LA FIBRINE DU SANG

La fibrine a une littérature très étendue, que je ne veux pas même essayer de résumer, car rien n’est plus confus que son histoire, et quelquefois plus contradictoire. Il en est ainsi parce que l’on a vu dans la fibrine un principe immédiat défini , tandis quelle est quelque chose qui contient des éléments d’organisation. La fibrine varie d’ailleurs de propriétés suivant l’animal , l’âge et l’espèce de sang du même animal. 11 ressort des analyses de MM. Dumas et Cahours que, même au point de vue de la composition élémentaire, il n’y a pas identité entre les fibrines, puisque celle de l’homme et celle du chien se sont montrées quelquefois plus riches en azote 1% Dans ce qui suit il ne s’agira, sauf avis contraire, que de la fibrine de sang artériel et veineux de bœuf, telle qu’on l’obtient des abattoirs, et ensuite lavée , pour l’obtenir très blànche.

Voici ce qui, dans son histoire chimique, n’est pas controversé.

Elle est entièrement formée d’une substance insoluble dans l’eau froide, dans l’alcool et dans l’éther. Humide, elle perd 80 p. o/o de son poids dans le vide, et, séchée ainsi, elle n’absorbe plus toute l’eau qu’elle avait perdue; elle n’en reprend plus que trois fois son poids. (Chevreul.)

La fibrine possède la propriété singulière , découverte par Thénard, de décomposer l’eau oxygénée. Une température de ioo°, dans l’eau bouillante, la lui fait perdre.

Sur la question de savoir si elle est soluble dans l’acide acétique et dans l’acide chlorhydrique étendu, les avis ont été pendant long-

JP Annales de chimie et de physique (3), t. V'I, p. 4 3y .

temps partagés. On admet aujourd’hui sa solubilité dans l’acide chlorhydrique, mais, tandis que M. Bouchardat y voyait une solution de son albuminose, M. Wiirtz assure que «le corps dissous est la syntonine d) ».

Relativement à l’apparence micrographique, il est très important de citer l’observation de MM. Leconte et Goumoens, qui y ont remarqué des granulations.

MM. Dumas et Gahours l’ont nettement distinguée de l’albumine coagulée , en démontrant quelle renferme incontestablement plus d’azote et moins de carbone quelle.

Les élèves de M. Liebig ont fait de grands efforts pour y trouver autant de carbone et d’azote que dans l’albumine; M. Scherer y a même trouvé plus de carbone. De nouvelles analyses ont donné raison à MM. Dumas et Cahours. Je ne reviens pas sur les confusions de Ch. Gerhardt, et j’entre en matière.

Action de la fibrine sur l’empois de fécule. — Certaines considérations m’ont porté à croire que la fibrine devait contenir quelque chose d’organisé. La fibrine que j’ai employée pour cette expérience provenait d’une vache de six à huit ans. La matière était parfaitement blanche, absolument dépourvue de taches rouges, et l’on s’était assuré que 1 oocc des dernières eaux de lavage ne contenaient pas oSr,oo 1 de matière organique. 5 grammes de cette fibrine humide sont introduits dans l’empois de fécule au 3oe. Le mélange a été légèrement créosoté et mis à l’étuve (4o-45° cent.). L’empois a été lentement fluidifié, mais complètement; il y a eu formation de fécule soluble. Je n’examine pas ce que sont devenues les granulations moléculaires de la fibrine; je constate seulement le fait de la fluidification de l’empois par une matière dont l’insolubilité est absolue. Nous rechercherons plus loin si la cause de cette propriété n’est pas la même qui, dans la fibrine, décompose l’eau oxygénée.

(1) Würtz, Traité de chimie biologique, p. 96.

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Fibrine et acide acétique. — La fibrine, introduite dans une grande quantité d’acide acétique à 3 ou 4 équivalents d’eau, bien exempt d’acides chlorhydrique et sulfurique , s’y gonfle sans se dissoudre, même après plusieurs mois, à la température ordinaire. Mais à la température d’environ 5o° la dissolution s’est faite, et l’on a pu filtrer à chaud. La dissolution limpide a été précipitée par l’ammoniaque; toute la matière dissoute a paru être précipitée avant que la saturation fût complète. Les eaux mères et les eaux de lavage ont été évaporées; outre l’acétate d’ammoniaque, le résidu contient un peu de matière organique et beaucoup de matières minérales. Pour 22 grammes de fibrine il avait fallu 2 00“ d’acide acétique.

