Wintgen. Pharm. Ztg
2. Patein et Düfau. C. R. Ac. des Sciences , 1899, 128 : 375.
Ce réactif se prépare de la façon suivante : Mettre dans une capsule de porcelaine 160 cm 3 d’acide azotique de D == 1,39 (40°B) et ajouter en, remuant vivement
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le plus rapidement possible de la soude diluée jusqu’à réaction neutre au tournesol sensible. Filtrer,, ajouter 4 gr. environ de zinc pulvérisé, et agiter de temps en temps pendant deux heures. Filtrer, alcaliniser avec quelques gouttes de soude de manière à redissoudre l’oxyde de zinc, qui aurait pu se précipiter et essayer alors la réduction à chaud à la liqueur de Fehling.
Nous avons obtenu une réduction très légère avec tous les échantillons de bouillons sauf un provenant du commerce et qui possédait tous les caractères d’un bouillon préparé avec de l’extrait de viande..Un seul extrait acheté sur la place de Paris nous adonné une réduction de la liqueur de Fehling.
Nous pouvons déjà en conclure à l’existence normale d’une ou plusieurs matières réductrices dans les bouillons de viande, surtout dans les bouillons de ménage, et àccidentellement dans les extraits de viande. 11 reste donc à déterminer la nature des matières réductrices en question.
Beaucoup de chimistes en ont déduit simplement la présence d’un corps réducteur, d’autres, plus affirmatifs, ont cru avoir affaire à du dextrose.
Pour effectuer cette recherche, nous avons opéré sur un litre de bouillon prélevé dans différents hôpitaux de Paris, ou préparé par nous à feu nu ou au bain-marie avec de l’eau distillée et sans addition de légumes, ou bien achetés encore sur le marché de Paris. Quant, aux bouillons concentrés et extraits de viande* nous les avons dilués comme précédemment pour la recberchedti glucose.
II. — Action de la phénylhydrazine sur les bouillons et sur les solutions d'extrait de viande.
La plupart des sucres sont caractérisés : 1° par leur pouvoir rotatoire; 2° par leur pouvoir réducteur; 3° par leur osazone. C’est par l’obtention de cette dernière surtout que nous avons essayé de caractériser le ou les corps réducteurs qui existent normalement dans les bouillons de ménage et dans certains extraits de viande.
pour éviter la formation de grumeaux. 220 gr. d'oxyde rouge de mercure. Au bout de 5 à 6 minutes d'agitation, ajouter 160 cm 3 d’eau distillée et porter à l’ébullition.
Après dissolution complète de l’oxyde, laisser refroidir et verser en filet mince 40 cm 3 de lessive de soude (36°B) au quart. Agiter, compléter le volume à un litre avec de l’eau distillée, et filtrer. ..... .
Voici la technique que nous avons suivie en opérant sur un litre de bouillon, ou sur 500 cm 3 de solution d’extrait de viande.
Dans une fiole d’ERKELMAYER, verser 500 cm 3 de solution précédemment obtenue, déféquée au réactif de Patein et Dufau >, puis ajouter 25 cm 3 de phénylhydrazine pure, 37 cm 3 5 d'acide acétique cristallisable et 25 cm 3 d’une solution d’acétate de soude à 25 °]t Mélanger le tout, et chauffer au B.-M. bouillant pendant une heure au moins.
Nous n’avons obtenu d’osazone qu’avec un seul échantillon d’extrait de viande examiné, caractérisé déjà par une réduction à la liqueur de Fehling après défécation au nitrate mercurique. Cette osazone, au microscope, présente la forme unique en longs cristaux flexueux chevelus, réunis autour d’un point central, décrits par M. Grimbert dans le liquide céphalo-rachidien et que nous avons rencontrés récemment dans le liquide spermatique d’individu normal. L’osazone ainsi obtenue a été recueillie sur un petit filtre Schleicher sans plis, lavée légèrement à l’eau froide et traitée par l’acétone au demi. La partie insoluble dans l’acétone au demi, purifiée au benzène après dessiccation dans le vide sulfurique, adonné comme point de fusion au bloc de Maquenne, par la méthode de fusion instantanée de Bertrand, 230°-232°. Eu la redissolvant dans une petite quantité d’alcool à 60“ chaud, nous avons obtenu par refroidissement des cristaux caractéristiques en branches de genêt de phénylglucosazone. La partie soluble dans l’acétone nous a donné par évaporation lente de cette dernière à l’air libre, ou, dans le vide sulfurique, un résidu ne présentant aucune forme cristalline au microscope et formé uniquement de gouttelettes goudronneuses entièrement solubles dans la benzine.
De tous ces faits, nous pouvons conclure nettement à la présence de glucose dans l’extrait de viande analysé, et caractérisé par la formation de phénylglucosazone fondant à 230°-232°.
L’osazone obtenue dans les mêmes conditions avec les bouillons de ménage, présente au microscope deux formes bien distinctes, l’une en branches de genêts, caractéristique 'du glucose, l’autre moins bien définie.
Nous avons recueilli cette osazone sur un petit filtre sans plis,
1. Patein et Düfau. Journ. Fharm. et Chim., 1899 [6], 10: 433.
nous 1 avons lavée à l’eau froide et traitée comme précédemment par l’acétone au demi.
Après dessiccation dans le vide sulfurique et à l’obscurité, la partie de l’osazone insoluble dans l’acétone au demi et dans l’alcool méthylique a été purifiée par un lavage prolongé à la benzine jusqu’à ce que celle-ci passe complètement incolore. Desséchée ensuite à 1 étuve à 35°, cette osazone a donné comme point de fusion, par la méthode de fusion instantanée de Bertrand, 230°-232°, correspondant exactement à celui de la phénylgluCosazone.
La partie de l’osazone soluble dans l’acétone au demi a été examinée après évaporation lente à l’air de la solution acétoniqut, et présentait au microscope deux formes tout à fait différentes. Cette nouvelle osazone, desséchée comme précédemment, purifiée à la benzine, a donné comme point de fusion, par la méthode de Bertrand, 210°-214°. Reprise par de l’eau très chaude (température de l’eau placée au B.-M.), nous avons obtenu encore deux osazones : 1° de la phénylglucosazone fondant à 230°-232°, insoluble dans l’eau portée à la température du B.-M. ; 2° une deuxième osazone, laquelle, après une nouvelle purification, fondait exactement au bloc de Maquenne à 128°-130°.
L’exameu de plusieurs bouillons nous a donné les mômes résultats : nous avons toujours trouvé de la phénylglucosazone fondant à 230°-232° et une deuxième combinaison hydrazinique fondant entre 128° et 130° et dont la quantité variait avec la richesse des bouillons examinés.
III. — Caractérisation de l’acide glycuronique dans la viande musculaire.
11 existe donc à côté de glucose dont la présence est généralement admise dans les préparations de viande et que nous avons caractérisé par son osazone fondant entre 230°-232°, un autre corps réducteur capable de se combiner avec la phénylhydrazine pour donner une nouvelle osazone fondant vers 130°.