violet, lie de vin, rose, acajou, et finalement jaune pâle, indice de la disparition d’amidon.

Il se produit dans ces diverses réactions une saccharification plus ou moins complexe de l’amidon, saccha-

(1) Préparation de l’bmpois d’amidon. — On mesure 100 ce. d’eau distillée ; on en prélève quelques centimètres cubes pour délayer 1 gr. de fécule de pomme de terre. On porte le reste de l’eau à l’ébullition et on y fait tomber la suspension d’amidon en agitant constamment. On laisse refroidir et on complète à 100 cc.

(2) Préparation de la ijqueür d’iode. — On triture dans un mortier de verre 0 gr. 5 de Kl et 1 gr. d’I, avec quelques centimètres cubes d’eau distillée. On ajoute ensuite peu à peu 70 cc. d’eau environ. On verse la solution dans un vase jaugé à 100 oc. et on complète à 100 cc. avec l’eau de lavage du mortier.

MOREAtJ. 4

rification qui a fait l’objet de nombreuses théories que nous n’avons pas à faire rentrer dans le présent travail.

Disons toutefois que d’après Lintner (1) et pour Tamylase du malt, il se forme cinq corps : trois dextrines :

Amylodextrine, érythrodextrine, achrodextrine, et deux sucres : isomaltose et maltose.

b) Recherche de l^invertine. — Nous avons opéré de même en remplaçant l’empois par une solution de saccharose à 0,50 pour fO cc. et en mettant à l’étuve à 30°. En faisant un titrage au Fehling avant la mise en marche et un second après un abandon de plusieurs jours, on constate que la quantité de sucres réducteurs a augmenté ; il s’est formé en effet du sucre interverti.

Conditions favorables d’activité des diastases. --

L’intensité des réactions diastasiques que nous venons de voir est très fortement influencée par les conditions physiques et chimiques de l’expérience ; ces conditions d’activité, varient en effet avec la température, la réaction du milieu, l’oxygène, la lumière. Enfin, à côté de ces influences d’ordre physique et chimique, elles varient avec le temps et les quantités de diastases mises en œuvre.

Influence de la température sur l’amylase. — En

faisant agir pendant un même temps de l’amylase de miel sur de l’empois d’amidon, à des températures comprises entre 0 et 100°, il se produit des variations importantes dans la réaction.

On trouve, en effet, deux périodes principales : une

(1) Lintner, D. Cherng., 26, 2b33.

première pendant laquelle l’action diastasique, de très faible qu’elle était à de très basses températures, va en croissant de plus en plus rapidement, pour atteindre un maximum ; c’est la température optimum. Une seconde période à partir de cette température optimum où il y a par contre décroissance de l’activité diastasique jusqu’à une température particulière, où le ferment est détruit et où l’action s’arrête : c’est la température mortelle.

La température optimum n’a pas été très facile à déterminer; toutefois, après quelques tâtonnements, nous avons remarqué que en opérant toujours dans les mêmes conditions, la température la plus favorable à l’activité de la diastase varie entre 40 et 50“ et la température mortelle autour de 85“

Influence de la réaction du milieu sur l’activité de l’amylase. — Kjeldhal (1) avait remarqué que « si l’on ajoute de faibles quantités d’acide à une solution de saccharose additionnée d’invertine, l’inversion se trouve activée ; si l’on en ajoute davantage, on obient bientôt une proportion pour laquelle l’action de l’invertine est ralentie ; pour une proportion plus forte, l’action est de nouveau augmentée. Mais ce dernier effet doit être rapporté à l’acide qui intervertit par lui-même le sucre de canne, alors que les deux premiers sont le résultat de l’influence d’abord activante, puis affaiblissante qu’ils exercent sur l’invertine.

O. Sullivan, Thompson, étudièrent de l’acide sulfurique, en présence de l’invertine.

(1) Kjeldhal. Nogle Jagttagelser over invertin [Merci, fra Carisbory-Laborat,

Fernbach, celle de Facide oxalique^ Lartrique succinique, lactique, acétique.

MM. Maquenne et Roux (1), recherchèrent « la grandéur que doit avoir l’acidité ou l’alcalinité du mélange,, pour que la vitesse de saccharification, dans l’action de l’amylase sur l’empois d’amidon y atteigne sa valeur maxima. » Ils arrivèrent ainsi à faire en moins d’une heure des saccharifications qui auraient exigé plusieurs jours.

