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Il restait encore un ou deux centimètres cubes d'air qui suffisaient pour favoriser le développement de la levure. Je fermais les ballons à la lampe et, la fermentation terminée, j'extrayais le gaz au moyen d’une trompe à mercure. Je dosais CO: récolté sur le mercure. La quantité de gaz trouvée était transformée d’après la formule.
en glucose disparu.
Technique employée pour récolter d’une manière aseptique une certaine quantité de levure pure. — Le procédé simple que jai employé était le suivant. Je cultive les levures dans des ballons ordinaires (matras Bohème). Le sucre disparu, je soutire le liquide fermenté au moyen d’un siphon de 3% de diamètre
. préalablement fermé à la lampe et flambé
CArarle 0 4 Afind’éviter l'introduction des poussières re 4 par suite de l’aspiration d’air que produit le e RE. siphonnement, le siphon était maintenu
contre le col du ballon au moyen du bouchon de coton.
a Avec un peu d'habitude, la levure reste en grande partie sur le fond du ballon. On la lave alors une première fois avec de l’eau distilléestérile eton lalaisse se déposer pendant trois à quatre heures dans un lieu frais. La levure une fois
déposée, on soutirele premier liquide de lavage et on le remplace
par de l’eau distillée également stérile. On agite bien Le ballon de façon à mettre la levure en suspension qu’on enlève ensuite immédiatement du ballon. Un instrument commode pour faire cet enlèvement est une pipette flambée à 170° de la forme indiquée sur la figure. Elle se compose d’une boule B, terminée par deux tubes recourbés a et b. Le tube a a 3 millimètres de
diamètre; comme le siphon, il est fermé à la lampe. Le tube b
a 7 millimètres de diamètre et est bouché par un tampon de
coton. C’est de ce côté qu'aura lieu l’aspiration. Le tube « plonge
dans le ballon. Sa pointe à été cassée et flambée avant d’être introduite dans le ballon. On aspire par b; le liquide et la
levure arrivent dans la boule B.
On enlève la pipette du ballon et la levure est portée dans un
tube à essai vide préalablement stérilisé. Celle-ci se dépose au fond du tube et, 12 heures après, le liquide surnageant est enlevé au moyen d’un siphon. La levure ainsi déposée au fond d’un tube sera désignée par abréviation, dans le cours de ce travail, sous Le nom de Jevure en masse.
L'ensemble des deux lavages ne doit pas durer plus de 24 heures, sinon les cellules vieillissent, leur intérieur devient granuleux et les expériences ne sont plus comparables.
Toutes les fois que j'ai eu besoin d’une certaine quantité
de levure pure, je me suis servi de ce procédé.