I. Dastre et Floresco. Comptes rendus Soc. Biologie

Nous ayons également ensemencé du bacillus snbtilis sur le milieu suivant neutralisé et stérilisé à 105° pendant dix minutes.

Gélatine purifiée. 10 gr.

Phosphate d’ammoniaque. 2 gr.

Eau distillée. 100 cm 3 .

Au bout de quelques jours, ce milieu complètement liquéfié par un séjour à l’étuve à 36° a été soumis aux réactions suivantes :

La réaction de Heller était devenue franchement positive ; la réaction au ferrocyanure était restée négative, et l’addition de chlorure de sodium à saturation ou de réactif de Mayer n’a produit aucun trouble, ni précipité. Quant à la réaction de Millon, elle était devenue franchement positive surtout à chaud.

Mais ce qui nous a le plus frappé dans cette dernière expérience, c’est l’absence de précipitation par addition de réactif de Mayer, lequel, comme nous le verrons plus tard, précipite les différentes albumoses ainsi que la peptone d’albumine. Pour contrôler ces derniers faits, nous avons fait agir le sulfate d’ammoniaque à saturation (80 °'/„) et à chaud sur le milieu de culture en question neutralisé. Nous avons obtenu ainsi un précipité abondant, qui, dissous dans l’eau, après lavage à l’alcool à 96°, donnait les trois réactions caractéristiques des matières albuminoïdes, Millon, biuret et xanthoprotéique; la réaction de Heller était encore positive. Enfin, ce qui vérifie l’expérience précédente, l’addition de ferrocyanure de potassium acétique ou de réactif de Mayer n’a donné aucun précipité.

II. — Séparation des matières albuminoïdes dans la peptone de Witte.

■ Nous avons fait cette séparation, dans le but d’étudier plus loin (page 42) l’action d’un certain nombre de sels neutres à saturation et de divers réactifs sur les solutions neutralisées des différentes matières protéiques (albumoses primaires et secondaires, peptone vraie) contenues dans la peptone de Witte, considérée généralement comme produit pur et de trouver ensuite un moyen de les séparer de la gélatine dans les milieux où ces diverses substances se trouvent mélangées ou peuvent être mélangées. A cet effet, nous avons préparé une solution de peptone

de Witte à-fi 0 /o, neutralisée ensuite, afin de précipiter les svntonines qui auraient pu se trouver dans l’échantillon de peptone en question, laisser reposer et filtrer. Le tout a été précipité par addition de sulfate d’ammoniaque à saturation et à chaud, et filtré ensuite sur un filtre Schleiciier sans plis pour recueillir le précipité formé.

Le liquide filtré, donnait encore très nettement la réaction du biuret, ce qui nous permet de conclure à la présence de peptone vraie de Khune, de peptide de Fischer ou de peptoïdes de Hofmeister dans l’échantillon examiné. Le précipité obtenu avec le sulfate d’ammoniaque, lavé avec une solution saturée du même sel, puis à l’alcool à 96°, dissous dans l’eau distillée-et traité à froid par du sulfate de magnésie chimiquement pur à saturation (80 °/ 0 ) a donné après vingt-quatre heures de repos un nouveau précipité formé de gélatine ou d’albumoses. Le liquide filtré, séparé du précipité obtenu avec le sulfate de magnésie, donnait encore la réaction des matières albuminoïdes. De plus, l’addition de 10 gouttes d’acide acétique ou d’acide azotique au mélange de 10 cm 1 de ce liquide filtré avec 10 cm 3 de solution saturée de chlorure de sodium pur, nous a permis de constater la formation d’un précipité disparaissant à chaud et se reformant par refroidissement, ce qui semble caractériser franchement les deutéroalbumoses, dans le filtrat précédent, d’après la théorie de l’école de Khune *, sur la non-précipitation des albumoses secondaires en milieu neutre par le sulfate de magnésie à saturation.

Nous avons ensuite essayé de caractériser le précipité obtenu avec le sulfate de magnésie à saturation. Ce précipité dissous dans quelques centimètres cube d’eau distillée, nous a donné une zone opalescente au contact de l’acide azotique.

Le ferrocyanure de potassium acétique produit un précipité disparaissant à chaud et se reformant à froid, ce qui caractérise nettement les albumoses primaires dans la peptone de Witte.

Nous verrons plus loin (page 43) que par addition de réactif de. Mayer à des solutions neutralisées d’albumoses primaires ou secondaires, on obtient une précipitation complète de ces albumoses.