En présence des faibles quantités de ferments contenus dans le miel, il était de première importance de surexciter en quelque sorte leur activité ; la solution des ferments du miel étant légèrement acide, pour opérer toujours dans les mêmes conditions, nous avons neutralisé au moyen de NaOH et après de nombreux essais comparatifs, nous avons trouvé qu’il faut ajouter 1 cc. 5 d’une solution titrée d’acide formique à 1 °j„ pour être dans les conditions optimum d’acidité.

Action de l’oxygène et de la lumière. — Parmi les influences d’ordre chimique agissant sur les diastases, il y a lieu de signaler l’action de l’oxygène à laquelle les diastases sont sensibles : « Il y a affaiblissement, elles semblent apparaître comme des corps oxydables dont l’oxydation a pour effet d’atténuer ou même de détruire le pouvoir diastasique (2).

Enfin, la lumière produit comme Foxygène un phéno-

(1) Maquenne et Roux, C. R. A. S., t. CXLII, p. 1-24. (2/ WuHTi, Ûwt., Supp. art. Diastases, p. 60.

mène néfaste sur raçlivité des diastases pt en particulier des diastases en solution.

Aussi, si l’on ne veut pas leur voir subir rapidement une perte notable d’activité, on aura avantage à opérer avec des fioles aussi remplies que possibles, bien bquchées, en verre jaune ou enveloppées de papier.

Action du temps. — Si l’on fait agir une diastase à la température optima, on constate que la quantité de matière transformée est proportionnelle au temps, ou si l’on fait varier la quantité de diastase, on constate qu’au bout du même temps, la quantité de matière transformée est proportionnelle à la quantité de diastase, »

C’est ce qu’on exprime dans une formule unique : « les quantités de diastases nécessaires pour transformer une même quantité de matière sont invereement proportionnelles aux temps pendant lesquels elles agissent. »

On pourra donc doser, sinon la quantité des diastases du miel, mais du moins comparer la richesse diastasique de ces produits sucrés, en dosant la quantité de matière transformée (saccharose amidon), en opérant toujours dans les mêmes conditions de temps.

Application des notions précédentes à l’analyse biologique.

Ces considérations générales étant faites, pour rechercher :

f” Si un miel contient de l’amylase et de l’invertine ;

2“ En quelles proportions.

On procédera de la façon suivante :

1” Recherche de l’amylase. — Cet essai qualitatif

peut se taire directement sur le miel mis en solution ou sur le ferment isolé.

oc) Directement sur le miel. — On dissout 10 gr. de miel dans 10 ce. d’eau distillée ; on divise la solution après filtration en deux parties égales dont l’une est portée à rébullition et servira de témoin. Chacun des deux liquides est mis dans un tube à essai et additionné de 1 cc. d’empois d’amidon à 1 °jo et de 1 cc. 5 d’une solution d’acide formique à 1 “/o après neutralisation de N

la solution du miel au moyen de NaOH On agite et

on abandonne à 45“, pendant un temps variable (de 15 minutes à une demi-heure). On prélève dans chacun des deux tubes, des quantités aliquotes qu’on examine avec la solution iodo-iodurée en notant les teintes obtenues.

j3) Sur le ferment isolé. — On précipite le ferment selon la méthode donnée (p. 48) ; on le met en solution dans 20 cc. d’eau distillée, on divise la liqueur en deux parties égales et on continue comme précédemment.

On opérant ainsi, les teintes obtenues avec l’iode sont beaucoup plus nettes.

2“ Dosage de l’amylase. — On pourrait croire que le polarimètre peut donner- des renseignements rapides, car les dextrines possèdent un pouvoir rotatoire très élevé, beaucoup plus fort que celui du maltose : en conséquence, en supposant que les dextrines aient toutes le même pouvoir rotatoire, il suffirait semble-t-il de précipiter les dextrines par l’alcool, les reprendre par l’eau et de faire un examen polarimétrique. Comme tous les miels renferment des dextrines (Voir tableaux, p. 41 et sniv.), un dosage préalable de ces dernières donnerait

par différence la quantité de dextrines produites par Teffet de la diastase. Mais pratiquement, on ne peut avoir recours à cette méthode.

