ENSEMENCEMENT DANS LES MILIEUX SOLIDES

milieu avec le fil chargé cle semence ; on fait plusieurs égratignures parallèles. S'il s'agit d'une culture anaérobie on enfonce le plus possible le fil de platine.

Lorsque l'on doit faire des cultures sur plaques ou en boîte de Pétri on opère de la manière suivante :

On fait l'ensemencement dans un tube de gélatine encore fondue (à 3o°-35®), on l'agite et on en coule le contenu sur plaque de verre ou dans une boîte de Pétri, préalablement flambées ; dans ce dernier cas, on soulève un instant le couvercle, qu'on laisse retomber immédiatement, puis on étale la couche sur le fond et on refroidit la boîte en la plaçant au besoin sur la glace.

Lorsque l'on doit charger des chambres humides, on ensemence un ballon de gélatine encore chaude, puis on prélève des gouttes qu'on reporte sur les couvre-objets qui doivent fermer les cuvettes des chambres humides.

Lorsqu'on doit charger un tube à essai, à ouverture rétrécie, on l'ensemence à l'état liquide, on le pose horizontalement et on le roule pour étaler la gélatine.

Étuves. — Les milieux ensemencés ne fermentent qu'à certaines températures ; d'où la nécessité d'étuves réglables.

Ordinairement on a deux étuves, une réglée à 35^ pour les cultures ordinaires ; l'autre réglée à 22" pour les cultures en moûts gélatines devant rester solides.

Ces étuves doivent avoir un régulateur suffisamment parfait.

Régulateur Raulin. — On peut employer une étuve de Gay-Lussac en y adaptant le régulateur Raulin

tfig- 19)-

Celui-ci est constitué par une poche de fer pleine de

mercure.

Cette poche est plongée dans l'étuve.

A sa partie supérieure, circulairement, une fente sert à l'introduction du gaz. La région de la fente est entou-