Examen bactériologique

Si l’on considère le nombre et la variété de microorganismes qui nous entourent, il n’y a rien d’étonnant que nous retrouvions ces germes sur les fleurs, les fruits que nous mangeons (1) et par cela même dans les produits comme le miel, qui nous est fourni par les abeilles.

Or, la matière sucrée puisée dans le nectar des plantes et plus rarement dans la miellée,’ est un excellent milieu de culture pour certaines leviires en attendant qu’elles soient transformées ailleurs, par les insectes et en particulier par les abeilles dans le miel.

Déjà Boutroux.(2), avait remarqué que les levures sont nombreuses sur les abeilles et il avait eu l’idée de

(1) A. Saktoby et Filassier, C. /i. Soc. Biol., mars 1910.

(2) Bodtroüx, Soc. Linéenne de Normandie, 9’ S., 1882, p. 98.

les rechercher dans le miel. Cet auteur avait ensemencé dans du moût de raisin stérilisé, un peu de produit retiré d’une alvéole, et il avait réitéré cette opération avec quatre alvéoles différentes ; le tout avait été mis dans un four de boulanger à 24° environ. Après un certain temps, trois des tubes restèrent dépourvus de tout organisme vivant; le quatrième fut envahi par un mycélium de moisissures.

Pour Boutrou.x « les cellules de levure ne peuvent se développer dans le miel et y meurent. »

M. Alain Caillas (1), dans une conférence sur les «Trésors d’une goutte de miel », cite comme champignons trouvés : le mucor mucedo, le mucor raceniosus, le pénicillium glaucum et une bactérie : le pleurococcus vulgaris.

Nous avons repris l’étude bactériologique de différents miels, qui étaient toujours renfermés dans les alvéoles et nous avons pratiqué nos prises à l’intérieur des alvéoles avec toutes les précautions aseptiques désirables.

Méthodes employées. — Nous avons isolé les espèces qui nous intéressaient en diluant une certaine quantité de miel dans du bouillon de culture dont nous donnons

la formule ci-jointe :

Peptone. 2 gr. »

Glucose. ■. 0 50

Glycérine. . 5 cc.

Eau Q.S. pour. 100 cc.

Nous avons neutralisé par la sonde au 1/10 jusqu’à légère alcalinité et stérilisé ensuite un quart d’heure à 110°.

(1) VApiculteur, 1910.

Nous avons isolé les espèces par la méthode des boîtes de Pétri et par la méthode des stries successives ; nous avons en par ces procédés un isolement parfait des différents germes.

D’autre part, nous avons employé du Raulin acide (1) sur lequel ne pousse que les champignons. Nous avons encore isolé par des dilutions successives les différents champignons.

Une fois ces expériences faites, bactéries et champignons isolés, nous les avons ensemencés sur les différents milieux employés en bactériologie (pomme de terre simple, glycérinée, carotte, gelose, etc.) de façon à en étudier les principales propriétés morphologiques et les différentes propriétés biologiques.

Etude morphologique des espèces : 1) Fixation. — Nous avons fixé, au moyen de la chaleur, de l’alcool^ de l’acide picrique à saturation, du picroformol, etc.

2) Coloration. — Pour colorer nos préparations, nous avons employé :

a) Pour les bactéries : la thionine phéniquée, le violet de gentiane, la fuchsine de Ziehl, la méthode de Gram.

b) Pour les champignons : le bleu lactique, le rouge Congo, le violet de gentiane et surtout le colorant triple de Gueguen à base de sudan III, iode et bleu lactique, qui permet de décéler à la fois le glycogène on l’amidon.

(1) Liquide de Raulin :

.. loOO

Carbonate de magnésie.

Sucre candi.,.

Sulfate d’ammoniaque.

Ac. tartrique.

Suifate de fer.

Nitr. d'ammoniaque.

Sulfate de zinc.

Phosphate d’ammoniaque....

Silicate de potasse.

Carbonate de potasse.

Carbonate de manganèse. . .

teint le protoplasma en bleu et colore les globules de graisse en rouge.

Remarques. — L*optimum cultural des bactéries et des champignons inférieurs a été effectué en disposant dans différentes étitves, aux températures de + lo® + 20" d- 30" + 34" + 37" + 40°, des carottes ensemencées de champignons et de bactéries. Nous avions ainsi une idée de la température la plus favorable aux champignons.

Les essais ainsi conduits, nous ont donné les résultats ci-contre ;