Il est nécessaire que la liquéfaction de l’empois soit complète pour faire l’examen polarimétrique ; en attendant plus longtemps, on aura sans doute un liquide clair, mais à ce moment, la saccharification est très avancée et on n’ohtient que des déviations polarimétriques difficilement mesurables.

Le procédé de choix sera celui fondé sur le dosage des sucres réducteurs formés :

Dans nos analyses, nous avons opéré sur les ferments isolés dé 20 gr. de miel ; nous avons divisé la solution de ferments en deux parties égales dans deux vases jaugés A et B de 100 cc. (B porté à l’ébullition sert de témoin). Nous avons ajouté après neutralisation 1 cc. 5 de solution d’acide formique à 1 “/o, 50 cc. d’un empois correspondant à 0 gr. 25 de fécule de pomme de terre et complété à 100 cc. avec de l’eau distillée bouillie et refroidie. La précipitation alcoolique entraînant toujours un peu de matière sucrée, nous avons, avant la mise en marche, fait un dosage à la liqueur de Fehling, en prélevant 5 cc. de solution étendue à 25 cc. avec de l’eau distillée.

D’autre part, afin d’arrêter le développement des microorganismes, nous avons ajouté V gouttes de toluène, nous avons bouché fortement les fioles, nous les avons enveloppées de papier pour éviter l’action de la lumière et nous avons abandonné le tout 24 heures dans une étuve réglée à 45'’-50‘’,

Après 24 heures, nous avons dosé les sucres réducteurs formés par un nouveau titrage au Fehling.

La différence des résultats nous a indiqué la quantité de sucres réducteurs formés.

En rapportant les résultats à 100 gr. de miel et en tenant compte des dilutions^ les analyses ainsi conduites nous ont donné les résultats exprimés en grammes de sucres réducteurs formés dans le tableau de la page 60.

Recherche et dosage de l’invertine. — Comme pour l’amylase, on pourra faire l’essai soit directement sur le miel, soit en isolant le ferment.

La présence de l’invertine étant manifestée par l’inversion du saccharose, il faudra nécessairement, pour se rendre compte de la réaction, faire un dosage du sucre interverti ; de sorte que l’essai qualitatif devient un essai quantitatif.

a) Dosage par isolement de l'invertine. — Nous avons opéré comme pour le dosage de l’amylase, en remplaçant l’empois d’amidon par o cc. d’une solution de saccharose à 10 °/o et en abandonnant quatre jours dans une étuve réglée à 25“-30‘’ (Voir résultats p. 60).

jS) Dosage directement sur le miel. — On pourrait opérer directement sur le miel, mais les résultats sont beaucoup moins sensibles qu’en pratiquant comme précédemment : on dissout 20 gr. de miel dans 100 cc. d’eau environ, on ültre et on complète à 200 cc. avec de l’eau distillée après avoir neutralisé el ajouté 3 cc. de la solution d’acide formique à 1 °j„ et 1 gr. de saccharose préalablement dissous dans un peu d’eau. On divise la solution en deux parties égales dans deux 6oles A et B jaugées de 100-110 cc. On dose ensuite les sucres réducteurs de la fiole A. Pour cela, on ajoute V gouttes de S. Ac. de Pb., on complète à 110 cc. et on mélange. On

ajoute ensuite 0 gr. SO de charbon, on agite et on filtre. On prélève enfin 10 ce, du liquide filtré incolore que l’on étend à 100 cc. et on examine au Fehling, en se servant de 10 cc. de liqueur titrée. On a ainsi les sucres réducteurs avant la mise en marche.

D’autre part, on met la fiole B, additionnée de V gouttes de toluène dans une étuve réglée à 25-30" pendant quatre jours et pour titrer les sucres réducteurs formés après ce temps, on refait la même opération que précédemment.

La différence entre les sucres réducteurs du flacon B et du flacon A représente la quantité de sucre interverti formé.