Une partie de la solution acétique avait servi à prendre le pouvoir rotatoire de la matière dissoute. Trouvé :

a. Pour la combinaison acétique à 1 oo° :

<Jÿ=a'2“>3\> /=2> v= 10“

p = o£r,2, cendres of,ooi, [a]j = 5rj°,5'\.

b. Après destruction de la combinaison acétique et dessiccation à 1 io° :

aj = 2°’3\’ ^ ^10CV

p — oSf, 1 69, cendres osr,oo 1 , [a];- = 68°^.

Si la dessiccation est opérée à plus de 1 1 o°, la matière brunit.

La solution de la fibrine dans l’acide acétique est fonction du temps : il ne suffit pas de chauffer à 6o° pour que la solution s’opère , il faut attendre.

Fibrine et acide chlorhydrique. — M. Boucbardat a trouvé que la fibrine pouvait se dissoudre dans l’acide chlorhydrique très affaibli. Cette observation a été confirmée par MM. Dumas et Cahours, qui ont, en outre, indiqué les conditions de la dissolution,

savoir : un acide contenant plus d’un millième d’acide fumant et une température de 36°. Liebig a sans cesse nié la solubilité delà fibrine dans ces conditions. J’avais un grand intérêt théorique à étudier la question. J’ai fait deux séries d’expériences.

Première série. — Une même quantité de fibrine (60 grammes) est mise dans deux fioles contenant i litre d’eau distillée additionnée de i ec,5 d’acide chlorhydrique très concentré. L’une des fioles avait reçu 2 à 3 gouttes d’acide phénique liquide par i oocc d’eau. Les deux fioles, bouchées, ont été abandonnées à elles-mêmes à la température 'brdinaire de Montpellier au mois de mars (i5° à i8°). Quinze à vingt jours après, l’une des fioles a été examinée. Le contenu est en grande partie liquéfié; le liquide est un peu trouble: il y existe une multitude de granulations moléculaires en suspension. Jeté sur un filtre; la filtration n’est terminée qu’après une dizaine de jours. La fiole qui contenait la fibrine fluidifiée était celle qui n’était pas créosotée ou phéniquée.

Dans le même temps, le mélange qui était fortement phéniqué ne s’était pas liquéfié; la fibrine y était aussi gonflée que le premier jour.

Si le mélange est plus créosoté, la fluidification, pour la même température, est retardée, mais non empêchée, surtout si la température s’élève , comme au mois d’août à Montpellier,

Quoi qu’il en soit, la solution chlorhydrique filtrée, parfaitement limpide , étant traitée par l’ammoniaque étendue , fournit un précipité floconneux, blanc mat, qui a l’aspect de la caséine que l’on précipite des solutions alcalines étendues. Ce précipité représentet-il toute la fibrine ?

Dans une expérience on a dosé ce précipité. 6o grammes de fibrine humide contenant 1 iSr,5 de matière sèche à ioo° ont produit 7&r,6 de ce précipité à ioo°. Il ne représente donc pas toute la fibrine. Nous verrons qu’il faut tenir compte de ce que 1 acide ne dissout pas et de ce que les eaux mères , séparées du précipité , tiennent en solution.

216 M. A. BÉCHAMP,

Seconde série. — Il résulte des études de la première série que la dissolution de la fibrine dans l’acide chlorhydrique est, comme pour l’acide acétique, fonction de la chaleur et du temps; et les expériences où l’on a fait intervenir la créosote ou l’acide phénique tendent à faire penser qu’ily aun troisième facteur. Mais, en outre , il m’est arrivé de manier desfibrines qui ne se dissolvaient pas dans l’acide aussi étendu que celui qui a été employé aux expériences de la première série.

Toutes les fibrines de bœuf, de chien, de porc, de mouton que j’ai maniées se dissolvent dans l’acide à 2/1000, à 3/iooo, si l’on opère à 4o° ou 45°.

J’ai pris le pouvoir rotatoire des solutions chlorhydriques ainsi formées. Le résultat exprime, sans doute, le pouvoir rotatoire d’un mélange et d’une combinaison chlorhydrique; mais il s’agissait de savoir si ce pouvoir était celui de l’albumine du blanc d’œuf.

