DES ALBUMINES DU SERUM DE SANG DE BŒUF

MM. Dumas et Cahours ont distingué dans le sérum deux matières albuminoïdes : l’une a été appelée albumine, l’autre caséine du sang.

Dans mes recherches il s’agit du sérum de sang veineux et artériel de bœuf des abattoirs. Le sérum ainsi obtenu contient certainement plusieurs matières albuminoïdes.

On peut se convaincre, par la lecture des travaux les plus récents, que l’on est loin d’être fixé sur la nature de ces matières. Pour moi, après un grand nombre d’expériences sur du sérum de sang de bœuf ou de vache, préparé par moi ou pris à l’abattoir, mais authenthique, je suis convaincu que le sérum est un mélange extrêmement variable, non seulement au point de vue de sa composition générale, mais des albumines qu’il contient. Et cela se conçoit si l’on considère que dans le sang retentissent tous les accidents de l’organisme. Je vais donc rapporter simplement, sans avoir la prétention de donner mes résultats comme l’expression de la composition albuminoïde du sérum ou de la nature vraie et définitive de ces albumines, les tentatives que j’ai faites pour isoler du sérum des matières albuminoïdes définies.

Du sérum du sang de bœuf aussi exempt que possible de glo-

J’ai fait sur la viande qui a séjourné sous pression des expériences dont j’espère pouvoir bientôt rendre compte.

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bules, de couleur jaune intense, est étendu de son volume d’eau, et traité par le sous-acétate de plomb avec méthode. La première partie du précipité est dense et comme cristalline; elle est surtout minérale; le second précipité, formé après celui-là, s’agglomère ët se réunit en une masse molle. De la première partie du précipité on ne peut rien tirer d’observable, et souvent rien de la seconde.

Lorsque le sous-acétate ne précipite plus rien, la liqueur, fdtrée, séparée du dernier précipité plombique, est traitée par l’extrait de saturne ammoniacal; il se fait aussitôt un précipité très volumineux. On arrête l’addition du réactif avant la fin de la précipitation totale. Le précipité est recueilli et lavé ; les eaux mères et les premières eaux de lavage réunies sont conservées pour être examinées.

I. Précipité par le sous-acétate de plomb. — Il s’agit du précipité formé le second. Délayé dans l’eau et soumis à un courant d’acide carbonique , il a fourni une liqueur contenant fort peu de matière albuminoïde. Ceci est conforme à une ancienne observation de M. Ad. AVürtz; mais il en peut être autrement

II. Précipité par l’extrait de saturne ammoniacal. — Après avoir été bien lavé, il est décomposé par un courant d’acide carbonique. Après la filtration, on obtient une solution contenant du plomb, que l’on enlève par un traitement à l’acide sulfurique étendu, jusqu’à ce qu’un essai démontre que tout le plomb est enlevé et que l’eau de baryte n’y produit pas de précipité. La liqueur que l’on obtient ainsi est limpide , mais trop colorée pour être observée. Elle offre ce caractère de ne pas coaguler par la chaleur; mais l’acide nitrique y fait apparaître un abondant précipité. En vue d’obtenir une liqueur moins colorée, la solution est de nouveau précipitée par l’extrait de saturne ammoniacal. Le nouveau précipité, traité comme plus haut, fournit une solution moins colorée, qui, étendue d’eau, peut être observée; trouvé :

0Lj= 2°, 3 5^, Z= 2, r = 5cc, p = o8r,og3, [a]7- = 63o1\.

Les cendres ont été déduites; p est corrigé des cendres.

Dans une autre opération, avec un autre sérum, la reprécipitation par le sous-acétate ammoniacal a été faite en fractionnant; on n’a décomposé par l’acide carbonique que la seconde partie du précipité, etc. La solution, moins colorée, a donné :

cij = 4V6'\, 1=2, v = 5CC, p = oSr,i74> cendres 0^,008, [a]y = 59°, 8^,

La solution albumineuse évaporée, après dessiccation, fournit l’albumine avec l’apparence habituelle , un peu rousse.