Recherche des oxydases. — La présence des ferments (amylase-invertine) étant constatée, il était permis de se demander, si à côté de ces enzymes, il n’y avait pas, comme dans le lait, produit aussi naturel que le miel, des éléments capables de provoquer l’oxydation de corps facilement oxydables : parapbénylène-diamine, gaïacol, hydroquinone, etc., en présence ou non d’eau oxygénée ; en un mot s’il n’y avait pas des anaéroxydases ou des aéroxydases.

Marpmann(l) se basant sur la réaction de Storeb, veut distinguer les miels centrifugés des miels chauffés et d’après ses observations, les premiers doivent avoir un effet positif, tandis que les derniers ont un effet négatif, par la réaction à la paraphen^'léne-diamine : il ajoute à 10 cc. d’une solution de miel (D2), X gouttes d’une solution à 1 "/„ de parapbénylène-diamine, secoue, verse

(1) Marpmann, Pharm Ztg., 1903, 48, 1001,

ensuite quelques goultes d’eau oxygénée à 3 “/o et agite : le miel centrifugé se colore en bleu gris, puis en violet indigo, le miel chauffé ne se colore pas ».

Nous avons refait ces expériences sur des miels français non chauffés et chauffés :

Dans les deux cas, nous avons obtenu après quelques minutes une coloration grenat et non violette comme avec les oxydases du lait cru par exemple.

Nous avons alors essayé de caractériser les aéroxydases et les anaéroxydases avec la teinture de gayac, la benzidine.., etc.

Avec la teinture de gaïac. —Nous avons pins fO cc. de. miel mis en solution (1-2) et nous avons divisé la solution dans deux tubes à essai : .

Dans l’un, nous avons ajouté d cc. de teinture de gayac fraîchement préparée ;

Dans l’autre, d cc. de la même teinture et une goutte d’eau oxygénée à 1 °/o.

Même après 24 heures, dans les deux cas, nous n’avons obtenu de coloration bleu verdâtre.

En opérant dans les mêmes conditions avec le gaïacol, l’hydroquinone, l’acétate de benzidine, le réactif de Meyer, etc., nous avons eu le même insuccès.

Nous croyons donc pouvoir pouvoir conclure à l’absence d’àéroxydases et d’anaéroxydases.

Catalase. — Cependant, en ajoutant directement l’eau oxygénée dans la solution du miel (1-2) et en mélangeant, nous avons remarqué après quelques minutes un dégagement plus ou moins abondant de bulles d’oxygène. Il est vraisemblable de croire que les corps qui ne provoquent pas l’oxydation de la paraphénylène diamine, de

la benzidine..., etc., en présence de l’eau oxygénée et qui donnent cependant lieu, en présence de ce réactif, à un dégagement d’oxygène inactif, comme l’appelle M. Sar- Lhou (1), sont des catalases.

Dosage de l’oxygène dégagé. — Le dégagement de l’oxygène de la catalase est généralement apprécié, en dosant l’eau oxygénée non décomposée au moyen d une solution de permanganate de potasse (3 gr. 16 pr. 1000) en présence de ■ 1 cc. d’acide sulfurique, d’après la formule :

5 I-P 0 + 2 MnO^ K + 3 SO^ = 2 SO^ Mn + SO*

Mais étant donné la quantité des sucres réducteurs du miel, la teinte rose de la fin, due à l’excès de permanganate de potasse n’est pas stable, aussi, nous avons préféré doser directement le volume d’oxygène dégagé.

Mode opératoire. — On dissout S gr. de miel dans 10 cc. d’eau distillée, bouillie et refroidie, on opère de même avec un témoin porté à l’ébullition et on filtre sur un coton serré. Chacune de ces solutions est versée dans une éprouvette à gaz et additionnée de 10 cc. d’eau oxygénée à 12 vol., au dixième, neutre et à la température du laboratoire.

On agite doucement et on porte sur une cuve à mercure. Après 24 heures, on fait la lecture.

Nous avons appliqué les méthodes biologiques décrites précédemment à l’analyse d’un certain nombre de miels dont les résultats sont exposés dans le tableau suivant (2).

(1) M. Sarthou, J. Ph. et Ch., 6” série, t. XXX, p. 3o0.

(2) Les numéros de la première colonne correspondent aux numéros des miels des tableaux page 40 et il, où nous donnons les résultats micrographiques, saocharimétriques, chimiques.

mVERTINE CALCULÉ OE

AMYLASI

AMYLASE APR]