CH’.OH - CH. OH - CH.OH - CH.OH — CH (NH*) — CHO

20) et Y ammoniaque NH1 * 3.

Nous allons voir maintenant comment on peut, sinon séparer et doser chacun de ces produits, tout au moins les réunir en un certain nombre de groupes dont, on déterminera approximativement pour chacun d’eux l’importance relative.

Méthodes d’analyse des produits trypsiques.

Méthode générale. — Pour analyser les produits trypsiques on peut appliquer la même méthode qui a servi à l’étude de la digestion pepsique. Le liquide est tout d’abord traité par le sulfate de zinc acide, et le précipité obtenu donne en bloc les albumoses. Dans la liqueur débarrassée des albumoses, on précipite les peptones par l’acide phosphotungstique; toutefois, on insolubilise en même temps les peptides supérieurs des acides monoaminés, ainsi que les bases hexoniques. Enfin, le filtrat, non précipitable par le réactif tungstique, correspond aux acides monoaminés simples. D’ailleurs, dans une autre partie du liquide, on détermine, par distillation avec la magnésie, l’azote amide.

L’analyse complète des produits de la digestion trypsique comprendrait, outre la séparation et la détermination des albumoses et des peptones restants, la caractérisation des bases hexoniques formées, ainsi que la recherche qualitative et quantitative des divers acides aminés apparus. Malheureusement, en l’état actuel de la science, il n’existe pas de méthode générale permettant, par une marche systématique, d’atteindre ce but. Tout au plus peut-on signaler les méthodes de Drechsel, Kutscher et Kossel pour l’analyse des bases hexoniques, et celle de l’éthérification (1) de Fischer, pour la séparation et

(1) dette méthode consiste à transformer tous les acide3 aminés, en solution alcooli-

que, au moyen de HOl gazeux, en éthers éthyliques, à séparer ceux-ci par distillation fractionnée sous pression réduite, enfin à saponifier chacun d'eux par la soude concentrée

pour remettre les acides en liberté-

TRYPSINE.

l’identification des divers acides aminés. Encore ces recherches sont-elles si complexes, qu’on ne saurait les envisager comme de simples analyses : elles comportent, en effet, de très nombreuses opérations, fort délicates et demandant beaucoup de temps et de matière. De plus, lés résultats qu’elles fournissent, pour très intéressants qu’ils soient, ne peuvent être considérés comme quantitatifs : nous nous abstiendrons donc de les décrire, nous réservant au contraire d’indiquer avec détail une méthode, très simple et très expéditive, permettant d’évaluer avec une approximation très suffisante la totalité des acides aminés présents dans la liqueur : méthode qui est due à Soerensen et qu’on emploie couramment maintenant sous le nom de titrage au formol.

Méthode de Soerensen au formol. — Cette méthode, qui peut servir aussi bien pour le dosage des acides aminés que pour déterminer le degré d’hydrolyse d’une matière protéique, repose sur le principe suivant : Si, à une solution d’acide aminé, neutre du fait de la saturation interne du C02H acide par le NH2 basique, on ajoute du formol, également neutre, celui-ci, en réagissant sur le groupe amine, masque en quelque sorte cette fonction basique, et l’on constate que la solution devient immédiatement acide. Soit par exemple du glycocolle, on a :

/NH2 /N = CH2