III. Eaux mères séparées du précipité par l’extrait de saturne ammoniacal. — La liqueur est débarrassée de plomb par un courant d’acide carbonique et par un peu d’acide sulfurique. Après filtration soignée, la liqueur est complètement précipitée par l’alcool à 90° cent. Le précipité est lavé avec de l’alcool plus faible; essoré, il est blanc mat, et non muqueux , comme celui que forme le blanc d’œuf; délayé dans l’eau et après quelques heures de macération, jeté sur un filtre. La plus grande partie ne se dissout pas. La liqueur filtrée et les eaux de lavage précipitent par l’alcool.

a. Partie insoluble. — Elle se dissout, sauf un léger résidu, dans une solution étendue de carbonate de soude. La solution alcaline filtrée est traitée par l’acide acétique; rien ne se précipite, même si l’on ajoute de l’acide acétique en excès; mais le précipité reparaît par une addition d’alcool. Recueilli, lavé à l’alcool, essoré, il se dissout dans l’acide acétique , en s’y gonflant d’abord comme un mucilage. La solution filtrée , un peu jaune, a donné, pour le composé acétique à 1 io° :

CLj = 4°,s\, /= 2 , V = 5CC, p= oSr,i82, cendres 0^,002, [«|*6i°,8 \

A l’époque où j’ai fait cette observation, je ne savais pas

détruire la combinaison acétique. Le pouvoir rotatoire est donc trop faible; cette matière serait donc un peu différente de la précédente.

b. Partie soluble. — Le précipité peu abondant, lavé à l’alcool, essoré, se dissout presque complètement dans l’eau. C’est une zymase, car, mis avec de l’empois de fécule à l’étuve, à cinq heures du soir, celui-ci était complètement fluidifié le lendemain.

IV. Les liqueurs alcooliques de l’opération III sont distillées. Le résidu de la distillation, étant évaporé, laisse peu de chose, qui cristallise au milieu d’eaux mères contenant encore un peu de matière albuminoïde.

Tels sont les résultats de l’analyse de ce sérum; ils y révèlent certainement l’existence de trois substances différentes, dont une zymase. On remarquera le fait important de la non-coagulation par la chaleur de la solution albumineuse extraite du précipité par l’extrait de saturne ammoniacal; ce fait, rapproché de ce qui se passe avec le blanc d’œuf, suffirait à lui seul pour distinguer ce produit de la secondovalbumine du blanc d’œuf de poule.

Sur une albumine spéciale du sérum de sang de bœuf. — Du sérum frais, séparé du caillot au laboratoire, en hiver, délayé dans son volume d’eau, est précipité, comme plus haut, par l’extrait de Saturne. Le précipité ne devient pas mou comme celui de la précédente observation. Recueilli en totalité et bien lavé , il est décomposé par l’acide carbonique. La liqueur filtrée ne s’obtient limpide que par une nouvelle filtration sur un filtre précédemment enduit de sulfate de baryte et d’un peu de charbon animal. La solution, bien débarrassée de plomb, comme plus haut, ne coagule pas par la chaleur, mais précipite abondamment par l’acide nitrique. Cette solution a la propriété de donner un précipité par une addition d’éther du commerce.

Le précipité recueilli est soluble dans l’eau.

La solution a donné :

oA=H,54\, 2> v—i occ,

p = os^iog, cendres osr,ooo5, [a]y= 70&fÿfV

La même solution, additionnée d’alcool, ne précipite pas; le précipité n’apparaît que par une addition d’acétate de soude. J’espérais, en procédant ainsi, arriver à obtenir la matière plus pure. Il s’est trouvé que le précipité était insoluble dans l’eau. Il se dissout aisément dans l’acide acétique à 3 ou 4 équivalents d’eau, à à l’aide d’une douce chaleur. Trouvé :

a. Combinaison acétique à 1 1 o° :

aj = 3°,92'N^, /= 2, d = 5cc, p = o£r, 168, |a]j = 58°,3'Ny.

b. Après destruction de la combinaison acétique et dessiccation à i4o° :

aj = 3°,92'\, ï=2, v = 5cc, p = osr,i37, [a]j = 7i°,5\.

Une autre opération sur une solution plus concentrée a donné :

Les cendres n’étaient pas appréciables.

Après la précipitation par l’alcool, la matière devenue insoluble est bien la même que l’éther avait précipitée sans la coaguler.