Pouvoir rotatoire de la fibrine en totalité : il s’agit de la combinaison chlorhydrique entrée en solution.

Fibrine de vache (sang artériel et veineux). Dessiccation à 1 10- 1 20° :

ctj = 4°, 1 5’\, v = 5°%p = oSr, 1 44, cendres oSr,oo 1 , [a \j = 7 2Ü'\.

Fibrine de mouton (sang artériel et veineux). Dessiccation à 1 1 o- 1 2 0° :

atj = 3°,64t\, /= 2 , v = 5"%

P~ o£r, 124, cendres oSr,oo i, [a]j ==i'730,3T\.

Fibrine de porc (sang artériel et veineux). Dessiccation à 1 io° : «j = 2°, 6 1 \, A , t>= 1 Occ, p = oSr, 18, cendres 0^,0005, [<%=72°,5\.

Le pouvoir rotatoire n’est pas celui de l’albumine du blanc d’œuf acidulé d’acide chlorhydrique. Mais on peut avoir la preuve directe qu’il s’agit là du pouvoir rotatoire d’un mélange. En effet, la solution a été mise à concentrer à l’étuve (4o-45° cent.). A un moment donné, elle se prend en gelée; alors, jeté la masse sur un filtre; le liquide filtré , un peu coloré en rose, a été observé. Trouvé :

= 2°,22\, Z=.2,r=io“,

P = oF, 1 8 1 , cendres o&r,oo î , [a]j = 6 1 °,3\,

La matière devient violette au moment d’être sèche. La gelée qui se forme est parfaitement soluble dans l’eau froide.

Remarque. — Voici une observation qui prouve que l’on commettrait une erreur si l’on considérait les pouvoirs rotatoires précédents comme exprimant le pouvoir rotatoire réel des combinaisons chlorhydriques résultant de l’action de cet acide sur la fibrine.

Une fibrine de bœuf n’a pu être dissoute que par un acide à 2,5 à 3 millièmes. La solution limpide et incolore, concentrée à l’étuve, a donné, dessiccation à îoo-i io° :

«/ = 5°,9\, Z = 2 , v = 5cc, p == oSr,2 2 3, cendres oSl',ooo5,

Résultat qui diffère de plus de six unités du nombre moyen qui résulte des pouvoirs rotatoires précédents. La matière, en séchant, avait pris une teinte violette, ce qui n avait pas été observé précédemment. Il est donc fort probable que, dans le cas présent, la combinaison contenait une plus grande quantité d acide chlorhydrique. L’expérience suivante semble légitimer cette conclusion.

La solution chlorhydrique dont il s’agit a ete additionnée de deux fois son volume d’alcool à 94° cent.; il n’y a pas de précipi-

Sa v. ÉTiusG. t. XXVIII. — N° 3.

M. A. BÉCHAMP.

tation, mais, si l’on ajoute de 1 ether, il se forme un précipité blanc qui a été recueilli et lavé à l’alcool éthéré. La matière, essorée, se dissout dans l’eau à la façon de la gomme, en fournissant une solution superbe. Trouvé, après dessiccation à 100-1 io° :

P = o6r, 1 45, cendres o&r,oo i , [<x]y = 6g°\.

Par la dessiccation la matière reste parfaitement incolore ; c’est qu’une partie de l’acide chlorhydrique était restée en solution.

Les solutions chlorhydriques de la seconde série, comme celles de la première , précipitent par l’ammoniaque , et le précipité ne représente pas toute la quantité de fibrine employée. Celle-ci ne se dissout donc pas comme le ferait un principe chimique immédiat , mais les choses semblent se passer un peu comme pour le gluten ou 1 amandine. En effet, les eaux mères et les eaux de lavage réunies , séparées du précipité que forme l’ammoniaque , contiennent notablement de matière albuminoïde en solution; enfin le filtre retient les granulations moléculaires que le microscope révèle dans la solution.

Remarquons donc qu’une portion non négligeable de la fibrine ne se dissout pas dans 1 acide étendu et qu’outre la matière que l’ammoniaque précipite, il reste quelque chose en solution. Est-ce un dédoublement opéré par le concours combiné de l’acide et de la chaleur? Je néglige volontairement d’étudier ici le rôle des granulations moléculaires, me proposant de l’approfondir dans un autre travail.