Hémazymase. — Nous avons vu qu,e par la méthode générale on obtient, avec peine, une petite quantité de zymase. En vue d’en obtenir assez pour en prendre le pouvoir rotatoire et sans l’emploi des réactifs chimiques, j’ai opéré comme ceci :

1 200“ de sérum frais sont soumis successivement à un courant d’acide carbonique et très légèrement acidulés par l’acide acétique , en vue d’en isoler des substances signalées par plusieurs ' Sav. ÉTI1ANG. t. XXVIII. — N° 3. 32

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auteurs, sous divers noms. Je n’ai rien obtenu qui méritât d’être isolé. Le sérum ainsi préparé a été graduellement chauffé, au bain-marie , jusqu a 7 0-7 20 cent. Il s’est produit un coagulum muqueux, que j’ai jeté sur plusieurs filtres. La filtration devant être de longue durée, j’ai créosoté, pour éviter une altération. Les liqueurs filtrées sont colorées en jaune. On les précipite complètement par l’alcool à 9 4° cent. , tant qu’il se produit un précipité. Celui-ci, recueilli, est lavé avec de l’alcool à 85° cent, et avec l’éther ensuite, pour le débarrasser d’une matière jaune qui s’y dissout. Bien égoutté et essoré, il est délayé, broyé, avec de l’eau; une partie du précipité se dissout; la solution filtrée et les eaux de lavage sont de nouveau précipitées par l’alcool, mais le précipité ne se sépare qu’après l’addition d’un peu d’acétate de soude.

Ce nouveau produit est incolore. Lavé à l’alcool et essoré, il se dissout, sauf un léger résidu, dans l’eau. Une nouvelle précipitation, opérée de la même manière, etc., fournit une matière totalement soluble. La solution observée a donné, après dessiccation à 1 4o° :

OLj= 2°,25'\, 1=2, U = 5“,

/> = oer, 101 , cendres o^oooÔ, [oc]j= 55°, 7^.

La solution coagule par la chaleur.

i5cc de cette solution sont mis avec 4o^ d’empois au 20e. Après quatre heures d’action, à l’étuve (4o° cent.), la fluidification commençait; le lendemain elle était parfaite et limpide. La solution contient un mélange de fécule soluble et un peu de dextrine, pas de glucose. v

Tels sont les faits qu’il m’a été donné d’observer. Tout incomplets qu’ils sont, ils démontrent qu’on ne peut pas confondre l’albumine du blanc d’œuf en totalité et les produits qu’on en isole, avec les matières albuminoïdes du sérum, ni celles-ci avec celles de la viande. Au chapitre de l’action du suc gastrique et de la protéine, ces conclusions seront fortifiées.

Et ces faits sont corroborés par les études de M. J. Béchamp sur les albumines pathologiques de l’hydrocèle, de 1 ascite, des épanchements pleurétiques et de la péricardite. Aucun des produits isolés ne pouvait être confondu ni avec 1 ovalbumine, ni avec celles du sérum ou de la viande.

Ce n’est certes pas pour réfuter les expériences des auteurs que j’ai écrit ce qui précède sur la musculine. Si j’ai cité le Traité de chimie biologique de M. Würtz à cette occasion, cest que je ne le' possédais pas au moment d’écrire 1 Introduction. Il était pourtant nécessaire de montrer, par un exemple frappant , 1 état de la science résumé par un auteur aussi compétent, au moment même où je coordonnais mes recherches. On comprendra mieux pourquoi je n’ai pas craint d’allonger ce mémoire en publiant, dans le détail, les tentatives que j’ai faites pour approcher de la vérité et, s il est permis de parler ainsi, pour dissiper de graves erreurs. Non, on ne peut pas confondre des. corps aussi dissemblables.

Résumons en peu de mots ce qui ressort évidemment des recherches sur le blanc d’œuf, au sujet de ce que l’on nomme acidalbumine. Nous avons vu qtie l’addition du carbonate de soude, de l’acide acétique, de l’acide chlorhydrique ne change pas sensiblement le pouvoir rotatoire de la primovalbumine , mais élève notablement celui de la secondovalbumine , lorsque l’observation est faite aussitôt. Au contraire, si l’on fait bouillir les deux albumines avec l’acide acétique, le pouvoir rotatoire séleve sans changer de signe, c’est-à-dire que le nombre qui l’exprime est plus grand en valeur absolue. Le produit dans lequel 1 acide acétique transforme les deux albumines n’est pas le même, puisque le pouvoir rotatoire est sensiblement différent. On comprend donc que la dénomination à' acidalbumine ne répond à rien de défini. Il en est absolument de même si l’on considère le blanc d œuf; dans ce cas, a fortiori, on ne sait pas de quoi il s’agit, puisque cest un mélange ! Ces réflexions s’appliquent aux produits de l’action de l’acide chlorhydrique sur le blanc d’œuf. A plus forte raison, c’est

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donc tout à fait gratuitement que l’on a tenté d’identifier cette prétendue acidalbumine avec la musculine, laquelle est si profondément distincte de la fibrinine et des produits divers qui résultent de l’action des acides et des alcalis sur les albumines incomplexes du blanc d’œuf de poule.