Ce qui précède conduit a etudier trois substances comme produits de l’action de l’acide chlorhydrique et de la chaleur sur la fibrine :

La partie dissoute que l’ammoniaque précipite : Fibrinine;

La partie dissoute que 1 ammoniaque ne précipite pas : Fibrimine;

La partie insoluble : Granulations moléculaires de la fibrine.

Fibrinine. — C’est le corps que l’on obtient en précipitant les solutions chlorhydriques de fibrine par l’ammoniaque. Le précipité, bien lavé à l’eau, encore humide, se dissout aisément dans l’acide acétique à 3 ou 4 équivalents d’eau; le mélange, d’abord un peu gélatineux, se liquéfie à l’aide d’une douce chaleur. La solution filtrée est absolument limpide et incolore. Trouvé :

à. Pour la combinaison acétique à î oo° :

aj = 3°,6\, /= 2, v = 5cc, p = 0^,1 63, cendres oS'',oo2, [a]7- = 55°,2

b. Après destruction de la combinaison acétique et dessiccation à 1 1 o° :

a7 = 3.°,6\, / = 2, t> = 5cc, p = o®r, 1 33, cendres osi',oo2, [<x]y = 67°,7'\-

Une autre détermination, sur un autre produit, a donné :

p = o®r, 1 4 1 1 cendres o?r,oo2,

On ne peut pas obtenir de solutions plus concentrées. Celle-ci était presque sirupeuse.

Pouvoir rotatoire dans le carbonate de soude. - La matière récemment précipitée se dissout dans une solution de carbonate de soude. La solution est un peu eolorée et filtre lentement. Trouvé à î oo° :

OLj = 2°,5\, /=2, V = 5CC, p = oS‘,096, cendres oS1-,o44, [a]y = 65°, i^\.

Pendant l’évaporation, la liqueur se couvre de pellicules, comme les solutions de caséine.

220 M. A. BÉCHAMP.

J’ai essayé de déterminer directement le pouvoir rotatoire de la fibrinme. La matière a été d’abord bien lavée à l’eau, puis à l’alcool concentré, à l’éther, et enfin séchée dans le vide sec. Dans cet état la fibrinme est blanche, légère, pulvérisable entre les doigts. La dessiccation jusqu’à poids constant étant obtenue, la matière a été dissoute dans l’acide acétique à 3 ou 4 équivalents d’eau, à 45-5o°.

Sur un poids donné de la substance séchée à 1 4o°, on a déterminé les cendres.

Dans la détermination suivante, la valeur de p est inscrite cendres déduites :

aj = 3°,37\, ^=2> v = 4occ, p= isr, [<*];= 67°, 4\.

P our faire un contrôle de la méthode , i oC0 sont évaporés ; après destruction de la combinaison acétique , dessiccation à 1 io° et incinération, trouvé :

ay=3°,37\, /= 2, v = î ocC, p = o&r,25i, cendres o£r,oo2, [a]y = 67°, i'Ny.

J’ai encore pris le pouvoir rotatoire de la fibrinine dans les circonstances suivantes :

A. La solution de fibrine dans l’acide chlorhydrique a été mêlée d’un peu d’alcool, avant de précipiter par l’ammoniaque. Le précipité, bien lavé à l’alcool et à l’eau, encore humide, se dissout très facilement dans l’eau très légèrement ammoniacale. Trouvé :

CLj= 2°,5q\, /= 2, V = 1 0CC,

/> = oSr, 18, cendres oSr,oooÔ, [a]y= 7 1°,9\.

A mesure que l’ammoniaque se dégage pendant l’évaporation, la matière semble se coaguler et prend l’apparence de l’albumine.

B. La solution chlorhydrique de cette fibrinine a été mêlée d’alcool et précipitée par l’éther. Le précipité se dissout sans résidu dans l’eau. Trouvé :

aj=5°,i6\, /= 2, v = 5CC, p = oSr, i84, cendres o?r,ooo4, [«],-= 700, i"\-

Cette observation est curieuse , car le pouvoir rotatoire est celui d’une combinaison chlorhydrique.